オーガナイザー活性のあるホメオボックス遺伝子の細胞分化における役割

具有组织者活性的同源盒基因在细胞分化中的作用

基本信息

  • 批准号:
    05680617
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.34万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
  • 财政年份:
    1993
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    1993 至 无数据
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

マウスgoosecoid染色体遺伝子はカリフォルニア大学のMartin Blum,Eddy M.De Robertis両博士から供与を受けた。この遺伝子はまだcDNAが単離されておらず、またその発現にも成功していない。このゲノム遺伝子の発現を困難にしているのは開始コドン上流域であると考え、295塩基対の上流域のうち250塩基対を削除した。削除した部分にはTATAboxがあり極めてGC塩基対が多い。マウスgoosecoid染色体遺伝子の上流域のTATAboxを含む部分を削除し、約50塩基対の上流域を含む約2100塩基対のゲノム遺伝子をハイグロマイシン耐性遺伝子を持つベクターのラウスサルコーマウイルスプロモーター下流に挿入し哺乳細胞での発現を試みている。このベクターでは蛋白質はヒスチジンが6個N端に結合して発現されるのでニッケルカラムを用いて精製できる。この遺伝子をCOS細胞へ燐酸カルシウム法により移入し、現在、ハイグロマイシン耐性株を選択した所である。また、TATAboxを含む上流域を削除したマウスgoosecoid染色体遺伝子をネオマイシン(G418)耐性遺伝子を持つベクターのサイトメガロウイルスプロモーター下流に挿入し、赤芽球系細胞にエレクトロポーレーション法により移入してネオマイシン耐性株を選択した。この細胞株はアクチビンへの反応性が低下していた。この原因としては、赤血球分化に必要な転写調節因子を抑えたり、あるいは細胞周期を加速する役割を果たしていることが考えられる。例えば、レチノブラストーマ蛋白質が赤血球分化に必要な転写調節因子と結合するのを妨げたり、増殖に必要な燐酸化型レチノブラストーマ蛋白質を相対的に増加させている事などが考えられる。
Youdaoplaceholder0 ウスgoosecoid chromosomal heritage 伝 offspring けた カリフォ ニア ニア ニア university <s:1> Martin Blum,Eddy M. de Robertis, ryoo を ら donor and を recipient けた. The <s:1> cultural heritage 伝 sub-product まだ まだcDNAが単 from されておらず and またそ <s:1> has successfully developed に 伝 and <s:1> な な. こ の ゲ ノ ム posthumous son 伝 の 発 を now difficult に し て い る の は began コ ド ン on basin で あ る と え test, 295 in the upper reaches of the salt base の seaborne の う ち 250 salt base を seaborne pruned し た. Remove the に た part of the TATAboxがあ polar めてGC base is が more が. マ ウ ス goosecoid traces of chromosome in the upper reaches of the son 伝 の の TATAbox を part containing む を pruned し, about 50 salt base in the upper reaches of the の を seaborne contains about 2100 salt base of む の seaborne ゲ ノ ム posthumous son 伝 を ハ イ グ ロ マ イ シ ン patience heritage 伝 son を hold つ ベ ク タ ー の ラ ウ ス サ ル コ ー マ ウ イ ル ス プ ロ モ ー タ ー obscene に scions into し mammalian cells で の Develop を try みて を る る. こ の ベ ク タ ー で は protein は ヒ ス チ ジ ン が six n-terminal に combining し て 発 now さ れ る の で ニ ッ ケ ル カ ラ ム を with い て refined で き る. こ の posthumous son 伝 を COS cell へ 燐 acid カ ル シ ウ ム method に よ り move し, now, ハ イ グ ロ マ イ シ ン patience strains を sentaku し た で by あ る. ま た, TATAbox を containing in the upper reaches of the む を pruned し た マ ウ ス goosecoid chromosome heritage 伝 son を ネ オ マ イ シ ン (G418) patience heritage 伝 son を hold つ ベ ク タ ー の サ イ ト メ ガ ロ ウ イ ル ス プ ロ モ ー タ ー obscene に scions into し, red gemmule cells に エ レ ク ト ロ ポ ー レ ー シ ョ ン method に よ り move し て ネ オ マ イ シ For the <s:1> tolerant strain を, choose 択 た た た. The <s:1> <s:1> cell line ア ア チビ へ へ へ へ <s:1> anti応 が is hypopitulotropic が and <s:1> て た た た. こ の reason と し て は, red blood cell differentiation に な necessary planning write adjustment factor を え suppression た り, あ る い は cell cycle を accelerate す る "を cut fruit た し て い る こ と が exam え ら れ る. Example え ば, レ チ ノ ブ ラ ス ト ー マ protein が red blood cell differentiation に な necessary planning write adjustment factor と combining す る の を hinder げ た り, raised colonization に necessary な 燐 acidification model レ チ ノ ブ ラ ス ト ー マ protein を phase of seaborne に raised plus さ せ て い る matter な ど が exam え ら れ る.

项目成果

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