細胞周期から見たリンパ球幼若化反応に関する研究

从细胞周期角度研究淋巴细胞胚细胞发生

基本信息

批准号：
05671095
负责人：
山田恭司
金额：
$ 1.41万
依托单位：
St. Marianna University School of Medicine
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至 1995
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05671095/
关键词：
PCNA CD25 CD71 PHAリンパ球幼若化検査リンパ球幼若化反応

项目摘要

PCNAを指標としてPHA幼若化反応の免疫学的パラメーターとしての有用性を検討する為に健常成人検体でフローサイトメトリーを用い、方法論の確立と従来、活性リンパ球の指標とされるCD25(I12receptor)、CD71(transferrin receptor)との比較を行った後、担癌患者において免疫能の指標としての意義を検討した。静脈血をPBSで2倍希釈し、Ficoll-Hyperqe法により単核球分画を採取、PHAを加え0、24、48、72時間後に直接法でPCNA、CD25、CD71を単染色し、フローサイトメーターで測定した。Negative controlとしてはFITC標識isotype抗体とPHA無添加検体を用いてcut off値を設定し、測定した。予備実験で健常成人においてPCNA、CD25、CD71は有意の相関を示した。StageIV進行消化器癌患者5名(胃癌2名、大腸癌3名)で検討した所、担癌患者では72時間値でPCNA 42.9±16.7%、CD25 40.8±22%、CD71 35.5±16.6%であり、健常成人に比べ、陽性率の低下が観察され、PCNAは免疫能のよい指標となり得る事が示唆された。フローサイトメトリーを用いたPCNAによるPHA幼若反応は核種を使わず、簡便で明瞭に客観的に固定細胞においても使用できる免疫学的パラメターであると思われた。平成7年度はさらに担癌患者24例で検討した。24例の平均はCD25は39.9±29.9%、CD71は35.4±14.9%であり現在、PCNAと癌腫の臨床病理学的因子との相関を算定中である。

将PCNA用作指数，在健康的成年样品中使用流式细胞术来研究PHA少年反应作为免疫学参数的有用性，在建立方法论并比较CD25（I12受体）和CD71（转移蛋白受体）之后，以前认为是现有的活性淋巴细胞的指示剂，是对免疫的显着性活性活性的。用PBS将静脉血液稀释两次，并通过Ficoll-Hyperqe方法收集单核细胞级分，并在加入PHA后，PCNA，CD25和CD71直接通过直接方法染色，并使用流式细胞仪进行测量。作为阴性对照，使用FITC标记的同型抗体和无PHA的样品设置截止值，并进行了测量。初步实验显示健康成年人PCNA，CD25和CD71之间的显着相关性。当我们检查了五名阶段性晚期消化癌患者（2例胃癌和3个结肠癌）时，72小时的水平为42.9±16.7％，CD2540.8±22％和CD71435.5±16.6％，与健康成人相比，降低了pcna的降低，这表明PCNA降低了，这表明PCNA可能是一个很好的指标。 PCNA使用流式细胞术通过PCNA进行的PHA少年反应被认为是一种免疫参数，可以在不使用核素的情况下在固定细胞中使用，并且清晰，客观地很方便。 1995年，我们进一步检查了24名癌症患者。目前正在计算PCNA与PCNA与癌症的临床病理因子之间的相关性，目前正在计算24例CD25的平均值为39.9±29.9％，目前正在PCNA与临床病理学因子之间的相关性。