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発毛異常示すラットHHRの責任遺伝子の探策

寻找与大鼠 HHR 相关的基因，该基因表现出毛发生长异常

基本信息

批准号：
17659110
负责人：
七島直樹
金额：
$ 1.09万
依托单位：
Hirosaki University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17659110/
关键词：
Hirosaki Hairless Rat 連鎖解析

项目摘要

Hirosaki Hairless Rat(HHR)はSprague-Dawley Rat(SDR)から生じた無毛の変異動物で1984年に弘前大学医学部付属動物実験施設にて発見された。この形質はこれまでに常染色体劣性遺伝であることが証明されているが、その責任遺伝子は同定されていない。本研究ではHHRの責任遺伝子(hhr)を連鎖解析によって同定することを目的としている。昨年度、hhrは第1と第14染色体以外に存在することが明らかになり、それ以外の全染色体を対象に連鎖解析した。SDRと遺伝的に距離の離れているBrown Norway Ratの雌をHHRの雄と交配させ、F_1を作成した。さらに、F_1の雌とHHRの雄で戻し交配させ、N_2を100頭作成した。発毛異常を起こすN_2ラットの肝からDNAを抽出後、全染色体のマイクロサテライトマーカーを用いて連鎖解析した。その結果、hhrは第7染色体のマーカーであるD7Rat!05と有意に連鎖した。さらに、第7染色体に対して3種類のマイクロサテライトマーカー(D7Rat173、D7Rat3およびD7Rat105)を用いて連鎖解析したところ、hhrはD7Rat173とテロメアの間(7q36)に位置することが明らかになった。この位置には発毛に関与する遺伝子であるWNT1、WNT10b、ビタミンDレセプター、Hoxc遺伝子群、塩基性ケラチン遺伝子群などが位置する。これらの遺伝子の発現をRT-PCRで調べたところ、Kb21、23および26の発現が低下していた。ゲノムDNAを用いてPCRするとKb21-26のフラグメントは増幅されず、HHRの発毛異常はこれらの遺伝子の欠失によるものであると示唆された。

Hirosaki Hairless Rat(HHR) was first developed in 1984 as a hairless animal in the Sprague-Dawley Rat(SDR). This type of genetic modification proves that the autosomal genetic modification is identical to the genetic modification. The purpose of this study is to determine the genetic linkage of HHR. In the past year, hhr has been linked to all chromosomes except chromosome 1 and 14. The distance between SDR and HHR was determined by the distance between SDR and HHR. F_1 and F_2 were produced by mating with 100 males. DNA from the liver was extracted and the whole chromosome was genetically linked. The 7th Chromosome is the 7th Rat! 05:00 Intentional linkage. In addition, chromosome 7 is linked to three kinds of chromosome (D7 Rat173, D7 Rat3 and D7 Rat105). The position of the gene is WNT1, WNT10b, Hoxc gene group, basic gene group and position of the gene. The detection of these genes by RT-PCR is very low in Kb21, 23 and 26. The DNA sequence of Kb21 -26 was amplified by PCR, and the DNA sequence of HHR was amplified by PCR. The DNA sequence of Kb21 -26 was amplified by PCR.