泌尿器悪性腫瘍に対するバイオ診断チップを用いたセルフスクリーニングシステム

泌尿系恶性肿瘤生物诊断芯片自筛查系统

• 批准号: 17659498
• 负责人: 並木 幹夫
• 金额: $ 2.05万
• 依托单位: Kanazawa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17659498/
• 关键词: スクリーニング; イムノクロマトセンサー; イムノチップ; テストストリップ; 金コロイド; 前立腺癌; Total-PSA; pro-PSA; マイクロビース; PSA

癌スクリーニングシステムには高い正確性(診断精度),簡便性,迅速性,および非侵襲性等,が要求される.我々はこれらの条件に合致したバイオ診断チップの開発をすすめ,2年間で以下の成果を得ることができた.1.従来のイムノクロマトセンサーに既存抗体を配置したチップを作成し,金ナノ粒子,クロマト担体材料などの選別,最適化した.さらに,マイクロビース配置型やクロマト機能材料配置型に基づいた複数の抗体マーカーが配置可能なマルチ型イムノセンサーを構築した.2.マイクロ流体チップ技術と分離素材技術を連携させ,サンプルに混在するセンサー阻害物質除去能と微量サンプル濃縮能を有する試料前処理チップを作製した.3.発色,蛍光,電極法等のデバイスを用いてマイクロリットルレベルでの微量採血でも診断が可能な高感度測定デバイスを設計し,デバイスを小型化した.4.設計試作した各種センサーの特性を,1)センサー応答の評価,2)前処置条件の検討及びチップ作成,3)サンプリング及び導入装置,4)測定デバイスと小型化の検討,等の観点から再検討し,低侵襲型診断システムを最適化した.5.固相として塗布している抗体溶液中に金コロイド修飾抗体を混ぜることによって,抗原測定時に僅かな抗原捕捉金コロイド修飾2次抗体しかない場合(抗原濃度が薄い)でも固相側の金コロイドによって発色を増強する方法(金コロイド修飾抗体入り固相化抗体塗布法)を開発し,テストストリップの高感度化を達成した.6.金コロイド修飾抗体入り固相化抗体塗布法を用いて,血清total-PSA値2ng/mlを検出目標としたテストストリップを作製した.臨床応用を図るべく,既に当院泌尿器科外来において臨床検体約50例を文橡に同キットを使用したPSAの検出を試み,簡便性,迅速性,正確性,再現性,実用性等を評価した.7.pro-PSAがtotal PSAを凌駕しうる前立腺癌の新規マーカーとなりうるかを検討すべく,ペプチド合成を行いpro-PSAのモノクローナル抗体を作製する予定であったが,適切な抗体が作製できず,今後の検討課題となった.

The requirements for cancer diagnosis include high accuracy (diagnostic accuracy), simplicity, rapidity, and noninvasiveness. The following results have been obtained in 2 years: 1. The configuration of existing antibodies, the selection of support materials, and optimization. 2. Fluid separation technology, material separation technology, and sample pretreatment technology. 3. Color development, luminescence, etc. The electrode method and the like are used for microsampling, diagnosis, possible high-sensitivity measurement, design, miniaturization, 4. Design trial, characteristics of various types of samples, 1) Evaluation of sample response, 2) Discussion of pretreatment conditions and preparation of sample response, 3) Selection and introduction device, 4) Discussion of miniaturization of sample response, etc. Optimization of low invasive diagnostic system. 5. Method for increasing the color of gold on the solid phase side by mixing gold modified antibodies in antibody solutions coated on the solid phase and only by antigen capture gold modified secondary antibodies in antigen determination. 6. The gold modified antibody was used in the solid-phase antibody coating method, and the serum total-PSA value was 2 ng/ml. Clinical use: about 50 cases of external clinical samples from the urology department of our hospital were evaluated for the simplicity, rapidity, legitimacy, reproducibility, and usefulness of PSA detection.7.Pro-PSA for total PSA for advanced adenocarcinoma The appropriate antibody system was developed, and future research topics were discussed.

项目成果

Label-free bioelectronic immunoassay for the detection of human telomerase reverse transcriptase in urine.

用于检测尿液中人端粒酶逆转录酶的无标记生物电子免疫分析。

• 发表时间: 2006
• 期刊: Journal of Electroanalytical Chemsitry 586
• 作者: Takata M;Kerman K;Nagatani N;Konaka H;Namiki M;Tamiya E
• 通讯作者: Tamiya E

Gold nanoparticle based immunochromatography using a resin modified micropipette tip for rapid and simple detection of human chorionic gonadotropin hormone and prostate-specific antigen

• DOI: 10.1016/j.stam.2005.12.008
• 发表时间: 2006-01
• 期刊: Science and Technology of Advanced Materials
• 影响因子: 5.5
• 作者: Teruko Yuhi;N. Nagatani;T. Endo;K. Kerman;Masayuki Takata;H. Konaka;M. Namiki;Y. Takamura;E. Tamiya

Resin-based micropipette tip for immunochromatographic assays in urine samples.

• DOI: 10.1016/j.jim.2006.02.011
• 发表时间: 2006-05
• 期刊: Journal of immunological methods
• 影响因子: 2.2
• 作者: Teruko Yuhi;N. Nagatani;T. Endo;K. Kerman;Masayuki Takata;H. Konaka;M. Namiki;Y. Takamura;E. T