新規ヌクレオシド系制ガン剤と放射線照射併用によるアポトーシス細胞死増感作用

核苷类抗癌新药与放射线照射的细胞凋亡增敏作用

• 批准号: 13218003
• 负责人: 稲波 修
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13218003/
• 关键词: 白血病; リンパ腫; 制癌剤; アポトーシス; カスパーゼ; 細胞死; ネクローシス; 株化ガン細胞

ガン細胞特異的にRNA合成阻害起こすことで細胞死を起こすようにデザインされた新規ヌクレオシド系抗がん剤エチニルシチジン(ECyd)が放射線増感作用のメカニズムを調べる目的で本研究は行われた。細胞はp53野生型のヒト胃腺ガン細胞由来MKN-45細胞ならびにp53変異型のチャイニーズハムスター肺線維芽細胞由来V79細胞を用いて検討した。両細胞とも放射線照射単独ではアポトーシスを引き起こさないが、ECydをそれ単独では細胞毒性を示さない濃度のECyd存在下で照射するとアポトーシスを効率よく誘導できることが明らかとなった。このアポトーシス誘導はカスパーゼ阻害剤Z-VAD-FMKならびにキモトリプシン様セリンプロテアーゼ阻害剤TPCKで有意に阻害された。また、細胞周期との関連をフローサイトメトリー法で解析したところ、放射線照射のみではG2期停止が両細胞で起きるのに対して、ECyd存在下ではこのG2期停止機構が破壊され、G2期からアポトーシスが誘引されていることが明らかとなった。以上の結果は細胞のp53のステータスに関わらず、ECydは放射線によるアポトーシスによる細胞死を増感し、そのメカニズムとしてG2期停止の解除によってカスパーゼならびにキモトリプシン様プロテアーゼが関与していることが示された。また、メカニズムとしてどのようにネクローシス様細胞死をアポトーシスによる細胞死に変換するにはG2期のアポトーシス抑制機構の解除が重要性を明らかにすることの重要性を示唆している。ECydがRNA合成阻害を目指してデザインされているので、今後、細胞周期に関する装置で、G2期に新規に合成される必要性のあるCDC2やサイクリンBなどの挙動を調べ、G2期にリンクし、誘導・活性化される未知のアポトーシス抑制因子の同定とそれに対するECyd/放射線による応答を調べることが重要となるであろう。

The aim of this study is to investigate the role of cell-specific RNA synthesis in the regulation of radiation sensitization. Cells derived from MKN-45 cells with wild-type p53 and from V79 cells with p53 variants were examined. In the presence of ECyd, the concentration of radiation in the cells was determined by the induction rate. This kind of damage is caused by the intentional damage caused by Z-VAD-FMK. The relationship between cell cycle and cell cycle is analyzed by different methods. The results showed that the p53 gene expression and ECyd gene expression were related to the increase of cell death and the release of G2 phase arrest. The importance of cell death inhibition mechanisms in G2 phase should be clearly demonstrated. ECyd RNA synthesis inhibition refers to the need for future, cell-cycle-related devices, G2-phase new regulation of RNA synthesis, CDC2-phase activation, induction, activation, and identification of unknown ECyd/radiation inhibitors.

项目成果

M.Tsuji: "Induction of neurite outgrowth in PC12 cells by a-phenyl-N-tert-butylnitron through activation of protein kinase C and the Ras-extracellular signal-regulated kinase pathway"Journal of Biological Chemistry. 276. 9400-9605 (2001)

M.Tsuji：“α-苯基-N-叔丁基硝基通过激活蛋白激酶 C 和 Ras 细胞外信号调节激酶途径诱导 PC12 细胞中的神经突生长”《生物化学杂志》。

H.Abe: "Superoxide generation from human polymorphonuclear leukocytes by liposome-encausulated hemoglobin"Artif Cells Blood Substit Immobil Biotechnol. 29. 275-283 (2001)

H.Abe：“通过脂质体包裹的血红蛋白从人多形核白细胞产生超氧化物”Artif Cells Blood Substit Immobil Biotechnol。

K.Iwasaki: "Kuwabara and M.Niiyama, Isolation, characterization, and cDNA cloning of chicken turpentine-induced protein, a new member of the scavenger receptor cysteine-rich(SRCR)family of protein"Journal of Biological Chemistry. 276. 9400-9405 (2001)

K.Iwasaki：“Kuwabara 和 M.Niiyama，鸡松节油诱导蛋白的分离、表征和 cDNA 克隆，该蛋白是清道夫受体富含半胱氨酸 (SRCR) 蛋白家族的新成员”《生物化学杂志》。

K.Takahashi: "Protein synthesis-dependent apoptotic signalling pathway in X-irradiated MOLT-4 human leukaemia cell line"International Journal of Radiation Biology. 78. 115-124 (2002)

K.Takahashi：“X射线照射的MOLT-4人白血病细胞系中蛋白质合成依赖性凋亡信号传导途径”国际放射生物学杂志。

T.Yamamori: "Roles of p38 MAPK, PKC and PI3-K in the signaling pathways of NADPH oxidase activation and phagocytosis in bovine polymorphonuclear leukocytes"FEBS Letter. 467. 253-258 (2001)

T.Yamamori：“p38 MAPK、PKC 和 PI3-K 在牛多形核白细胞 NADPH 氧化酶激活和吞噬作用信号通路中的作用”FEBS Letter。