細胞死阻害因子の遺伝子導入による卵巣内潜在的卵母細胞を救命する異種移植法の開発

开发通过引入细胞死亡抑制基因来保存卵巢中潜伏卵母细胞的异种移植方法

• 批准号: 18658105
• 负责人: 眞鍋 昇
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18658105/
• 关键词: アポートシス; 卵巣; 卵胞; 顆粒層細胞; アポートシス阻害因子; 卵巣内潜在的卵母細胞; カスパーゼ系; 細胞死リガンド・受容体系; 哺乳類; 選択的死減; アポトーシス; 細胞死受容体; カスパーゼ; アポトーシス阻害因子; 選択的死滅

成熟した雌家畜の卵巣内には胎児期にディプロテン期で減数分裂を休止した卵母細胞が50万個前後含まれ、性周期毎に卵母細胞は卵胞とともに発育・成熟して排卵に至る。この課程で、最終的に排卵にいたるものの100倍以上もの卵胞が発達を開始するが、殆どが選択的に死滅して1%以下が排卵に至る。この卵胞・卵子の選択的死滅はより優秀で強靭な子孫を残す戦略として重要であるが、分子制御機構は未解明である。本研究は、家畜の卵巣において繰り返される卵胞の選択的死滅を制御している分子機構を解明し、これをもとに卵巣組織の凍結保存法を開発して、卵巣内潜在的卵母細胞を救命することで雌性遺伝子資源の保存を実現する技術を確立することを目指している。昨年度に続いて今年度も卵胞に発現している細胞死受容体系の同定をすすめ、細胞死受容体を介するアポトーシスシグナルの細胞内伝達系の分子機構を精査した。その結果卵胞顆粒層細胞が閉鎖に支配的に関わり、これは細胞内アポトーシスシグナルがミトコンドリアを介して伝達するII型アポトーシス細胞であることを明らかにした。さらに細胞内でアポトーシスシグナル伝達を阻害している新規な阻害因子cFLIPとXIAP(家畜の遺伝子とアミノ酸配列を決定した)を突き止め、免疫不全マウスの腎に異種移植した家畜の未成熟卵胞を含む卵巣組織細片を対象にしてこの阻害因子のin vivo遺伝子導入やiRNA-発現阻害処理を施して、卵胞・卵母細胞の生死を制御して救命する人為的手を開発した。

Mature し た female livestock の egg 巣 に は fetal stage where に デ ィ プ ロ テ ン を resting period で meiosis し た oocytes が contains around 500000 ま れ, sexual cycles in their に oocytes は follicle と と も に 発 yukon, mature し て に to る ovulation. こ で の course, the ultimate に ovulation に い た る も の の 100 times more も の follicle が 発 da を began す る が, perilous ど が sentaku に of die out し て below 1% が に to る ovulation. こ の follicle, egg の sentaku die out of は よ り good strong で 靭 な sons を residual す 戦 slightly と し て important で あ る が は, molecular system royal is not interpret で あ る. This study は, livestock の eggs 巣 に お い て Qiao り return さ れ る follicle の sentaku die out of を suppression し て い る molecular institutions を interpret し, こ れ を も と に eggs 巣 organization の freezing preservation method を open 発 し て potential of oocytes, egg 巣 を help す る こ と で female heritage 伝 subresource の save を be presently す る technology を establish す る こ と を refers し て い る. Yesterday annual に 続 い て our も follicle に 発 now し て い る の cell death by capacity system with fixed を す す め, cells die, let the body を interface す る ア ポ ト ー シ ス シ グ ナ ル の 伝 da is の molecules in the cell organization を fine check し た. そ の results follicle が atresia に granular layer cells of に masato わ り, こ れ は intracellular ア ポ ト ー シ ス シ グ ナ ル が ミ ト コ ン ド リ ア を interface し て 伝 da す る II ア ポ ト ー シ ス cells で あ る こ と を Ming ら か に し た. さ ら に intracellular で ア ポ ト ー シ ス シ グ ナ ル 伝 da を resistance against し て い る new rules な resistance against factor cFLIP と XIAP (livestock の heritage 伝 son と ア ミ ノ acid with column を decided し た) を tu き check め, incomplete immune マ ウ ス に の kidney xenotransplantation し た livestock の immature follicle を 巣 organization fritter containing む eggs を like に seaborne し て こ の resistance factor の in Vivo posthumous son 伝 import や iRNA - 発 resistance against 処 now manage を し て, follicle oocytes の death を suppression し て help す る artificial hand を 発 し た.

项目成果

カラーアトラス獣医解剖学(カラーアトラス獣医解剖学編集委員会編)

彩色图谱兽医解剖学（彩色图谱兽医解剖学编辑委员会编辑）

• 发表时间: 2008
• 作者: 井上雅央;上田弘則;竹内正彦;渡邊康一・山口高弘;塚田英晴;山口高弘・渡邊康一
• 通讯作者: 山口高弘・渡邊康一

Anti-apoptotic activity of porcine cFLIP in ovarian gramslosa cell lines

猪 cFLIP 对卵巢革兰氏阳性细胞系的抗凋亡活性

• 发表时间: 2007
• 期刊: Molecular Reproduction and Development 74
• 作者: Fuko Matsuda-Minehata;Yasufumi Goto;Naoko Inoue;Kazuhiro Sakamaki;P Jorge Chedrese;Noboru Manabe
• 通讯作者: Noboru Manabe

Molecular cloning of porcine; cellular flice-like inhibitory protein.

猪的分子克隆；

• 发表时间: 2006
• 期刊: European Journal of Biology and Chemistry of Proteins 18・2
• 作者: Noboru Manabe;Fuko Matsuda-Minehata;Yasufumi Goto;Akihisa Maeda;Yuan Cheng;Takafumi Sai;Miyuki Kohori;Maiko Endo;Junyou Li
• 通讯作者: Junyou Li

Matrix Meta11oproteinase-12はネフローゼマウス(ICGNマウス)の病態進行に関与する

Matrix Meta11o Proteinase-12参与肾病小鼠（ICGN小鼠）的病理进展

• 发表时间: 2008
• 作者: Iizuka D;Inanami O;Kashiwakura I;Kuwabara M.;山田-内尾こずえ・澤田京子・眞鍋昇
• 通讯作者: 山田-内尾こずえ・澤田京子・眞鍋昇

ブタ卵胞顆粒層細胞においてTNF-αはIL-6とIL-6受容体の発現を誘導する

TNF-α诱导猪滤泡颗粒细胞中IL-6和IL-6受体的表达

• 发表时间: 2007
• 作者: Takahashi E;Inanami O;Asanuma T;Kuwabara M;前田晃央・松田-峯畑二子・程圓・眞鍋昇
• 通讯作者: 前田晃央・松田-峯畑二子・程圓・眞鍋昇