バイオインテリジェント化幹細胞を用いた歯周組織移植療法の開発

利用生物智能干细胞开发牙周组织移植疗法

基本信息

  • 批准号:
    19659548
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 2.05万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Exploratory Research
  • 财政年份:
    2007
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2007 至 2008
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

(1)歯根膜細胞への外来遺伝子導入条件の検討GFP発現プラスミドベクターをリポフェクション法、エレクトロポレーション法、センダイウイルス法を用いて細胞に遺伝子導入し、各方法における導入効率を比較検討した。ホスト細胞として、マウス歯根膜細胞株MPDL22、ヒト腎由来293細胞、マウス胚性細胞株ECP19を用いた。GFP発現ベクターの導入効率をレーザー蛍光顕微鏡にて観察したところ、293細胞およびECP19細胞には何れの導入方法でもGFP遺伝子を導入することが可能であったが、MPDL22には唯一エレクトロポレーション法のみが有効であった。(2)歯根膜遺伝子導入による細胞のバイオインテリジェント化誘導歯根膜遺伝子として、PLAP-1、Periostin、SFRP4、ID1を選定し、各遺伝子発現ベクターを構築した。上記(1)にて決定した条件でMPDL22に遺伝子導入した。各遺伝子導入細胞を硬組織形成誘導培地にて長期に培養し、石灰化マーカーであるアルカリフォスファターゼ活性および石灰化物形成能を測定した。その結果、PLAP-1、SFRP4導入により歯根膜細胞の硬組織形成分化が抑制を受けた。そのメカニズムは、PLAP-1はBMP-2/4、TGF-β等のTGFスパーファミリー分子の機能阻害、SFRP4はWnt分子の機能阻害である可能性が強く示唆された。一方、Periostin遺伝子導入により、歯根膜細胞の石灰化が促進された。ID1導入では歯根膜細胞の分化には影響を認めなかった。以上の結果からPLAP-1、SFRP4、Periostinは歯根膜細胞のバイオインテリジェント化に利用可能な遺伝子であることが示唆された。
(1) 歯 root membrane cells へ の foreign heritage 伝 import conditions の 検 for GFP 発 now プ ラ ス ミ ド ベ ク タ ー を リ ポ フ ェ ク シ ョ ン method, エ レ ク ト ロ ポ レ ー シ ョ ン method, セ ン ダ イ ウ イ ル を ス method with い て cells に heritage 伝 import し, each method に お け る import beg し を sharper rate comparison 検 た. ホ ス ト cells と し て, マ ウ ス 歯 root membrane cell lines MPDL22, ヒ ト renal origin 293 cells, マ ウ ス embryonic cell lines ECP19 を with い た. GFP 発 now ベ ク タ ー の import working rate を レ ー ザ ー 蛍 light 顕 micromirror に て 観 examine し た と こ ろ, 293 cells お よ び ECP19 cells に は what れ の import method で も GFP heritage 伝 son を import す る こ と が may で あ っ た が, MPDL22 に は only エ レ ク ト ロ ポ レ ー シ ョ ン method の み が have sharper で あ っ た. (2) 歯 root membrane heritage 伝 son import に よ る cells の バ イ オ イ ン テ リ ジ ェ ン ト change induced 歯 root membrane heritage 伝 son と し て, PLAP - 1, Periostin, SFRP4, ID1 を し selected, all survived 伝 発 now ベ ク タ ー を build し た. The above record (1)にて determines the <s:1> condition でMPDL22に remnant 伝 to be imported into た た. The heritage 伝 import cells を hard tissue formation induced the petty に て long-term に し, calcification マ ー カ ー で あ る ア ル カ リ フ ォ ス フ ァ タ ー ゼ active お よ び lime compound formation can measure を し た. Youdaoplaceholder0 そ results, PLAP-1, SFRP4 introduction によ 歯 歯 root membrane cell <s:1> hard tissue formation and differentiation が inhibition を is affected by けた. そ の メ カ ニ ズ ム は は BMP, PLAP - 1-2/4, TGF - beta の TGF ス パ ー フ ァ ミ リ ー molecular の function resistance to harm, SFRP4 は Wnt function of molecular の resistance against で あ る strong possibility が く in stopping さ れ た. One side, Periostin remains 伝 are introduced into によ, 歯 root membrane cells <s:1> callization が promotes された. The introduction of ID1 into で で 歯 歯 root membrane cells and the effect of に に on を recognition めな を った った った. の above results か ら PLAP - 1, SFRP4, Periostin は 歯 root membrane cells の バ イ オ イ ン テ リ ジ ェ ン ト change に may use な heritage 伝 son で あ る こ と が in stopping さ れ た.

项目成果

期刊论文数量(2)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
歯根膜特異的遺伝子PLAP-1の単離と解析
牙周膜特异性基因PLAP-1的分离与分析
  • DOI:
  • 发表时间:
    2007
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Takada;E;Hata;K;Mizuguchi;J;山田 聡
  • 通讯作者:
    山田 聡
歯根膜特異的Periostinアイソフォームは歯根膜細胞の硬組織形成分化を促進する
牙周膜特异性Periostin亚型促进牙周膜细胞硬组织形成分化
  • DOI:
  • 发表时间:
    2008
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    水戸祐子;服部佳功;渡邉誠;林田 浩一;田内拓史
  • 通讯作者:
    田内拓史
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  • 通讯作者:
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知道了