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新規抗うつ薬結合蛋白質過剰発現マウスのストレス耐性とうつ病モデル動物の検討

过表达新型抗抑郁结合蛋白小鼠的应激耐受性检查和抑郁模型动物

基本信息

批准号：
18659338
负责人：
朝倉幹雄
金额：
$ 2.05万
依托单位：
St.Marianna University School of Medicine
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2008
项目状态：
已结题

项目摘要

プロテオミクス的手法を用い抗うつ薬結合蛋白質を同定することを目的とする。昨年までSSRIであるミルナシプラン結合蛋白質を同定することを目的に、アミド基に結合するアフィニティーカラムを作成し、ラット大脳のホモジェナイズしたサンプルを添加し、ミルナシプランに蛋白質を結合させた。アフィニティーカラムに結合させた結合蛋白質を高濃度のミルナシプランを添加し、分離抽出した結合蛋白質をCy3蛍光標識した。抗うつ薬を結合させていない対照のアフィニティーカラムからの抽出蛋白質をCy5で蛍光標識し、両サンプルを混合後、一枚の二次元電気泳動ゲルを施行した。蛋白質の解析には、2D解析システム・バリアブル・イメージアラナイザーを用い解析し、Cy3、Cy5の蛍光波長の差からレーザーの波長を変えて測定することで各蛋白質のスポットごとの定量差を比較し、さらに質量分析を行った。この方法で、現在抗うつ薬結合蛋白質を十数個同定した。このプロテオミクス手法を用いて同定した抗うつ薬結合蛋白質の一つが、dynamin-1であることを突きとめた。Dynamin Iは脳にのみ存在している。また、プレシナプスでの神経伝達物質分泌に関与している重要な蛋白質であることが、近年の研究で証明された。Dynamin Iは開口分泌時のカルシウムのセンサーの働きをしている。dynamin-1はGTPaseであるので、GTPase活性を測定することで、薬物がdynamin-1の機能に関与するかを検討し、Sertraline,fluvoxamineなどがdynamin-1のGTPase活性を著名に減少させたことを報告した。

The method of binding protein to protein is the same as the method of binding protein. Last year, SSRI decided to add protein to the protein binding system. High concentration of bound protein was added, isolated and extracted by Cy3 light identification. The protein extracted from the sample was identified by Cy5, and the protein was mixed into a two-dimensional electrokinetic sample. Protein analysis, 2D analysis, Cy3, Cy5 wavelength difference, Cy 5 wavelength difference, Cy3, Cy 5 wavelength difference, Cy 3 wavelength difference, Cy 3 wavelength difference, Cy 5 wavelength difference, Cy 3 wavelength difference, Cy 3 wavelength difference, Cy 5 wavelength difference, Cy 3 wavelength difference, Cy 3 wavelength difference, Cy 5 wavelength difference, Cy 3 wavelength difference, Cy5 wavelength difference, Cy3 wavelength difference, Cy3 wavelength difference, Cy5 wavelength difference, Cy 3 wavelength difference, Cy5 wavelength difference, Cy 3 wavelength difference, Cy 3 wavelength difference, Cy 5 wavelength difference, Cy 3 wavelength difference, Cy 3 wavelength difference, Cy 5 wavelength difference, Cy 3 wavelength difference, Cy 5 wavelength difference, Cy 3 wavelength difference, Cy 3 wavelength difference, Cy 5 wavelength difference, Cy 3 wavelength difference This method is now resistant to binding proteins in dozens of identical ways. The protein binding protein is a protein binding protein, and the protein binding protein is a protein binding protein, and the protein binding protein is a protein binding protein. Dynamin I is the only one who exists. Recent studies have shown that the secretion of important proteins in the brain is related to the secretion of important substances. Dynamin I opens its mouth and secretes its contents. GTase activity of dynamin-1 was measured. The functional relationship between dynamin-1 and Sertraline,fluvoxamine and GTase activity of dynamin-1 was reported.