non-T ALLにおける免疫グロブリン入鎖高頻度発現の遺伝子的解明

非 T ALL 中免疫球蛋白链频繁表达的遗传学阐明

• 批准号: 05670172
• 负责人: 森 尚義
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05670172/
• 关键词: non-T ALL; λ5; VpreB; λ鎖様遺伝子

我々は小児および成人におけるT細胞性以外の急性リンパ球性白血病(non-T ALL)の48例について免疫電顕を用いて免疫グロブリンの発現を検討し、報告した。免疫グロブリン軽鎖については18例中17例がλ軽鎖を発現していた。non-T ALLはpre-B細胞前後の分化段階に相当することが裏付けられており、この段階の正常Bリンパ球ではμ鎖単独、若しくは発現はないと考えられる。このため我々の免疫電顕での結果はこれまでのリンパ球初期分化の表面形質とは反する所見であった。近年、坂口、工藤等はマウスのpre-B細胞にλ鎖様遺伝子が発現していることを証明し、λ5、VpreBと命名した。その後の検索から、これら遺伝子はBリンパ球の分化成熟強い影響を及ぼし、μ鎖の発現や骨髄間質細胞との信号伝達に関係することが見いだされた。我々は、18例中17例に検出されたλ鎖陽性物質がこのλ鎖様遺伝子蛋白であるか否かを同定するため、培養細胞株について検索を行った。用いた細胞株はNALM6,NALM16,KM3,Rehである。このうちNALM6は免疫電顕でμ-λ陽性、他はいずれもλ鎖のみ陽性であった。Southern blot hybridization法による免疫グロブリン遺伝子は全細胞株で重鎖遺伝子再構成、NALM6にのみκ鎖遺伝子再構成が認められた。λ鎖遺伝子は全例で胚芽型であった。したがって、培養細胞株はpreB細胞に位置することが遺伝子的にも証明され、機能的なλ鎖は産生はされないことが判明した。また、λ鎖様遺伝子に特異的な4つのオリゴヌクレオチドを作成し、これらのプローブで培養細胞から抽出したRNAについて逆転写酵素を用いPCRを施行した。NALM16,Rehではこのλ鎖様遺伝子に特異的な増幅が認められた。以上の結果から免疫電顕で証明したλ鎖陽性物質がλ鎖様遺伝子産物であることが強く示唆された。今後は、PCR増幅産物をプローブとしたNorthern blot hybridization法での検証を行い、発表する予定である。

I 々 は small where お よ び adult に お け る T cell sex outside の acute リ ン パ leukaemia of sex of the ball (non - T ALL) の 48 cases に つ い て immune electric 顕 を with い て immune グ ロ ブ リ ン の 発 を now beg し, report し 検 た. Immune グ ロ ブ リ ン 軽 lock に つ い て は 18 cases, 17 cases が lambda 軽 lock を 発 now し て い た. Non - T ALL は の before and after the pre - B cell differentiation Duan Jie に quite す る こ と が in pay け ら れ て お り, こ の Duan Jie の normal B リ ン パ ball で は mu lock 単 alone, if し く は 発 now は な い と exam え ら れ る. こ の た め I 々 の immune electric 顕 で の results は こ れ ま で の リ ン パ ball early differentiation の surface character と は anti す る seen で あ っ た. In recent years, sakaguchi, kudo は マ ウ ス の pre - B cells に lambda lock others heritage 伝 son が 発 now し て い る こ と を prove し, lambda. 5, VpreB と named し た. After そ の の 検 cable か ら, こ れ ら heritage 伝 son は B リ ン パ ball の matured strong い influence を and ぼ し, mu lock の と 発 now や bone marrow stroma cells 伝 の signal of に masato is す る こ と が see い だ さ れ た. I 々 は, 18 cases, 17 cases に 検 out さ れ た lambda lock positive material が こ の lambda lock others heritage 伝 son protein で あ る か no か を with fixed す る た め, culture cell lines に つ い て 検 cable line を っ た. Using the た cell lines である NALM6,NALM16,KM3,Rehである. The <s:1> うちNALM6 is positive for <s:1> immunoelectrolysis 顕でμ-λ, and he is positive for <s:1> ずれ ずれ ずれ <s:1> λ lock <s:1> み であった. Southern blot hybridization method に よ る immune グ ロ ブ リ ン posthumous son 伝 は all cell lines で traces of heavy lock 伝 reconstitution, NALM6 に の み kappa lock predominate heritage 伝 son to constitute が recognize め ら れ た. λ lock seed 伝 offspring 伝 full example で germ type であった. し た が っ て, culture cell lines は preB cells に position す る こ と が but 伝 son に も prove さ れ, functional な lambda lock は produce は さ れ な い こ と が.at し た. ま た, lambda lock others but 伝 に specific な 4 つ の オ リ ゴ ヌ ク レ オ チ ド を し, consummate こ れ ら の プ ロ ー ブ で culture cell か ら spare し た RNA に つ い て inverse planning write enzyme を shall い PCR を し た. NALM16,Rehで で <e:1> <s:1> <s:1> λ locks the に specific な increase が recognition められた. の above results か ら immune electric 顕 で prove し た lambda locked positive material が lambda others heritage 伝 zi chan content で あ る こ と が く and shown strong sucking さ れ た. In the future, をプロ, PCR amplitume-increased products をプロ, ブと, <s:1>, た, Northern blot hybridization で and 検 will be verified を and <s:1>, and the form する will be determined である.