「口腔扁平上皮癌で見いだされた変異型p53癌抑制遺伝子の細胞癌化における役割」

“口腔鳞状细胞癌中发现的突变型 p53 抑癌基因在细胞癌中的作用”

基本信息

批准号：
05454487
负责人：
土田信夫
金额：
$ 4.61万
依托单位：
Tokyo Medical and Dental University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (B)
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

我々はこれまでに口腔扁平上皮癌について、癌関連遺伝子のうちp53癌抑制遺伝子の変異が最も高率でおきており、細胞株については変異がp53蛋白質のコドン126から305に散らばって生じていることを明らかにした。しかし個々の変異が口腔癌の発症にどの様に関わるかについては不明である。本研究においてはまず細胞株が樹立できなかった口腔扁平上皮癌腫瘍組織のp53変異を同定し、in vitro mutagenesis法をもちいて変異型p53遺伝子を作成した。さらに、樹立できた細胞株のp53遺伝子についても変異遺伝子を作成し、CMWあるいはLTRベクターで発現させ、それぞれの生物活性と生化学的機能変化を解析し、以下の結果をえた。(1)LTR発現型変異p53遺伝子を用いて活性化rasとの協同作用によるREFのトランスフォーム能およびHSC70との結合能をしらべたところ、両者の間に正の相関が認められ特に保存域Vの変異では両者ともに低下していた。(2)HSC70のプロモーターに対して野生型p53癌抑制遺伝子は転写を抑制したが、変異型p53はそれらのトランスフォーム能にほぼ比例して転写を上昇させ、この上昇に関わるエレメントはHSE(heat shock ekement)であった。(3)p53結合配列をもつプローモーターに対しては、既報のように野生型は転写を活性化し、変異型では変化が見られなかったが、保存域Vの変異株のなかには活性化能をもつものもあった。したがって保存域Vの変異には野生型に近い性質を示すものがある。なおこの結果と癌の悪性度との間に関連は見いだせなかった。また細胞株を樹立できた腫瘍とできなかった腫瘍との間で、p53変異の頻度、生物活性、生化学的機能変化に有意な差は見いだせなかった。従ってp53変異は細胞樹立化に重要ではないと考えられた。

我们以前已经揭示了与癌症相关基因的p53肿瘤抑制基因中的突变在口服鳞状细胞癌中最高，并且突变发生在散布在p53蛋白126至305的细胞系中。但是，尚不清楚如何参与口腔癌的发展。在这项研究中，我们首先确定了无法确定无法确定的口服鳞状细胞癌组织中的p53突变，并使用了体外诱变方法来创建突变体p53基因。此外，还为已建立的细胞系的p53基因创建了突变基因，并使用CMW或LTR载体表达，并分析了生物学活性和生化功能变化，从而导致以下结果。（1）当我们研究使用表达LTR的突变体p53基因与激活的RAS合作作用和HSC70的结合能力的参考能力转化能力时，两者之间发现了正相关，并且在保守区域V的突变中，两者在V.（2）野生型P53肿瘤抑制pros prouts pros的转移中的突变中均特别降低。几乎与它们的可转换性成比例，并且该高程所涉及的元素是HSE（热休克ekement）。（3）对于具有p53结合序列的启动子，如前所述，野生型会激活转录，并且在突变形式中未观察到变化，但是保守区域V中的某些突变体具有激活它们的能力。因此，保守区域中的某些突变表现出与野生型相似的特性。此外，在这些结果与癌症的恶性肿瘤之间没有发现关联。此外，在能够建立细胞系和无法建立细胞系的肿瘤之间的p53突变的频率，生物学活性或生化功能变化中没有发现显着差异。因此，p53突变对细胞的建立并不重要。