エピジェティックス制御破綻を介した神経変性機構の分子基盤の構築

表观遗传调控破坏介导的神经退行性机制的分子基础构建

• 批准号: 18659084
• 负责人: 武山 健一
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18659084/
• 关键词: 神経変性疾患; ポリグルタミン伸長異常; クロマチン; ヒストン修飾; polyQ-AR

申請者はポリグルタミン伸長異常タンパクによるSBMAモデルショウジョウバエを用いた神経変性誘導を指標とした(1)分子遺伝学的アプローチおよび(2)生化学的アプローチによる候補因子探索と、(3)その性状解析からクロマチン構造変換機能異常によるエピジェネティック制御破綻への情報基盤を構築した。(1)分子遺伝学的アプローチによる新規神経変性制御因子の探索SBMAモデルショウジョウバエのpolyQ-AR誘導性の個眼神経変性を指標として、神経変性の変動が観察された25系統を単離した。中でも神経変性を顕著に回復する遺伝子としてRbfの同定に成功し、RbfによるE2F-1転写活性化を破綻させている事を見出した(Suzuki et al.,投稿中)。(2)生化学的アプローチによる新規polyQ-AR相互作用因子の探索クロマチン画分からのpolyQ-ARタンパク複合体精製はトランスジェニックショウジョウバエ個眼より精製後、MALDI-TOF/MS法あるいはLC/MS法にて同定する。その結果、ヒストンシャペロンやelongation factor、RNA結合タンパク等を同定した。3 候補因子の性状解析とエピジェネティック制御情報基盤の構築(1,2)で同定した相互作用因子のクロマチン構造変換能をヒストン修飾や構造、クロマチン構造変換能に着目した生化学的解析を行った。具体的にはヒストンアセチル化、メチル化、ユビキチン化およびリン酸化assay、MNase assay、クロマチンsupercoiling assayやdisruption assayによりin vitro系を構築した。これに必須材料となるヒストン八量体およびDNAとのクロマチン再構築は、HeLa細胞核抽出液およびrecombinant系を両者で整えた。

Applicant's はポリグルタミン abnormal elongation タンパクによるSBMA モデルショウジョウバエを Use the いた神経剉sensitivity-induced を index とした(1) アプローチおよび(2) of molecular genetics ) Exploration of candidate factors of biochemistry and biochemistry, (3) Character analysis of biochemistry and biochemistryンStructural Change Function Abnormality によるエピジェネティック Control Flaws へのInformation Base をConstruction した. (1) Exploration of new regulatory factors in molecular genetics using molecular genetics SBMA Biotechnology olyQ-AR inducible eye irritation index と し て, 神経変性 の変动 が観看された 25 system を単leave した. Rb fによるE2F-1転WRITING ACTIVATION を Flaw させている事を见出した(Suzuki et al., under submission). (2) Exploration of new polyQ-AR interaction factors in biochemical biochemistry and polyQ-AR polyQ-AR complex After body purification and purification, the MALDI-TOF/MS method and the LC/MS method are the same.そのRESULTS, ヒストンシャペロンやelongation factor, RNA binding タンパク, etc. are all determined together. 3 Analysis of the characteristics of candidate factors and the construction of control information base (1,2) and the interaction factors of the same factorsロマチンstructural change energy をヒストンmodification や structure, クロマチン structure 変change energy に目したbiochemical analysis を行った. Specifically, にはヒストンアセチル化, メチル化, ユビキチン化およびリンacidification assay, MNase assay, クロマチンsupercoiling assayやdisruption The assay is constructed in vitro. The necessary materials for this are the eight-dimensional body of DNA and the recombinant of HeLa cell nuclear extract.

项目成果

High-throughput system for analyzing ligand-induced cofactor recruitment by vitamin D receptor

• DOI: 10.1021/bc0601121
• 发表时间: 2007-05-01
• 期刊: BIOCONJUGATE CHEMISTRY
• 影响因子: 4.7
• 作者: Arai, Midori A.;Takeyama, Ken-ichi;Kittaka, Atsushi
• 通讯作者: Kittaka, Atsushi

DEAD-box RNA helicase subunits of the Drosha complex are required for processing of rRNA and a subset of MicroRNAs.

Drosha 复合体的 DEAD-box RNA 解旋酶亚基是 rRNA 和 MicroRNA 子集的加工所必需的。

• 发表时间: 2007
• 期刊: Nat. Cell Biol. 9
• 作者: Fukuda;T.;Yamagata;K.;Fujiyama;S.;Matsumoto;T.;Koshida;I.;Yoshimura;K.;Mihara;M.;Nakamura;T.;Akimoto;C.;Yamamoto;Y.;Katagiri;T.;Foulds;C.;Takezawa;S.;Kitagawa;H.;Takeyama;K.;O'Malley;B.W.;Kato;S.
• 通讯作者: S.

A cell cycle-dependent co-repressor mediates photoreceptor cell-specific nuclear receptor function.

细胞周期依赖性共阻遏物介导感光细胞特异性核受体功能。

• 发表时间: 2007
• 期刊: EMBOJ 26
• 作者: Takezawa;S.;Yokoyama;A.;Okada;M.;Fujiki;R.;Iriyama;A.;Yanagi.Y.;Ito H.;Takada;I.;Kishimoto;M.;Miyajima A.;Takeyama K.;Umesono K.;Kitagawa;H.;Kato;S.
• 通讯作者: S.

Id2 gene-targeted crosstalk between Wnt and retinoid signaling regulates proliferation in human keratinocytes

• DOI: 10.1038/sj.onc.1210320
• 发表时间: 2007-08-02
• 期刊: ONCOGENE
• 影响因子: 8
• 作者: Memezawa, A.;Takada, I.;Kouzmenko, A. P.
• 通讯作者: Kouzmenko, A. P.

1alpha, 25(OH)2D3 -induced transrepression by vitamin D receptor through E-box-type elements in the human parathyroid hormone gene promoter.

1α, 25(OH)2D3 - 通过人甲状旁腺激素基因启动子中的 E-box 型元件诱导维生素 D 受体反式抑制。

• 发表时间: 2007
• 期刊: Mol. Endocrinol. 21
• 作者: Kim;M. -S.;Fujiki;R.;Murayama;A.;Kitagawa;H.;Yamamoto;K.;Yamamoto;Y.;Mihara;M.;Takeyama;K.;Kato;S.
• 通讯作者: S.