ミエリン関連糖蛋白(MAG)プロモーター解析による髄鞘形成プログラムの解明

通过髓磷脂相关糖蛋白 (MAG) 启动子分析阐明髓鞘形成程序

• 批准号: 17659462
• 负责人: 田中 栄
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17659462/
• 关键词: 脊髄損傷; MAG; 神経再生; シュワン細胞; プロモーター解析; 酵母湾ハイブリッド法; Schwann cell; Promoter analysis

脊髄損傷は高度の運動機能障害と長期にわたる闘病を患者に強いるだけでなく、社会的・経済的にも深刻な問題となっているが、その治療法は未だない。損傷脊髄には脱髄病変が存在すると考えられ、軸索信号の伝播に必須であるはずの髄鞘形成が障害されており髄鞘形成を誘導することで、軸索再生を促すことができる可能性がある。本研究では脊髄損傷の病態を髄鞘形成の異常として捉え、髄鞘の形成メカニズムを解明することによって新たな治療ターゲットを見出すことを最終目的とする。主に末梢神経における研究から、髄鞘形成細胞の初期分化マーカーである、髄鞘関連糖蛋白(myelin-associated glycoprotein : MAG)が髄鞘形成初期に発現上昇を示し、かつ、その発現を誘導する遺伝子操作を行うことにより髄鞘形成が促進されることが報告されている。そこで我々は、脱髄神経の再髄鞘化機構を解明するうえで、MAGの発現調節を明らかにすることが重要であると考え、MAG発現の転写レベルでの調節を検討した。ラットMAG遺伝子のプロモーター解析により、同遺伝子プロモーターのシスエレメントを同定した。判明したシスエレメントをベイト配列に用いた酵母ワンハイブリッドスクリーニングにより、シスエレメントに結合し転写活性を高める新規のリングフィンガーファミリー蛋白(RNF)を同定した。このRNFの強制発現により、MAGプロモーターのルシフェラーゼ活性は上昇しMAG転写の活性化が証明された。また、RNAi技術を用いて、シュワン細胞でのRNF遺伝子発現をノックダウンしたところ、MAGプロモーターのルシフェラーゼ活性は低下し、MAGの発現はメッセンジャーレベルでも、蛋白レベルでも低下していることが確認され、RNFはMAGの発現に必須の因子であることが示された。またRNAiによりRNF遺伝子が抑制されたシュワン細胞は、ニューロン・シュワン細胞共存培養で髄鞘を形成せずRNFがMAGの発現調節だけではなく、シュワン細胞の分化・髄鞘形成に重要な役割をしていることが明らかとなった。

Spinal injuries are highly motor impairments, long-term disease, severe problems, social problems, and treatment. The presence of damage to the spine and the possibility of axonal regeneration are discussed. The purpose of this study is to investigate the abnormal formation of spinal cord injury and the formation of spinal cord sheath. Study of the central nervous system, early differentiation of sheath-forming cells, myelin-associated glycoprotein (MAG), early induction of sheath formation, induction of gene manipulation, and promotion of sheath formation. The re-sheathing mechanism of the brain and the MAG are discussed in detail. The analysis of MAG data sets and the analysis of MAG data sets are consistent. It was found that the yeast protein (RNF) had a high binding activity and a high binding activity. The stress response of RNF and MAG showed that the activity of MAG increased. In addition, RNAi technology has been used in the development of RNF gene expression in human cells. MAG protein expression has been reduced. MAG gene expression has been reduced. RNF gene expression has been identified as a factor necessary for MAG expression. RNAi inhibits RNF gene expression in cells and cells, and regulates RNF gene expression in cells and cells.

项目成果

Role of RANKL in physiological and pathological bone resorption and therapeutics targeting RANKL-RANK signaling system.

RANKL 在生理和病理性骨吸收中的作用以及针对 RANKL-RANK 信号系统的治疗。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Immunological Review 108
• 作者: Tanaka S;Takahashi N;Nakamura K;Suda T
• 通讯作者: Suda T

Force sensing by mechanical extension of the Src family kinase substrate p130Cas

• DOI: 10.1016/j.cell.2006.09.044
• 发表时间: 2006-12-01
• 期刊: CELL
• 影响因子: 64.5
• 作者: Sawada, Yasuhiro;Tamada, Masako;Sheetz, Michael P.
• 通讯作者: Sheetz, Michael P.

Identification of an alternatively spliced variant of CAPRI as a possible regulator of RANKL shedding.

鉴定 CAPRI 的选择性剪接变体作为 RANKL 脱落的可能调节剂。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Journal of Biological Chemistry 280
• 作者: Hikita A;Tanaka S;et. al.
• 通讯作者: et. al.

Negative Regulation of Osteoclastogenesis by Ectodomain Shedding of Receptor Activator of NF-□B Ligand.

NF-□B配体受体激活剂胞外域脱落对破骨细胞生成的负调控。

• 发表时间: 2006
• 期刊: Journal of Biological Chemistry 281
• 作者: Hikita A;Nakamura K;Tanaka S;et al.
• 通讯作者: et al.

Th17 functions as an osteoclastogenic helper T cell subset that links T cell activation and bone destruction.

• DOI: 10.1084/jem.20061775
• 发表时间: 2006-11-27
• 期刊: The Journal of experimental medicine
• 作者: Sato K;Suematsu A;Okamoto K;Yamaguchi A;Morishita Y;Kadono Y;Tanaka S;Kodama T;Akira S;Iwakura Y;Cua DJ;Takayanagi H
• 通讯作者: Takayanagi H