酸素応答分解型タンパクを用いる低酸素領域のインビボ放射性イメージング法の開発

利用氧响应可降解蛋白开发缺氧区域体内放射成像方法

• 批准号: 17659010
• 负责人: 佐治 英郎
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17659010/
• 关键词: 低酸素領域; 腫瘍; 分子イメージング; 低酸素誘導因子; ビオチン誘導体; 放射性医薬品

本研究では、臨床診断上強く望まれている腫瘍や虚血性疾患の質的診断を可能とする、低酸素領域のインビボ非侵襲的イメージングのための新しい方法として、(1)低酸素領域においてのみ安定に存在し、正常組織では分解を受けて消失してしまう酸素応答分解型タンパク質に、細胞膜透過性に有効な部位と放射性プローブ結合部位とを導入した二官能性タンパク質を設計する、(2)この二官能性タンパク質を投与して、正常組織での分解と低酸素領域への分布が完了後(プレターゲティング)、このタンパク質の放射性プローブ結合部位に放射性リガンドを選択的に結合させる、ことにより、酸素濃度に逆依存して低酸素領域を陽性にイメージングする方法を開発することを計画した。そのために、前年度までに、酸素応答分解型タンパク質としてHypoxia-inducible Factor-1(HIF-1)に着目し、その分子内の酸素依存的分解に関与するアミノ酸配列を選出し、これに細胞膜透過性を有するアミノ酸配列(PTD)および放射性ビオチン誘導体を結合するためのアビジンをコードするDNA断片を結合して発現ベクターを構築し、これをもとにタンパク質を作成した。本年度は、このタンパク質の低酸素での安定性および細胞、体内動態での腫瘍移行性、プレターゲット法の可能性について検討した。その結果、このタンパク質は低酸素状態で培養した細胞で安定に存在することを認めた。さらに、このタンパク質を蛍光およびRIで標識し、それらを腫瘍移植動物に投与し、その腫瘍集積性を検討したところ、プローブ投与早期には体内全体に分布していたが、その後正常組織からは時間とともに消失し、投与1日後では腫瘍で高濃度に存在していた。さらに、この結果に基づいて、このタンパク質をプレターゲティングし、その後、これに結合する放射性ビオチン誘導体を投与することにより、RIタンパク質自身を投与する場合に比べて、撮像時間の短縮とS/N比の向上の可能性が示され、プレターゲティング法の有効性を見出した。

The present study is intended to provide a new method for the diagnosis of inflammatory disease in the low acid domain, including: (1) the presence of stable tissue in the low acid domain, and the disappearance of stable tissue in the normal tissue. Cell membrane permeability has a site, radioactivity binding site, introduction of bifunctional material,(2) bifunctional material injection, normal tissue decomposition and low acid domain distribution The method for developing the binding site of radioactive substances, the binding site, the binding site, In the past year, the acid-decomposing protein and Hypoxia-inducible Factor-1(HIF-1) have been focused on, and the acid-dependent decomposition of acid-dependent molecules in the molecule is related to the selection of amino acid ligands. This allows the binding of DNA fragments to cell membrane-permeable amino acid ligands (PTDs) and radioactive peptide inducers, and the construction of a protein. This is the first time I've ever seen you. This year, the stability, cellular dynamics, tumor migration, and the possibility of apoptosis were examined. As a result, the quality of the cells cultured in a low acid state is stable. In the early stage of transplantation, tumor aggregation was discussed, and normal tissues disappeared at different time points. One day after transplantation, tumor concentrations were high. In addition, the results show that the probability of shortening the S/N ratio of the imaging time is higher than that of the imaging time.

项目成果

Mechanism of hypoxia-specific cytotoxicity of procaspase-3 fused with a VHL-mediated protein destruction motif of

procaspase-3 与 VHL 介导的蛋白质破坏基序融合的缺氧特异性细胞毒性机制

• 发表时间: 2006
• 期刊: FEBS Lett. 580
• 作者: Haruyo Sambe;Jun Haginaka;Haruyo Sambe;Tazuko Ogawa;Masanori Nakamura;Jun Haginaka;Haruyo Sambe;Ken Hosoya;Jun Haginaka;近藤科江;近藤科江;Shinse Kondou
• 通讯作者: Shinse Kondou

Development of a 111-In-labeled peptide derivative targeting a chemokine receptor, CXCR4, for imaging

开发针对趋化因子受体 CXCR4 的 111-In 标记肽衍生物，用于成像

• 发表时间: 2006
• 期刊: Nucl.Med.Biol. 33・3
• 作者: Haruyo Sambe;Jun Haginaka;Haruyo Sambe;Tazuko Ogawa;Masanori Nakamura;Jun Haginaka;Haruyo Sambe;Ken Hosoya;Jun Haginaka;近藤科江;近藤科江;Shinse Kondou;Hideo Saji
• 通讯作者: Hideo Saji

Optical Imaging of Tumor Hypoxia and Evaluation of Efficacy of a Hypoxia-Targeting Drug in Living Animals

• DOI: 10.1162/15353500200505112
• 发表时间: 2005-07
• 期刊: Molecular Imaging
• 影响因子: 2.8
• 作者: H. Harada;S. Kizaka-Kondoh;M. Hiraoka

低酸素を標的とした生体イメージング分子プローブの開発

针对缺氧的生物成像分子探针的开发

• 发表时间: 2006
• 期刊: 未来医学 21
• 作者: Haruyo Sambe;Jun Haginaka;Haruyo Sambe;Tazuko Ogawa;Masanori Nakamura;Jun Haginaka;Haruyo Sambe;Ken Hosoya;Jun Haginaka;近藤科江;近藤科江
• 通讯作者: 近藤科江

『低酸素がん細胞』を標的としたがんのイメージング・ターゲティング

癌症成像和靶向“缺氧癌细胞”

• 发表时间: 2006
• 期刊: バイオテクノロジージャーナル 6・2
• 作者: Haruyo Sambe;Jun Haginaka;Haruyo Sambe;Tazuko Ogawa;Masanori Nakamura;Jun Haginaka;Haruyo Sambe;Ken Hosoya;Jun Haginaka;近藤科江
• 通讯作者: 近藤科江