活性酸素による糸球体障害の多様性:活性酸素の画像化による解析

活性氧引起的肾小球损伤的多样性：活性氧成像分析

• 批准号: 06671126
• 负责人: 青柳 一正
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: University of Tsukuba
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06671126/
• 关键词: Nephrotic Syndrome; free radical; phorbol myristate; glomerulus; Puromycin Aminonucleoside; heparin; protein kinase C; methylguanidine

活性酸素が変性性疾患や慢性炎症性疾患において発症,悪化原因と成っている. 申請者は尿毒症起因物質メチルグアニジン(MG)が,クレアチニンと活性酸素(ハイドロキシルラジカルに特異的)が反応し産生されることを発見し,これを用いてネフローゼ症候群を起こすピューロマイシンアミノヌクレオシド(PA)が実質細胞の活性酸素の増加を起こすことを世界で最初に報告した.今回 Dichlorofluoscene Diacetate(DCFH-DA)をもちいて活性酸素を光に変換し,顕微鏡下で単離組織細胞や糸球体の活性酸素を超高感度テレビカメラで光学的に測定する方法を検討した.DCFH-DAは細胞内に入り,分解してDCFHとなり,過酸化水素や過酸化脂質と反応すると蛍光を発する.申請者は既にこの方法でPAを投与したラットから単離した糸球体が全体に強い光を出すことを報告したが,今回 1.In vitroでの糸球体の活性酸素の増加過程を検討した.正常ラットにDCFH-DAを投与したのち,単離した糸球体にPA添加したところ15分後に単離糸球体あたり2から3個の強い蛍光を発する点が出現し,45分後には糸球体全体に広がっていくことが観察された.2.C-kinaseを活性化し,蛋白尿を生じる phorbal myristate acetate (PMA)を単離糸球体に添加するとPAに比して蛍光は小さな点として出現し,それ以上は広がらなかった.従来,PAによる蛋白尿とPMAによる蛋白尿の出現機構は活性酸素によるものとして一括して考えられていたが,両者の活性酸素の産生部位(細胞)が異なっていることが示唆された.3.ヘパリンは蛋白尿を減少させる.ヘパリンの活性酸素への作用を検討するとPAで増加するMG産生を3.3u/mlより有意に抑制した.一方の腎臓に生理食塩水を,片方にヘパリンを注入したのち単離した糸球体をPAで刺激すると,ヘパリン注入群で光は減弱した.

Active acid changes sexual diseases and chronic inflammatory diseases, and the causes and causes of changes. The applicant reported that the uremic causative substance MG (MG) was found to be responsible for the production of active acid (PA) in plasma cells. Dchlorofluorocene Diacetate(DCFH-DA) is a sensitive, ultrasensitive, and optically sensitive method for the determination of active acids in isolated tissue cells and spheres under microscopy.DCFH-DA is a sensitive, ultrasensitive, and optically sensitive method for the determination of intracellular, intracellular, and cellular decomposition of hyperacidified water and hyperacidified lipids. The applicant shall report on the method of PA injection and separation, and on the process of active acid addition in the vitro sphere. DCFH-DA was injected into the sphere 15 minutes after PA addition, 2 minutes after PA addition, 3 minutes after PA addition, 4 minutes after PA addition, 4 minutes It's a good idea. In the future, the mechanism of proteinuria in PA and PMA is different from that in the active acid production site (cell). The effect of PA on the production of MG increased by 3.3u/ml and was intentionally suppressed. A kidney is a physiological food, a slice is injected into the body, and the body is stimulated.

项目成果

青柳一正: "活性酸素による腎障害--メチルグアニジンを中心として" 腎と透析,. 臨時増刊. 127-134 (1994)

Kazumasa Aoyagi：“活性氧引起的肾脏损伤——聚焦甲基胍”《肾脏与透析》127-134（1994）。

Katsumi Takemura,: "Methylguanidine synthesis in rat liver peroxisomes." Guanidino Compounds.(John Libbey & Compony). (in press).

Katsumi Takemura，：“大鼠肝脏过氧化物酶体中的甲基胍合成。”

Katsumi Takemura: "Biosynthesis of guanidine in isolated rat hepatocytes, perfused rat liver and intact animals" Nephron. 67. 334-339 (1994)

Katsumi Takemura：“离体大鼠肝细胞、灌注大鼠肝脏和完整动物中胍的生物合成”肾单位。

青柳一正: "腎とフリーラジカル 第2版(東京医学社) 153-155" Uremic toxinであるグアニジノコハク酸(GSA)は肝臓の活性酸素のマーカーとなるか, 284 (1994)

Kazumasa Aoyagi：“Kidney and Free Radicals 2nd Edition (Tokyo Igakusha) 153-155”Does guanidinosuccinic Acid (GSA)（一种尿毒症毒素）可作为肝脏中活性氧的标记物，284 (1994)

青柳一正: "微小循環-腎 高脂血症による障害" 現代医療. 25(6). 36-40 (1993)

Kazumasa Aoyagi：“微循环 - 肾性高脂血症引起的疾病”现代医学 25(6) (1993)。