多重機能スクリーニングによるプロトンチャネルおよびプロトンシグナル関連分子の探索

通过多功能筛选寻找质子通道和质子信号相关分子

基本信息

  • 批准号:
    18659057
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 2.05万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Exploratory Research
  • 财政年份:
    2006
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2006 至 2007
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

本年度の初めに国内外2つの研究室から相次いで電位依存性プロトンチャネル(H^+チャネル)の性質をもつ分子(VSOPおよびHv)が発見された。そこで、この分子を手がかりにプロトンシグナリングに関わる分子の機能スクリーニングを行った。私達がマイクログリアとRBLのサブトラクションによって作成したデータベースを検索したが、これらの遺伝子に相同性の高いものは含まれていなかった。マウスマイクログリアにVSOPのsiRNAを導入するとnativeH^+電流密度が約1/2に減少した。VSOP遺伝子を過剰発現させた細胞で記録されるH^+チャネルの活1生化閾値はnativeH^+チャネルよりも有意に低く、同一電位でのゲーティングが速い傾向があった。このようにVSOP過剰発現によるH^+チャネルとnativeH^+チャネルは機能的に良く類似しているものの相違点があり、チャネル密度や分子会合の影響に加え、チャネル活性を直接間接に調節する因子が存在する可能性が示唆された。そこで、私達のデータベースより抽出した5個の遺伝子(MG20、23、43、153、161)をVSOP遺伝子と共発現させた。MG20ではH^+チャネル活性化速度が増加する傾向が見られたが、他4種では特に大きな変化が見られなかった。ここまでの実験は全て室温で行ったが、H^+チャネル活性は温度の影響を受けることが知られているので、より生理的な温度で再検討する必要がある。本研究で蓄積したデータベース、アイデアは今後プロトンシグナリングに関わる分子の探索を続けていく上で大いに役に立つと考えている。
This year's first domestic and overseas research laboratory's potential dependence test (H^+チャネル)の性をもつmolecule (VSOPおよびHv)が発见された.そこで、このmoleculeを手がかりにプロトンシグナリングに OffわるmoleculeのFUNCTIONスクリーニングを行った.がマイクログリアとRBLのサブトラクションによって成したデータベースを検SO したが、これらの伝子に Sameness の高いものは有まれていなかった.マウスマイクログリアにVSOPのsiRNAをIntroductionするとnativeH^+The current density is reduced by about 1/2した. VSOP 缝子を过剰発 appear させたcellでrecordされるH^+チャネルの生1biochemical threshold値はnat iveH^+チャネルよりもIntentional にlowく, same potential でのゲーティングがspeed い tendency があった.このようにVSOP によるH^+チャネルとnativeH^+チャネルはfunctional に丽くsimilar to しているものの contradictory Points and density are affected by molecular convergence, activity is directly and indirectly regulated, and factor existence is possible. The そこで, the privately held のデータベースより draw 5 の伝子(MG20, 23, 43, 153, 161) VSOP 伝子と同発 appear させた. MG20ではH^+チャネルactivation speedがincrease and tendencyが见られたが, and other four kinds of specialに大きな変化が见られなかった.ここまでの実験は全て Room temperature で行ったが、H^+チャネルActivity は Effect of temperature をIt's necessary to know the temperature of the body and the physiological temperature of the body. This study will focus on the accumulation of future projectsグに关わるmoleculeのExplorationを続けていく上で大いにserviceに立つと考えている.

项目成果

期刊论文数量(17)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
電位依存性プロトンチャネル:温度パルス法によるイオン透過の温度依存性解析
电压门控质子通道:使用温度脉冲法对离子渗透进行温度依赖性分析
  • DOI:
  • 发表时间:
    2008
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    久野 みゆき;他
  • 通讯作者:
電位依存性プロトンチャネルのユニークな特性と多様な調節メカニズム
电压门控质子通道的独特性质和多样的调节机制
  • DOI:
  • 发表时间:
    2008
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    久野 みゆき;他
  • 通讯作者:
Early and late activation of the voltage-gated proton channel during lactic acidosis through pH-dependent and-independent mechanisms
乳酸性酸中毒期间电压门控质子通道通过 pH 依赖性和非依赖性机制的早期和晚期激活
  • DOI:
  • 发表时间:
    2008
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Yamada;et al.;Akanuma S;Kaoru Yamada;山田薫;Kaoru Yamada;Kaoru Yamada;Toshihiko Endo;Toshiaki Endo;Hirokazu Morihata
  • 通讯作者:
    Hirokazu Morihata
Voltage-and pH-dependence of proton flux through the plasmalemmal vacuolar-type H^+-ATPase in osteoclasts.
破骨细胞中质子通量通过质膜液泡型 H+ -ATP 酶的电压和 pH 依赖性。
  • DOI:
  • 发表时间:
    2006
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Sakai;H. et al.
  • 通讯作者:
    H. et al.
電位依存性プロトンチャネルをプロトンはどのように透過するか?:プロトン透過の温度依存性
质子如何渗透通过电压门控质子通道?:质子渗透的温度依赖性
  • DOI:
  • 发表时间:
    2007
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    久野みゆき;安藤博之;森畑宏一;酒井啓;清水啓史;老木成稔
  • 通讯作者:
    老木成稔
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知道了