プリオンと銅イオン相互作用の新しいパルス電子スピン共鳴法を用いたアプローチ

用于朊病毒-铜离子相互作用的新脉冲电子自旋共振方法

• 批准号: 18658118
• 负责人: 稲波 修
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18658118/
• 关键词: プリオン; 電子スビン共鳴(ESR); スピンラベル法; 銅イオン; 部位特異的スピンラベル法; 距離情報; CJD; 構造生物学; プリオンタンパク質; 双極子相互作用; 距離計測; BSE; 異常型プリオン; 電子スピン共鳴(ESR)

マウス組み換えプリオンタンパク質を作成し、部位特異的にN96、Q97、W98、T106、V111、D144およびT190をシステイン残基に改変した変異タンパク質を調製した。これら変異プリオンタンパク質にスピンプローブと反応させ部位特異的ラベルを行った。得られた試料はESR測定を行った。N96C、Q97C、W98C、T106CならびにV111Cから得られたESRスペクトルは、Cu2+添加により、常磁性金属とNオキシルとの相互作用による線幅の広がりによるシグナル強度の減弱が観察された。さらにRedfield theoryを用いることによりCu^<2+>とN96C、Q97C、W98C、T106CならびにV111CCのスピンプローブとの距離はそれぞれ9.3A、11.9A、12.7A、9.2Aならびに12.5Aであると計算された。この距離情報からH95とH110のヒスチジン残基にCu^<2+>が配位していることが強く示唆された。また、C末側のCu^<2+>結合部位を同定するためにY156ならびにT189にスピンプローブを導入し、Cu^<2+>との距離を同様に計測したところ、それぞれの距離は6.8Åならびに11.6Åであった。この距離情報からH186にCu^<2+>が配位している可能性が強く示唆された。こうしたCu^<2+>が配位した蛋白質の構造についてはNMRやX線解析が適用できないことから、未だ詳細なモデルが報告されていない。今回、初めてこの領域の構造変化を捉えることに成功した。以上のことから本距離測定法は結晶化を必要とせず、分子量にも依存しない、さらに構造変化を経時的に捉えられる構造解析法として有用なツールとなると考えられる。今後、本研究で得られた情報は異常型プリオンへの経時的な変遷機構の解析や治療薬剤の評価などに重要であると考えられる。

This is the first time to change the structure of N96, Q97, W98, T106, V111, D144, T190 and other residues in different parts of the body. I don't know. I don't know. I don't know what to do. It is necessary to determine the accuracy of the ESR test. N96C, Q97C, W98C, T106C

项目成果

Effects of leptin and tumor necrosis factor-a on degranulation and superoxide production of polymorphonuclear neutrophils from Holstein cows.

瘦素和肿瘤坏死因子-a 对荷斯坦奶牛多形核中性粒细胞脱粒和超氧化物产生的影响。

• 发表时间: 2007
• 期刊: Journal of Veterinary Medical Science. 69(2)
• 作者: Mohamed Ahmed;Kazuhiro Kimura;Mohamed Soliman;Daisuke Yamaji;Yuko Okamatsu-Ogura;Kennedy Makondo;Osamu Inanami;Masayuki Saito
• 通讯作者: Masayuki Saito

Reactive oxygen species mediate shear stress-induced fluid-phase endocytosis in vascular endothelial cells.

活性氧介导血管内皮细胞中剪切应力诱导的液相内吞作用。

• 发表时间: 2006
• 期刊: Free Radical Res. 40(2)
• 作者: Niwa K.;Sakai J.;Karino T.;Aonuma H.;Watanabe T.;Ohyama T.;Inanami O.;Kuwabara M.
• 通讯作者: Kuwabara M.

Dual inhibition of protein phosphatase -1/2A and calpain rescues NGF-differentiated PC12 cells from oxygen-glucose deprivation (OGD)-induced cell death.

蛋白磷酸酶 -1/2A 和钙蛋白酶的双重抑制可将 NGF 分化的 PC12 细胞从氧糖剥夺 (OGD) 诱导的细胞死亡中拯救出来。

• 发表时间: 2006
• 期刊: Journal of Neuroscience Research. 83 (3)
• 作者: T.Nakajima;T.Wakasa;Y.Okuma;O.Inanami;Y.Nomura;M.Kuwabara;K.Kawahara
• 通讯作者: K.Kawahara

X Irradiation Combined with TNF alpha-related Apoptosis-inducing Ligand(TRAIL)Reduces Hypoxic Regions of Human Gastric Adenocarcinom a Xenografts in SCID Mice.

X 辐射联合 TNF α 相关细胞凋亡诱导配体 (TRAIL) 可减少 SCID 小鼠中人胃腺癌和异种移植物的缺氧区域。

• 发表时间: 2008
• 期刊: J Radiat Res(Tokyo). 49(2)
• 作者: Takahashi M;Yasui H;Ogura A;Asanuma T;Kubota N;Tsujitani M;Kuwabara M;lnanami O.
• 通讯作者: lnanami O.

Treatment combining X-irradiation and a ribonucleoside anticancer drug, TAS106, effectively suppresses the growth of tumor cells transplanted in mice

• DOI: 10.1016/j.ijrobp.2006.12.061
• 发表时间: 2007-05-01
• 期刊: INTERNATIONAL JOURNAL OF RADIATION ONCOLOGY BIOLOGY PHYSICS
• 影响因子: 7
• 作者: Yasui, Hironobu;Inanami, Osamu;Kumwabara, Mikinori
• 通讯作者: Kumwabara, Mikinori