独自のペプチド解析技術を用いた消化器癌の新規腫瘍マーカーの開発

利用独特的肽分析技术开发胃肠癌新肿瘤标志物

• 批准号: 18659363
• 负责人: 朝長 毅
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Chiba University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18659363/
• 关键词: プロテオーム; 消化器癌; 早期診断; 腫瘍マーカー; ペプチド

本研究では,種々の消化器癌患者血清、血漿を用い,独自のペプチド抽出法とHPLCを組み合わせたペプチド解析技術を駆使して,癌の早期診断や再発の予測に有用な新しい腫瘍マーカーとなる低分子量ペプチドを同定することを目的とした。独自のペプチド抽出法を用いた消化器癌の新規腫瘍マーカーの開発 血中には疾患マーカーとなる可能性のある低分子量ペプチドが多数存在するが,アルブミンやグロブリンなどの高分子量キャリアタンパク質が大部分を占めるために,これまでの手法ではそれらのタンパク質が邪魔になって量の少ないペプチドの検出が困難であった。これらのキャリアタンパク質を除去するキットはあるものの,その最も大きな問題点は,高分子量タンパク質の除去に伴いペプチド成分も大きく損失する点である。我々は,血中の低分子量ペプチドを損失することなく高分子量メジャータンパク質を効率よく除去する方法を確立した。また,この方法とHPLCを組み合わせることで癌患者血中に存在する癌特異的ペプチドを単離,同定を試みた。その結果,大腸癌患者血清中に特異的に変化するペプチドの単離・精製・同定に成功した(日本癌学会発表2007)。さらに上記で見つかったマーカー候補ペプチドの安定同位体標識物を化学合成し,それを分析対象の血清に一定量添加して,もともと血清中に存在する内在性のターゲットペプチドのピークの高さと比較することで,ペプチドの定量化に成功した。これにより,様々な血清中のターゲットペプチドの存在量を,導入した安定同位体標識ペプチドを基準として定量解析できることが示された。

This study aims to establish a new method for the determination of low molecular weight proteins in serum and plasma from patients with digestive tract cancer by using a combination of analytical techniques and HPLC. In the development of digestive cancer, the possibility of low molecular weight selection is mostly present, and the high molecular weight selection is mostly present. In the development of digestive cancer, the method of selection is difficult to detect. The highest molecular weight component loss point is the highest molecular weight component loss point. The method of removing the low molecular weight of the blood This method was combined with HPLC to determine the presence of cancer-specific proteins in the blood of cancer patients. As a result, the serum specific to colorectal cancer patients was successfully purified, purified and identified (Japanese Cancer Society Report 2007). The stable isotope marker was synthesized and quantified successfully by adding a certain amount to the serum of the analytical target. The presence of stable isotopes in serum was detected by quantitative analysis.

项目成果

Generation of a monoclonal antibody specific for tissue-nonspecific alkaline phosphatase and its use in a chnical diagnostic study

组织非特异性碱性磷酸酶特异性单克隆抗体的产生及其在临床诊断研究中的应用

• 发表时间: 2007
• 期刊: Hybridoma(Larchmt) 26
• 作者: Ide Y;Miyoshi E;Nakagawa T;et al.;Lu J;Seimiya M;Hocchi K;Nomura F;Ohashi T
• 通讯作者: Ohashi T

Gene expression of 5-fluorouracil metabolic enzymes in hepatocellular carcinoma and non-tumor tissue.

肝细胞癌和非肿瘤组织中5-氟尿嘧啶代谢酶的基因表达。

• 发表时间: 2007
• 期刊: J Chemother 19
• 作者: Yamanda S;Ebihara S;et. al.;Asahito Hama;Hiroto Narimatsu;Jinglan Xu;Tomohiro Kajiguchi;Hiroto Narimatsu;Shizuka Imagama;Hitoshi Kiyoi;Akihiro Tomita;Emi Mizutani;Junji Hiraga;Noirio Asou;Hitoshi Kiyo;Mitsuhiro Okamoto;Akihiro Abe;Manabu Ninomiya;Masamitsu Yanada;Hitoshi Kiyoi;Mitsuhiro Okamoto;Manabu Ninomiya;Akihiro Abe;Masamitsu Yanada;Tomoki Naoe;Manabu Ninomiya;Masamitsu Yanada;Hitoshi Kiyoi;Akihide Atsumi;Masamitsu Yanada;Momoko Suzuki;Tomoko Yamamoto;Hitoshi Kiyoi;Sivasudaram Karnan;Yukimasa Shiotsu;Akihiro Tomita;Tomohiko Sato;Toshihiro Iwasaki;Hiroto Narimatsu;Yuichi Ishikawa;Akihiro Abe;Lu J;Seimiya M;Hocchi K;Nomura F;Ohashi T;Sunaga M
• 通讯作者: Sunaga M

消化器癌の新規腫瘍マーカー探索

寻找新的胃肠癌肿瘤标志物

• 发表时间: 2007
• 作者: Yahiro;K.;朝長 毅;朝長 毅
• 通讯作者: 朝長 毅

プロテオミクスを用いた消化器がんの病態解明と臨床応用。蛋白質の翻訳後修飾と疾患プロテオミクス

利用蛋白质组学和临床应用阐明胃肠癌的病理学。

• 发表时间: 2006
• 作者: Kanda;T;朝長 毅;朝長 毅
• 通讯作者: 朝長 毅

Development of an ELISA method for detecting immune complexes between tissue-nonspecific alkaline phosphatase and immunoglobulinG

开发用于检测组织非特异性碱性磷酸酶和免疫球蛋白G之间的免疫复合物的ELISA方法

• 发表时间: 2007
• 期刊: J. Clin. Lab Anal 21
• 作者: Hocchi K.;Ohashi T.;Miura T;Sasagawa K;Oda K.;et. al.
• 通讯作者: et. al.