siRNAによる歯周組織再生の試み

尝试使用 siRNA 进行牙周组织再生

• 批准号: 19659514
• 负责人: 中村 正明
• 金额: $ 2.05万
• 依托单位: Osaka Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19659514/
• 关键词: S100A4遺伝子; siRNA; 歯周組織再生; in vitro; 未分化間葉系幹細胞; ティッシュエンジニアリング; siSTABLE

研究の目的:未分化間葉系幹細胞(MSCs)は組織再生で移植組織や器官として分化することが可能であり,骨芽細胞から骨へ分化させることもできる.S100A4遺伝子はS100カルシウム結合蛋白に属しており,MSCsでの骨芽細胞遺伝子発現を抑制し骨芽細胞分化を調整している.また,RNAiは遺伝子特異的な翻訳後のサイレンシングであり,遺伝子サイレンシングとして強力なツールとなり得る.そこで我々はヒトMSCsにおいて,S100A4遺伝子をRNAiにて発現阻害し骨芽細胞へ分化させることを試みた.さらに,MSCsでのS100A4遺伝子の発現阻害による影響を,マイクロアレイを用いて観察した.研究実施計画と成果:ヒトMSCを培養し,S100A4 siRNAを細胞内に導入した.Real time PCRを行い,S100A4遺伝子の発現を定量的に観察した.同様にReal-time PCR microarray analysisでは84の骨形成遺伝子発現を分析した.また,Western blotによりS100A4遺伝子の蛋白レベルの発現を観察した.S100A4siRNA導入3,7,14,21日後,すべての濃度でコントロールと比較して,S100A4遺伝子発現が抑制された.Western blotではS100A4siRNA導入7,14,21日後でS100A4遺伝子蛋白発現が抑制されていた.遺伝子導入3日後では37の遺伝子が,コントロールと比較して2倍以上あるいは,0.5倍以下の発現変化がみられた.導入7,14,21日後ではそれぞれ29,4,10の遺伝子が変化した.本研究では,MSCsのS100A4遺伝子発現抑制により,多数の骨関連遺伝子発現が上昇した.今回用いたアプローチと適切な遺伝子デリバリーシステムを開発することによって,1つの有効なティッシュエンジニアリングの手法として応用可能になるものと考えている.

の study aim: department of undifferentiated mesenchymal stem cells (MSCs) は tissue regeneration で organ transplant tissue や と し て differentiation す る こ と が may で あ り, bone bud cells か ら bone へ differentiation さ せ る こ と も で き る. Traces of S100A4 伝 son は according カ ル シ ウ ム binding protein に genus し て お り, MSCs で の bone bud cells 伝 son 発 を inhibit し bone now Bud differentiation を adjustment し て い る. ま た, RNAi は heritage 伝 child specific な turn after 訳 の サ イ レ ン シ ン グ で あ り, posthumous son 伝 サ イ レ ン シ ン グ と し て powerful な ツ ー ル と な り る. そ こ で I 々 は ヒ ト MSCs に お い て, traces of S100A4 伝 son を RNAi に て 発 now resistance against し bone bud cells へ さ せ る こ と を try み た. さ ら に, MSCs で の S100A4 posthumous son 伝 の 発 now resistance against に よ る affect を, マ イ ク ロ ア レ イ を with い て 観 examine し た. Research be applied results: と ヒ ト MSC を cultivate し, S100A4 siRNA を intracellular に import し た. Real time PCR を い, traces of S100A4 伝 son の 発 presently を quantitative に 観 examine し た. The same にReal-time PCR microarray analysisで で 84 <s:1> bone formation remnants 伝 occurrence を analysis た た また,Western Blot に よ り S100A4 posthumous son 伝 の protein レ ベ ル の 発 now を 観 examine し た. S100A4siRNA import 3,7,14,21 later, す べ て の concentration で コ ン ト ロ ー ル と compare し て, traces of S100A4 伝 son 発 now が inhibit さ れ た. Western After 7,14, and 21 days of blotで <s:1> S100A4siRNA introduction, が inhibition of でS100A4 progeny 伝 protein was observed. Youdaoplaceholder4 た た た た. Heritage 伝 son import 3 later で は 37 の heritage 伝 が, コ ン ト ロ ー ル と compare し て 2 times more than あ る い は, 0.5 times the の 発 now - the が み ら れ た. After importing 7,14,21, で それぞれ それぞれ29,4,10, the cultural heritage 伝 sub-が will change to <s:1> た. In this study, で で, the 伝 offspring of MSCs <s:1> S100A4 showed inhibition of によ で, and the 伝 offspring of most <s:1> bone associations showed が increase of た た. This reuse い た ア プ ロ ー チ と appropriate な heritage 伝 son デ リ バ リ ー シ ス テ ム を open 発 す る こ と に よ っ て, 1 つ の is sharper な テ ィ ッ シ ュ エ ン ジ ニ ア リ ン グ の gimmick と し て 応 may use に な る も の と exam え て い る.

项目成果

Preparation of injectable 3D-formed β-tricalcium phosphate bead/alginate composite for bone tissue engineering

• DOI: 10.4012/dmj.27.827
• 发表时间: 2008-11-01
• 期刊: DENTAL MATERIALS JOURNAL
• 影响因子: 2.5
• 作者: Matsuno, Tomonori;Hashimoto, Yoshiya;Satoh, Tazuko
• 通讯作者: Satoh, Tazuko

S100A4遺伝子発現抑制した未分化間葉系幹細胞による骨再生その4siSTABLEOを用いた骨分化関連蛋白質の挙動

S100A4 基因表达受到抑制的未分化间充质干细胞进行骨再生：使用 4siSTABLEO 观察骨分化相关蛋白的行为

• 发表时间: 2007
• 作者: 平 雅之;佐々木 大輔;木寸 重信;澤田 剛光;杉山 芳樹;荒木 吉馬;Yamada A.;Yasuhara R.;Anada T.;Toda Y;Miyazono A;Matsumura K;舘 慶太;舘 慶太;岡野亜希子;宮園あがさ;早川世志子;井汲 憲治;橋本典也;橋本典也;橋本典也;橋本典也;安達 清太
• 通讯作者: 安達 清太

ヒト未分化間葉系幹細胞でのS100A4 siRNAによる骨分化関連遺伝子への影響

S100A4 siRNA对人未分化间充质干细胞成骨分化相关基因的影响

• 发表时间: 2008
• 作者: 平 雅之;佐々木 大輔;木寸 重信;澤田 剛光;杉山 芳樹;荒木 吉馬;Yamada A.;Yasuhara R.;Anada T.;Toda Y;Miyazono A;Matsumura K;舘 慶太;舘 慶太;岡野亜希子;宮園あがさ;早川世志子;井汲 憲治;橋本典也;橋本典也;橋本典也
• 通讯作者: 橋本典也

Effect of genes related to osteogenic differentiation by S100A4 siRNA in human mesenchymal stem cells.

S100A4 siRNA 对人间充质干细胞成骨分化相关基因的影响。

• 发表时间: 2008
• 期刊: J Oral Tissue Engin 6
• 作者: 平 雅之;佐々木 大輔;木寸 重信;澤田 剛光;杉山 芳樹;荒木 吉馬;Yamada A.;Yasuhara R.;Anada T.;Toda Y;Miyazono A;Matsumura K;舘 慶太;舘 慶太;岡野亜希子;宮園あがさ;早川世志子;井汲 憲治;橋本典也
• 通讯作者: 橋本典也