内分泌撹乱物質による性ステロイドホルモン攪乱作用メカニズムの解明

阐明内分泌干扰物破坏性类固醇激素的机制

• 批准号: 13027214
• 负责人: 武山 健一
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13027214/
• 关键词: ダイオキシン類; 性ステロイドホルモン撹乱作用; エストロゲン; エストロゲンレセプター(ERα); AhR; Arnt; CBP; p300; ノックアウトマウス

申請者はダイオキシン類の性ステロイドホルモン撹乱作用機構の分子メカニズム解明を核内転写制御因子間のシグナル伝達のクロストークに着目した。すなわち女性ステロイドホルモン(エストロゲン)の作用において応答するエストロゲンレセプター(ER)α、ERβが、ダイオキシンレセプタ-(Aryl hydrocarbon receptor, AhR)およびArntにより遺伝子発現制御機構に撹乱作用を示す可能性を検討した。培養細胞を用いたin vitro系の結果から、ERα及びβへの転写活性が、エストロゲン非存在下において3MCにより誘導され、AhRおよびArntを介して活性化していることを見いだした。さらに、これら両者が細胞内で直接的に相互作用していることを明確にし、これら分子間の相互作用部位を同定した。ERは2つの転写活性化領域を保持しており、N末端側のエストロゲン非依存的な転写活性化領域(AF-1)とC末端側のエストロゲン依存的な転写活性化領域(AF-2)である。ERとAhRとの相互作用領域はAF-1領域であった。このことは、エストロゲン非存在下において3MCがAhR、Arntを介してERの転写活性を誘導する可能性を強く示唆するものである。CBP/p300はERおよびAhRの共通した転写共役因子として知られているが、この際、ERに3MC依存的に結合したAhRがCBP/p3O0と結合し、転写誘導を導いていることが判明した。現在これら一連の作用機構がin vivoで反映されているか検討している。当教室にてERα遺伝子欠損マウスとAhR遺伝子欠損マウスを確保している。これらモデルマウスを用い、3MCが示すエストロゲン撹乱作用を組織、ならびに遺伝発現制御に着目し検討している。具体的にはこれら遺伝子欠損マウスにおける3MCでの子宮重量の変動、およびER標的遺伝子であるc-fos、VEGFの遺伝子誘導を観察している。

Applicants は ダ イ オ キ シ ン class の sex ス テ ロ イ ド ホ ル モ ン 撹 disorderly role institutions の molecular メ カ ニ ズ ム interpret を between planning write suppression factor in nuclear の シ グ ナ ル 伝 da の ク ロ ス ト ー ク に with mesh し た. す な わ ち women ス テ ロ イ ド ホ ル モ ン (エ ス ト ロ ゲ ン) の role に お い て 応 answer す る エ ス ト ロ ゲ ン レ セ プ タ ー (ER) of alpha, beta が ER, ダ イ オ キ シ ン レ セ プ タ - (Aryl hydrocarbon receptor, AhR)およびArntによ the development of 伝 the occurrence of control institutions に撹 the disorderly action を indicates the す possibility を検 to claim た. Cultured cells を with い た results in vitro is の か ら, ER alpha and beta へ び の planning write active が, エ ス ト ロ ゲ ン the presence of に お い て 3 MC に よ り induced さ れ, AhR お よ び Arnt を interface し て activeness し て い る こ と を see い だ し た. さ ら に, こ れ ら struck the が で direct に interaction in the cell し て い る こ と を clear に し, こ れ ら を の interaction between molecular parts with fixed し た. ER は 2 つ の を keep planning to write activeness field し て お り, N terminal side の エ ス ト ロ ゲ ン of interdependent な planning write activation areas (AF - 1) と C terminal side の エ ス ト ロ ゲ ン dependent な planning write activeness areas (AF - 2) で あ る. ERとAhRと であった interaction domain と AF-1 domain であった. こ の こ と は, エ ス ト ロ ゲ ン the presence of に お い て 3 MC が AhR, Arnt を interface し て ER の planning write activity induced す を る strong possibility を く in stopping す る も の で あ る. CBP/p300 は ER お よ び AhR の common し た planning to write a total service factor と し て know ら れ て い る が, こ の interstate, ER に 3 MC dependent に combined し た AhR が CBP/p3O0 と し, planning to write induced を guide い て い る こ と が.at し た. Now the <s:1> acting mechanism がin vivoで reflects されて る る 検 検 for て て る る. When the にてERα in the classroom is in short supply of 伝 seeds and ウスと the AhR is in short supply of 伝 seeds and ウスを ensure that <s:1> て る る る. こ れ ら モ デ ル マ ウ ス を with い, 3 MC が す エ ス ト ロ ゲ ン 撹 disorderly を organization, な ら び に heritage 伝 発 now suppression に with mesh し beg し 検 て い る. Specific に は こ れ ら heritage 伝 son owe loss マ ウ ス に お け る 3 MC で の の uterus weight - dynamic and お よ び ER mark heritage 伝 son で あ る c fos, VEGF の heritage 伝 son induced を 観 examine し て い る.

项目成果

Kitanaka S, Takeyama K, Murayaina A, Kato S.: "The molecular basis of vitamin D-dependent rickets type I"Endocr J.. 48. 427-432 (2001)

Kitanaka S、Takeyama K、Murayaina A、Kato S.：“维生素 D 依赖性佝偻病 I 型的分子基础”Endocr J.. 48. 427-432 (2001)

Watanabe M, Yanagisawa J, Takeyama K, Kato S.: "A subfamily of RNA-binding DEAD-box proteins acts as an estrogen receptor α coactivator through the N-terminal activation domain (AF-1) with an RNA coactivator, SRA."EMBO J.. 20. 1341-1352 (2001)

Watanabe M、Yanagisawa J、Takeyama K、Kato S.：“RNA 结合 DEAD-box 蛋白的亚家族通过 N 端激活结构域 (AF-1) 与 RNA 共激活因子 SRA 充当雌激素受体 α 共激活因子。 “EMBO J.. 20. 1341-1352 (2001)

Matsui D, Sakari M, Takeyama K, Kato S., et al.: "Transcriptional regulation of the mouse steroid 5alpha-reductase typeII gene by progesterone in brain"Nucleic Acids Res. 30. 1387-1393 (2002)

Matsui D、Sakari M、Takeyama K、Kato S. 等人：“大脑中黄体酮对小鼠类固醇 5α-还原酶 II 型基因的转录调节”核酸研究。