新しいタイプのDNA結合蛋白質JκRBPの機能の解析

新型DNA结合蛋白JκRBP的功能分析

• 批准号: 06770082
• 负责人: 古川 貴久
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06770082/
• 关键词: DNA結合蛋白質; 神経発生; ニューロジェニックジーン; 転写因子; EBウイルス; 発癌

我々はRBP-Jκ遺伝子を発現ベクターに組み込み、RBP-Jκ蛋白を発現誘導できるトランスジェニックフライを作成した。この形質転換体にRBP-Jκ蛋白質の過剰発現を誘導したところ、神経芽細胞がなくなり、RBP-Jκ遺伝子はニューロジェニックジーンとしての機能を有することが判明した。上皮芽細胞となる細胞膜上には、ニューロジェニックジーンのひとつであるNotch蛋白質が神経芽細胞からのシグナルを受け取る。遺伝学的および細胞生物学的解析より、RBP-Jκ遺伝子産物がNotchのシグナル伝達系において細胞膜から核へシグナルを伝えることが報告された。我々は酵母ツ-ハイブリッドシステムを用いて、Notch蛋白質とRBP-Jκ蛋白質の会合がショウジョウバエの変位体において変化していることを証明した(投稿中)。また、我々はRBP-Jκ蛋白質の結合性の高いDNA配列がC/TGTGGGAAであることを見いだした。RBP-Jκ蛋白質はこの配列に強く結合し転写を活性化した。さらに、遺伝学的解析によりRBP-Jκ蛋白質と拮抗する機能をもつと考えられてきたHairless蛋白質は、RBP-Jκ蛋白質の転写活性能を強く抑制することも示した。我々はニューロジェニックジーンのシグナル伝達系の最終ステップで働くE(spl)m8のプロモーター領域にRBP-Jκ蛋白質の結合配列を発見し、RBP-Jκ蛋白質がこのプロモーターをin vitroおよびin vivoともに活性化することを示した。(投稿中)。ヒト上咽頭癌の原因ウイルスであるEBウイルスがコードする種々の遺伝子産物のうちEBNA2はBリンパ球が不死化するのに必須の役割を果たす。我々がクローニングしたヒトRBP-Jκ蛋白質はEBNA2と協同でCD23,CD21などの遺伝子の転写を活性化することを証明した。発生やリンパ球の活性化の過程においてもRBP-Jκ蛋白質はEBNA2に相当する細胞因子と会合して様々なイフェクター遺伝子の転写を制御しているものと考えられる。実際にその因子を同定すべく我々はtwo-hybrid systemを用いてマウスembryoからRBP-Jκ蛋白質に会合する蛋白質をスクリーニングし複数個の候補を得ている。

We detected RBP-J κ protein and RBP-J κ protein. We found that there was no significant difference between the two groups. The expression of RBP-J kappa protein was detected in mice, and the expression of RBP-J κ protein was significantly higher than that of normal controls. The epithelial buds were isolated from the cell membrane, and the epithelial buds were isolated from the cell membrane. Notch protein was detected in the cells of the epithelial buds. The analysis of cell biology, RBP-J κ cell biology, Notch cell, cell membrane, nucleus, cell membrane, cell membrane, I use yeast, Notch protein, RBP-J κ protein, rendezvous protein, yeast protein, kappa protein, kappa protein, κ protein, κ protein, κ The combination of RBP-J κ protein and high-level DNA was assigned to C/TGTGGGAA protein kappa protein. RBP-J κ protein binding assay was used to write the activation assay. The RBP-J κ protein antagonistic mechanism was used to detect the activity of Hairless protein and the writing activity of RBP-J κ protein. We do not know how to use RBP-J κ protein (RBP-J κ protein) in the field. We do not know what to do. We do not know how to use RBP-J κ protein in the field. The combination of RBP-J κ protein and RBP-J κ protein has been shown in the column, in vitro protein, in vitro protein, and in vivo. (in a contribution). The cause of cancer in the upper pharynx, the EB, the cancer, the cancer, the cancer I asked you to tell me that RBP-J κ protein, EBNA2 protein, and CD23,CD21 protein, κ protein, In the process of global activation, the RBP-J κ protein EBNA2 is equivalent to the cytokine rendezvous. The international financial factors are the same as those of our two-hybrid system. We use the embryo protein kappa protein RBP-J kappa protein to reproduce the results of several candidate tests.

项目成果

U.Zimber-Strobl: "Epstein-Barr virus nuclear antigen 2 exerts its transactivating function through interaction with recombination signal binding protein RBP-Jκ,the homologue of Drosophila Suppressor of Hairless" EMBO J.13. 4973-4982 (1994)

U.Zimber-Strobl：“Epstein-Barr 病毒核抗原 2 通过与重组信号结合蛋白 RBP-Jκ（无毛果蝇抑制因子的同源物）相互作用发挥其反式激活功能”EMBO J.13 (1994)。

T.Furukawa: "Genetic characterization of Drosophila RBP-Jκ(Suppressor of Hairless)as a neurogenic gene in adult PHS development." Jap.J.Genet.69. 701-711 (1994)

T.Furukawa：“果蝇 RBP-Jκ（无毛抑制基因）作为成人 PHS 发育中神经源性基因的遗传特征。Jap.J.Genet.69 (1994)。