卵巣顆粒膜細胞における増殖と分化の調節蛋白の解明

阐明调节卵巢颗粒细胞增殖和分化的蛋白质

• 批准号: 02454380
• 负责人: 泰井 俊造
• 金额: $ 4.48万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (B)
• 财政年份: 1990
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1990 至 1991
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-02454380/
• 关键词: 卵巣顆粒膜細胞; 増殖と分化; プロゲステロン・リセプタ-; cDNA; モノクロ-ナル抗体; ILー1; エンドセリン

(A)ブタ顆粒膜細胞の増殖分化の調節蛋白のクロ-ニングは各ステップで十分な成果が得られず成功しなかった。そこで卵巣での黄体化(分化)のひきがねの一つとして重要なプロゲステロン(以下P)の作用機構解明の一環的に検討した。人PRのホルモン結合部位にあたるオリゴタクレオチドをprimerにしてPCR法によりブタ子宮内膜よりPRcDNAを得,これをprーobeにして顆粒膜細胞におけるPRmRNAの発現を検討した所,PRmRNAはLHにより用量依存的に誘導され、その頂値は3時間後であった。同様の効果はcAMP,hCG,FSHによってもみられたが,Pやエストロゲンでは認められなかった。すなわちP作用を仲介するPRの発現はLHによることを明らかにした。(B)人及びブタ顆粒膜細胞に対するモノクロ-ナル抗体作製の一環としてaminopeptidaseーN(以下FAN)の人卵巣における発現をモノクロ-ナル抗体により検討した所,ANは卵胞発育の各過程において莢膜細胞にのみ認められ,顆粒膜細胞には認められなかった。この結果はANが卵巣に働らく種々の活性ペプチドの分解を通じて卵巣機能の調節に関与することを示唆するとともに,ANが莢膜細胞の表面マ-カ-となることを示す。(C)ブタ培養顆粒膜細胞に対するcytokine,growth factorの作用として(1)ILー1は卵胞発育の初期から分化に対して抑制的に働いた。すなわち小卵胞由来顆粒膜細胞におけるFSH作用(aromatase活性,P分泌,LHリセプタ-,cAMP産生などの誘導をILー1は抑制し,作用機構は,cAMP合成と合成後の過程両面の抑制であった。(2)強力な血管収縮物質であるエンドセリン(以下ET)はブタ卵胞液中に存在し,顆粒膜細胞におけるLHによる黄体化(P分泌,cAMP産生,形態変化)を阻止した。ETも卵巣機能の有力な調節因子である可能性を示した。

(a) Granulomembrane cell differentiation, protein differentiation, protein, protein and protein. The etiolation (differentiation) of the egg, the etiolation (differentiation), the etiolation (differentiation), the luteinization (differentiation), the etiolation (differentiation), the eti In the combined part of human PR, we used the method of primer and PCR to detect the intimal membrane of human PRmRNA, pr, obe, PRmRNA, PRmRNA, LH, dose-dependent manners, and so on. If you don't know what to do, you won't know what to do with cAMP,hCG,FSH. The function of the agent is to introduce the PR to show that the LH is available. (B) Human and human oocytes were divided into two groups: human and human oocytes. (B) Human and human oocytes were incubated with antibodies (FAN). Human and human oocytes were incubated with AN oocytes. in each process of incubation, the membrane cells of human and oocytes were incubated in different stages. The results showed that several kinds of bioactive compounds in AN eggs could be detected by the egg machine, and that the membrane cells of AN cells could be detected by electron microscopy. (C) Grain membrane cell culture, cytokine,growth factor action, (1) IL differentiation and inhibition in the early stage of oocyte rearing. The origin of the small oocyte is the effect of FSH (aromatase activity, P secretion, LH pathway), cAMP induces the IL inhibitor, the mechanism, the synthesis of cAMP, the inhibition of DNA synthesis. (2) the presence of luteinization (P secretion, cAMP production, morphology) in the egg cytosol (ET) and the presence of luteinization (P secretion, cAMP production, morphology) in the egg cytosol. The ET egg machine is capable of powerful response to factors, and the possibility is significant.

项目成果

M.IWAI: "Luteinizing hormone induces progesterone receptor gene expression in cultured porcine granulosa cells." Endocrinology. 129. 1621-1627 (1991)

M.IWAI：“黄体生成素在培养的猪颗粒细胞中诱导黄体酮受体基因表达。”

堀江 清繁: "Immuno histo chemical Localization of Androgen Receptor in the Human Ovary throughout the Menstrual Cycle in relation to Estrogen and Progesterone Receptor Expression" Am.J.Obstet.Gynecol.

Kiyoshige Horie：“整个月经周期中人类卵巢雄激素受体的免疫组织化学定位与雌激素和孕激素受体表达的关系”Am.J.Obstet.Gynecol。

H.FUJIWARA: "Differential expression of aminopeptidaseーN on human ovarian granulosa cells and theca cells." J.Clin Endocrinol Metab. 74. 91-95 (1992)

H.FUJIWARA：“氨肽酶-N 在人卵巢颗粒细胞和卵泡膜细胞上的差异表达。”J.Clin Endocrinol Metab 74. 91-95 (1992)

T.MORI(ed:S.Mashiach): "Growth factor modulation of gonadotoropin action on porcine granurosa cells.in“Advances in Assisted Reprodutive Technologies"" Plenum press,New York, (1990)

T.MORI（编辑：S.Mashiach）：“生长因子调节促性腺激素对猪颗粒细胞的作用。​​”“辅助生殖技术进展””Plenum press，纽约，（1990）

I.TAKAI: "Three types of polycystic ovary syndorome in relation to androgenic function." Fertil Steril. 56. 856-862 (1991)

I.TAKAI：“与雄激素功能相关的三种多囊卵巢综合征。”