脊椎動物の四肢形成におけるマイクロRNAの機能の解析

microRNA在脊椎动物肢体形成中的功能分析

• 批准号: 18659081
• 负责人: 古川 貴久
• 金额: $ 2.05万
• 依托单位: Osaka Bioscience Institute
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18659081/
• 关键词: マイクロRNA; 肢芽形成; let-7; lin-41; 非翻訳配列

本研究ではまず、機能解析が比較的進んでいる初めに報告されたマイクロRNAの一つであるlet-7とそのターゲットlin-41に注目した。我々は四肢の形成に関与する分子を同定しそのメカニズムを明らかにすることを目的として、degenerate RT-PCR及びマイクロアレイを用いたスクリーニング、四肢や骨・軟骨に特異的なコンディショナルノックアウトマウスの作製を行っている。スクリーニングの一つとして、ニワトリ胚の軟骨から抽出したRNAを材料としたdegenerate RT-PCRによるスクリーニングを進める過程で、マイクロRNA let-7のターゲットとして線虫でクローニングされたlin-41のニワトリ・マウスでの相同遺伝子が肢芽にかなり特異的に発現を持つことを見いだし、その機能解析を行った。1.ニワトリおよびマウス個体におけるlin-41の機能解析ニワトリ肢芽にウイルスまたはエレクトロポレーションの手技を用いたlin-41過剰発現・遺伝子ノックダウンを行った。その表現形を形態学的および分子的に評価したが、明らかなものを同定することは出来なかった。同時にノックアウトマウス作製のためにゲノム配列のスクリーニングを行ったが、目的の領域を得ることが出来ず、断念した。現在は、いくつかのプロモーターを使用してのトランスジェニックマウスを作成中であり、その完成を待って解析にうつる予定である。2.四肢形成関与するマイクロRNAのスクリーニング〜骨軟骨形成に関与する遣伝子の発現制御についてマイクロアレイを使用したスクリーニングによって、骨軟骨形成に関与すると考えられる新規遺伝子を複数同定した。骨芽細胞分化・間葉細胞凝集・軟骨細胞分化に関与する結果を得たものについて、その発現制御にマイクロ1郡RNAが関与する可能性を検討している。

This study で は ま ず, functional analytic が comparison into ん で い る early め に report さ れ た マ イ ク ロ RNA の a つ で あ る let - 7 と そ の タ ー ゲ ッ ト Lin - 41 に attention し た. I 々 は limbs の form に masato and す を る molecules with fixed し そ の メ カ ニ ズ ム を Ming ら か に す る こ と を purpose と し て, degenerate rt-pcr and び マ イ ク ロ ア レ イ を with い た ス ク リ ー ニ ン グ, limb や bone, cartilage に specific な コ ン デ ィ シ ョ ナ ル ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス の cropping を line っ て い る. ス ク リ ー ニ ン グ の a つ と し て, ニ ワ ト リ embryo の cartilage か ら spare し た RNA を material と し た degenerate rt-pcr に よ る ス ク リ ー ニ ン グ を into め で る process, マ イ ク ロ RNA Let - 7 の タ ー ゲ ッ ト と し て nematodes で ク ロ ー ニ ン グ さ れ た Lin - 41 の ニ ワ ト リ · マ ウ ス で の same heritage 伝 son が limb bud に か な り specific に 発 を now hold つ こ と を see い だ し, そ の line function analytical を っ た. 1. ニ ワ ト リ お よ び マ ウ ス individual に お け る Lin - 41 の function analytical ニ ワ ト リ limb bud に ウ イ ル ス ま た は エ レ ク ト ロ ポ レ ー シ ョ ン の manipulation を with い た Lin - 41 a turning 発 now, heritage 伝 son ノ ッ ク ダ ウ ン を line っ た. そ の performance form を morphology お よ び molecules に review 価 し た が, Ming ら か な も の を with fixed す る こ と は out な か っ た. At the same time に ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス cropping の た め に ゲ ノ ム match column の ス ク リ ー ニ ン グ を line っ た が, objective の field を る こ と が ず, forsake し た. Now は, い く つ か の プ ロ モ ー タ ー を use し て の ト ラ ン ス ジ ェ ニ ッ ク マ ウ ス を made in で あ り, そ の complete を stay っ て parsing に う つ る designated で あ る. Form 2. Limbs masato and す る マ イ ク ロ RNA の ス ク リ ー ニ ン グ ~ bone cartilage formation に masato and す る son sent 伝 の 発 now suppression に つ い て マ イ ク ロ ア レ イ を use し た ス ク リ ー ニ ン グ に よ っ て, bone cartilage formation に masato and す る と exam え ら れ る new rules but 伝 son を plural with fixed し た. Bone bud differentiation, mesenchymal cells agglutination, cartilage cell differentiation に masato and す る results た を も の に つ い て, そ の 発 now suppression に マ イ ク ロ RNA 1 county が masato and す る possibility を beg し 検 て い る.

项目成果

An Essential Role of Pikachurin, a Novel Dystroglycan Ligand Protein,in Bipolar Terminus Apposition to Photoreceptor Ribbon Synapse in the Retina

皮卡丘林（一种新型肌营养不良聚糖配体蛋白）在视网膜感光带突触双极末端定位中的重要作用

• 发表时间: 2008
• 作者: Furukawa;T.
• 通讯作者: T.

新規膜蛋白質Obifの間葉系細胞凝集および骨芽細胞分化における機能解析

新型膜蛋白Obif在间充质细胞聚集和成骨细胞分化中的功能分析

• 发表时间: 2007
• 作者: Furukawa;T.;古川貴久;古川貴久;寺田晃士;小池千恵子;井上達也;金本隆司
• 通讯作者: 金本隆司

Cloning and expression pattern of 1bx3, a novel chick homeobox gene.

新型鸡同源盒基因 1bx3 的克隆和表达模式。

• 发表时间: 2006
• 期刊: Mechanisms of Development/Gene Expression Patterns 6
• 作者: Kanamoto;T.;Terada;K.;Yoshikawa;H.;Furukawa;T.
• 通讯作者: T.

Cloning and characterization of mr-s, a novel SAM domain protein, predominantly expressed in retinal photoreceptor cells

• DOI: 10.1186/1471-213x-6-15
• 发表时间: 2006-03-16
• 期刊: BMC DEVELOPMENTAL BIOLOGY
• 作者: Inoue, T;Terada, K;Furukawa, T
• 通讯作者: Furukawa, T

Cayman型小脳性運動失調症の原因遺伝子Atcayの作用機構

Atcay（导致开曼型小脑共济失调的基因）的作用机制

• 发表时间: 2007
• 作者: Furukawa;T.;古川貴久;古川貴久;寺田晃士;小池千恵子;井上達也;金本隆司;佐藤茂;青山貴音
• 通讯作者: 青山貴音