細胞周期から見たリンパ球幼若化反応に関する研究

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PCNAを指標としてPHA幼若化反応の免疫学的パラメーターとしての有用性を検討する為に健常成人検体でフローサイトメトリーを用い、方法論の確立と従来、活性リンパ球の指標とされるCD25(I12receptor)、CD71(transferrin receptor)との比較を行った後、担癌患者において免疫能の指標としての意義を検討した。静脈血をPBSで2倍希釈し、Ficoll-Hyperqe法により単核球分画を採取、PHAを加え0、24、48、72時間後に直接法でPCNA、CD25、CD71を単染色し、フローサイトメーターで測定した。Negative controlとしてはFITC標識isotype抗体とPHA無添加検体を用いてcut off値を設定し、測定した。予備実験で健常成人においてPCNA、CD25、CD71は有意の相関を示した。StageIV進行消化器癌患者5名(胃癌2名、大腸癌3名)で検討した所、担癌患者では72時間値でPCNA 42.9±16.7%、CD25 40.8±22%、CD71 35.5±16.6%であり、健常成人に比べ、陽性率の低下が観察され、PCNAは免疫能のよい指標となり得る事が示唆された。フローサイトメトリーを用いたPCNAによるPHA幼若反応は核種を使わず、簡便で明瞭に客観的に固定細胞においても使用できる免疫学的パラメターであると思われた。平成7年度はさらに担癌患者24例で検討した。24例の平均はCD25は39.9±29.9%、CD71は35.4±14.9%であり現在、PCNAと癌腫の臨床病理学的因子との相関を算定中である。