6型蛋白分泌装置OMVを利用した0157コンポーネントワクチン開発に関する研究

利用6型蛋白分泌装置OMV开发0157组分疫苗的研究

• 批准号: 18659123
• 负责人: 山本 友子
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Chiba University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18659123/
• 关键词: 感染症; 細菌; ワクチン; 遺伝子; OMV; O157; 病原性

我々はOuter membrane vesicle(OMV)を6型分泌装置として位置づけ,細菌蛋白の宿主標的細胞へのデリバリーシステムとしての機能について研究を行ってきた。一方,我々は,腸管出血性大腸菌O157:H7の病原性発現に関する研究を展開してきているが,その中でClpXPが本菌の腸管付着に関連するIII型蛋白分泌システムの発現調節に関わることを見出した。昨年度の研究で,O157:H7のOMVの産生条件を検討し,AAA+ protease memberであるClpXPの欠損株が大量のOMVを産生することを明らかにした。そこで本年度は,OMVを利用したO157OMVコンポーネントワクチンの構築を目的として,OMVによるO157:H7の毒素のデリバリーの可能性について検討し以下の事柄を明らかにした。1.大腸菌O157:H7の毒素Stx1/2の特異抗体を用いて,Western blottingを行い,両毒素の分泌量を検討した結果,それらの分泌量はClpXP欠損によって,顕著に増加することが明らかとなった。2.OMVを大量に産生するClpXP変異株よりOMVを精製し,電子顕微鏡解析,生化学的解析を行った。その結果,精製したOMVfractionにはO157:H7の毒素Stx1/2が含まれることが明かとなった。さらにVero細胞に精製したOMVを接種したところ,細胞毒性が観察された。これらの結果は両毒素がOMVによって宿主細胞へ輸送される可能性を強く示唆している。無毒型のSTx1,Stx2を用いて,OMVのコンポーネントワクチン構築をさらに進める意義を見出すことができた。

I 々 は Outer be vesicle (OMV) を 6 type secretory apparatus と し て position づ け, bacterial protein の target host cell へ の デ リ バ リ ー シ ス テ ム と し て の function に つ い を line っ て research て き た. Side, I 々 は, insufflate hemorrhagic coliform O157: H7 の pathogenicity 発 now に masato す る study を started し て き て い る が, そ の in で ClpXP が this bacterium の insufflate pay the に masato even す る III protein secretion シ ス テ ム の 発 now adjust に masato わ る こ と を shows し た. Yesterday で annual の research, O157: H7 の OMV の conditions を 検 for し, AAA + protease member で あ る ClpXP の owe damage strain が large の OMV を produce す る こ と を Ming ら か に し た. そ こ で は this year, OMV を using し た O157OMV コ ン ポ ー ネ ン ト ワ ク チ ン の build を purpose と し て, OMV に よ る O157: H7 の toxin の デ リ バ リ ー の possibility に つ い て beg し 検 の things under the handle を Ming ら か に し た. 1. Coliform O157: H7 の toxin Stx1/2 の specific antibody を い て, Western blotting を い, struck toxin の secretion を beg し 検 た results, そ れ ら の secretion は ClpXP owe loss に よ っ て, 顕 with に raised す る こ と が Ming ら か と な っ た. 2.OMVを generates a large amount of に to produce するClpXP variant strains よ OMVを refining った, electron 顕 micromicroscopy analysis, biochemical analysis を line った. そ の as a result, the refined し た OMVfraction に は O157: H7 の toxin Stx1/2 が containing ま れ る こ と が Ming か と な っ た. Youdaoplaceholder0 Vero cells に refined <s:1> たOMVを inoculated <s:1> たと ろ ろ, cytotoxicity が観 observed された. こ れ ら の results は struck toxin が OMV に よ っ て host cell へ conveying さ れ る strong possibility を く in stopping し て い る. Type non-toxic の STx1, Stx2 を with い て, OMV の コ ン ポ ー ネ ン ト ワ ク チ ン build を さ ら に into め る meaning を shows す こ と が で き た.

项目成果

薬科微生物学

药物微生物学

• 发表时间: 2007
• 作者: Yamamoto;T.;Takaya;A. and Tomoyasu;T;山本友子;山本友子;山本友子;山本 友子
• 通讯作者: 山本 友子

Expressed Salmonella antigens within macrophages enhance the proliferation of CD4+ and CD8+ T Iymphocytes by means of bystander dendritic cells.

巨噬细胞内表达的沙门氏菌抗原通过旁观者树突状细胞增强 CD4 和 CD8 T 淋巴细胞的增殖。

• 发表时间: 2007
• 期刊: FEMS Immunol.Med.Microbiol。 50
• 作者: Eguchi;M;Sekiya;Y;Kikuchi;Y;Takaya;A;Yamamoto;T and Matsui H
• 通讯作者: T and Matsui H

Organization of Tn2610 containing two transposition modules.

Tn2610 的组织包含两个换位模块。

• 发表时间: 2006
• 期刊: Antimicrob. Agents Chemother. 50・4
• 作者: Takaya;A.;Watanabe;M.;Yamamoto;T.
• 通讯作者: T.

Quorum sensing in Pseudomollas aerugihosa is regulated by Lon protease.Abstraets,Cirencester,England.(2007)

铜绿假单胞菌中的群体感应由 Lon 蛋白酶调节。Abstraets，赛伦塞斯特，英格兰。（2007）

• 发表时间: 2007
• 作者: A.Takaya;M.Matsui;T.Tomoyasu;M.Kaya;T.Yamamoto;Yamamoto T
• 通讯作者: Yamamoto T

Coordinated regulation of expression of Salmonella pathogenicity island l and flagellar type III secretion systems by ATP-dependent ClpXP protease.

ATP依赖性 ClpXP 蛋白酶对沙门氏菌致病岛 l 和鞭毛 III 型分泌系统表达的协调调节。

• 发表时间: 2008
• 期刊: J. Bacteriol 190
• 作者: Kage;H.;Takaya;A.;Ohya;M.;Yamamoto;T.
• 通讯作者: T.