マイクロRNAプロファイリングを用いた酸化ストレス応答の網羅的解析

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本研究では、酸化ストレスの病態における新たなRNA干渉因子(miRNA)の関与を明らかにし、miRNAによる酸化ストレスの新たな診断法の開発およびRNA干渉を用いた治療法の可能性を明らかにする。そのために、1.酸化ストレスに対するmiRNAの発現プロファイルを解析し、過酸化水素や紫外線(UV-B)による酸化ストレスに特異的なmiRNAを同定、2.siRNA法などを用いて、1.で同定されたmiRNAの発現量を調節し、これらのmiRNAにより制御を受ける下流分子を同定し、3.また我々の確立した酸化ストレスモデルであるSS-A/Ro52の酸化ストレスによる細胞内局在変化に関与するmiRNAの同定、を行った。本研究では、157種類のmiRNAの発現量をquantitative stem-loop RT-PCR法で定量化することにより、各種酸化ストレス下でのmiRNAの発現のプロファイリングを行った。ヒト唾液腺由来HSG細胞に各種の酸化ストレスを加えてmiRNAの発現のプロファイリングを3セット行ったところ、共通してUV-B刺激で有意に発現が増幅されるmiRNAを複数同定した。これらのmiRNAについて細胞株・組織を超えて同じ傾向が見られるか現在確認中である。その他の酸化ストレスについても特異的なmiRNAの変化が認められるかも検討中である。今後は本研究を活かし、2、3の目標についても研究を進め、酸化ストレスの分子機構の解明と、その診断・治療への応用につなげてゆく。