骨髄幹細胞由来マスト細胞の温度依存性外向き電流の性質と活性化機構

骨髓干细胞来源的肥大细胞温度依赖性外向电流的特性和激活机制

基本信息

批准号：
07670062
负责人：
久野みゆき
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Osaka City University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07670062/
关键词：
増血幹細胞マスト細胞骨髄プロトン電流温度依存性 ATP pH調節増殖

项目摘要

本年度の研究からマウス骨髄幹細胞由来マスト細胞(以下BMMCと略す)の温度依存性外向き電流について以下のことが明らかになった。(1)24から36度の範囲で温度上昇によって可逆的に、また反復して外向き電流が活性化された。Q_<10>値は、11.3±6・8(mean±SD,n=6)で温度依存性が極めて高いことがわかった。(2)細胞内外溶液のCl,K,Naイオン組成を変えても電流振幅、逆転電位とも一定の変化がなかった。細胞内pHを7.3から5.5に低下させると活性化電位が0から約-40mVへと過分極側に移動した。細胞外pHを6.0から8.7の間で上昇させると活性化電位は過分極側に移動した。逆転電位は内外のpHの差に比例し、他のイオン濃度には依存しないことから、温度依存性の電流はプロトン(H^+)電流であると結論された。(3)脱分極による活性化過程はsingle exponential curveに一致し、時定数は脱分極するほど、温度が高くなるほど、また外液のpHが高くなるほど小さくなった。(4)細胞内溶液からATPを除去したりATPをATPγSで置換するとH^+電流は有意に(P<0.05)減少した。また細胞外ZnによってH^+電流は可逆的にブロックされた。以上のように、BMMCは外向きH^+電流を有している。その高い温度依存性はAPTの分解によるエネルギーを必要とする活性化メカニズムを反映していると推定される。現在このようなH^+電流の報告はない。今回の実験で安定したH^+電流の測定には高濃度(120mM)細胞内bufferを要したことを考えると、BMMCには強力なbufferあるいはpH調節機構が内在していることが示唆される。BMMCは増殖・分化の良いモデル系であり、細胞周期や分化過程においてこのH^+電流がどのような役割を果たしているのかを更に解明していきたい。

今年的研究揭示了以下关于源自小鼠骨髓干细胞的肥大细胞的温度依赖性向外电流（以下简称为BMMC）。（1）在24至36度的范围内，温度升高可逆地激活外向电流。 Q_ <10>值为11.3±6.8（平均值±SD，n = 6），发现它是极大的温度依赖性。（2）即使改变细胞内外溶液的Cl，K和Na离子组成，当前振幅或反向电位也没有恒定的变化。当细胞内pH从7.3降低到5.5时，激活势从0向约-40 mV移到了超极化的一侧。当细胞外pH在6.0和8.7之间增加时，激活电位转移到超极化的一侧。由于反向电势与内部和外部pH的差异成正比，并且不依赖于其他离子浓度，因此得出的结论是温度依赖性电流是质子（H^+）电流。（3）通过去极化的激活过程与单个指数曲线一致，并且随着去极化的速度，时间常数降低，温度越高，外部液体的pH值越高。（4）当从细胞内溶液或ATP中取出ATP时，将H^+电流显着降低（P <0.05）。另外，H^+电流被细胞外Zn可逆地阻塞。如上所述，BMMC具有外部H^+电流。据估计，其高温依赖性反映了通过APT分解需要能量的激活机制。目前没有这种H^+电流的报告。考虑到需要高浓度（120 mm）的细胞内缓冲液来测量本实验中稳定的H^+电流，因此建议BMMC具有强缓冲液或pH调节机制。 BMMC是一个适合增殖和分化的模型系统，我们想进一步阐明这种H^+电流在细胞周期和分化过程中的作用。