ピューロマイシンアミノヌクレオシドと活性酸素異常産生:受容体異常を中心とした研究

嘌呤霉素氨基核苷与活性氧的异常产生：关注受体异常的研究

• 批准号: 05670942
• 负责人: 青柳 一正
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: University of Tsukuba
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05670942/
• 关键词: puromycin aminonucleoside; methylguanidine; protein kinase c; reactive oxygen; dichrorofluorescein; nephrosis; adenosine receptor; phorbal myristate

1.PAによる活性酸素の産生増加機構について.ピューロマイシンのアミノヌクレオシド部分(PA)は短期にはラットや人間にリポイドネフローゼ類似の病変を,長期には巣状糸球体硬化症(FGS)様の病変をつくりだす.私共はPAが活性酸素の産生を増加させることを世界で初めて見い出した.これは私どもが発見したクレアチニンからのメチルグアニジン(MG)の産生が活性酸素によることを利用して単離肝細胞を用いて成した.この系を利用して蛋白尿減少効果を有するadenosine potensiatorが活性酸素の産生を減少させることや,PAによる活性酸素がアラキドン酸カスケード(AC)の活性化により産生されることを提唱してきた.そこでPAが活性酸素の産生を促進する機序を検討した.既に,カルモジュリン拮抗薬W-7が活性酸素の産生を抑制することを報告した.そこでACを活生化し,Caにより活性化されるProtein Kinase C(PKC)の関与について検討した.PKCの阻害作用の強いH-7は10μMでPAによる活性酸素の産生増加を完全に抑制した.しかし,cAMP-dependent protein kinase阻害作用はH-7程度であるがPKCの咀害作用が弱いHA1004はPAによる活性酸素の産生を阻害せず,PA非添加時の活性酸素産生を10μMで24%増加させた(PAでは1.4倍).これらの結果は,従来私達の主張してきたアラキドン酸カスケイドの活性化がPKCを介していることを示唆した.2.単離糸球体の活性酸素の画像化による解析糸球体の活性酸素の検出をhydrogen peroxideあるはlipid peroxideと反応すると蛍光を出すdichrolofluoresceinをdiacetateとしてラットにin vivoで投与したのち糸球体を単離し,試験管内でPAと反応させると蛍光は15分で局所的に,45分後には糸球体全体に広がった.しかし,phorbal myristate acetateとはちがった活性酸素の画像がられた.今後,この新たに開発した実験系で単離肝細胞で得られた種々の知見を検討する.

1. PA に よ る acid active element の produce rights and institutions に つ い て. ピ ュ ー ロ マ イ シ ン の ア ミ ノ ヌ ク レ オ シ ド part (PA) は short-term に は ラ ッ ト や human に リ ポ イ ド ネ フ ロ ー ゼ similar の disease - を, long-term に は 巣 shape si sphere sclerosis (FGS) others の disease - を つ く り だ す. Private は PA が active acid, total の produce を raised plus さ せ る こ と を め the early で て see い out し た. こ れ は private ど も が 発 see し た ク レ ア チ ニ ン か ら の メ チ ル グ ア ニ ジ ン の produce が active acid (MG) element に よ る こ と を using し て 単 を from liver cells with い て into し た. こ の is を using し て proteinuria reduce working fruit を have す る Aden Osine potensiator が acid active element の を decrease さ せ る こ と や, PA に よ る acid active element が ア ラ キ ド ン acid カ ス ケ ー ド (AC) の activeness に よ り produce さ れ る こ と を mention sing し て き た. そ こ で PA が active element acid の produce を promote す る machine sequence を beg し 検 た. Both に, カ ル モ ジ ュ リ ン antagonism 薬 W - 7 が active acid resistance element の を an adverse す る こ と を report し た. そ こ で AC を biochemical し, Ca に よ り activeness さ れ る Protein Kinase C (PKC) の masato and に つ い て beg し 検 た. PKC の strong resistance against role の い H - 7 は 10 microns で PA に よ る acid active element の raised を completely に requirement by an adverse し た. し か し, cAMP - dependent protein Kinase inhibitor against role は H - 7 degree で あ る が PKC の tip damage effect が weak い HA1004 は PA に よ る acid active element の produce を resistance against せ ず, PA not add の acid active element produces を 10 microns で 24% raised plus さ せ た (PA で は 1.4 times). こ れ ら は の results, da の 従 to private claims し て き た ア ラ キ ド カ ン acid Youdaoplaceholder0 ド ド スケ activated-が PKCを <s:1> て る る とを とを indicates た.2. 単 to si sphere の acid active element の portrait turns に よ る parsing si sphere の acid active element の 検 out を hydrogen peroxide あ る は lipid peroxide と anti 応 す る と 蛍 を out light す dichrolofluorescein を diacetate と し て ラ ッ ト に in Cast and vivo で し た の ち si sphere を 単 し, test tube で PA と anti 応 さ せ る と 蛍 は 15 points of light で bureau に, 45 minutes に は si sphere all に hiroo が っ た. し か し, phorbal myristate acetate と は ち が っ た acid active element の portrait が ら れ た. In the future, <s:1> たに new たに will develop た experimental results to で単 isolated liver cells で obtain られた 々 <s:1> evidence を検 to explore する.

项目成果

青柳一正: "活性酸素の単離肝細胞におけるguanidinosuccinic acid産生に対する効果" 腎不全. 5. 113-115 (1993)

Kazumasa Aoyagi：“活性氧对离体肝细胞中胍基琥珀酸产生的影响”肾衰竭。 5. 113-115 (1993)

Kazumasa Aoyagi: "Role for Reactive Oxygen in Guanidinosuccinic Acid Synthesis and Identification of Its Precursor." J.American Socity of Nephrology. 4:3. 763 (1993)

Kazumasa Aoyagi：“活性氧在胍基琥珀酸合成及其前体鉴定中的作用。”

青柳一正: "腎障害,腎不全における活性酸素毒性" nanoGIGA. 2. 2077-2083 (1993)

Kazumasa Aoyagi：“肾损伤和肾衰竭中的活性氧毒性”nanoGIGA 2. 2077-2083 (1993)。

Kazumasa Aoyagi: "Imaging Analysis of Reactive Oxygen of Isolated Rat Glomeruli Stimulated by Puromycin Aminonucleoside in vitro." J.Amer.Socity of Nephrol.4:3. 450 (1993)

Kazumasa Aoyagi：“体外嘌呤霉素氨基核苷刺激离体大鼠肾小球活性氧的成像分析”。

Mitsuhiro Gotoh: "Biosynthesis of Guanidine in Isolated Rat Hepatocytes,Perfused Rat Liver and Intact Animal." Nephron. (in press).

Mitsuhiro Gotoh：“离体大鼠肝细胞、灌注大鼠肝脏和完整动物中胍的生物合成。”