TGF-βレセプター抗体による伊東細胞活性化の抑制とその臨床応用

TGF-β受体抗体抑制Ito细胞活化及其临床应用

• 批准号: 07670632
• 负责人: 上木 昇
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Hyogo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07670632/
• 关键词: TGF-βレセプター; 伊東細胞; TGF-β

1. TGF-βII型レセプターのN末端150個に相当する塩基配列を持った遺伝子を用いて作成したリコンビナント抗原でウサギとマウスでそれぞれポリクロナール抗体とモノクロナール抗体を作成した.Western blotting法にて,いずれの抗体もリコンビナント抗原および精製TGF-βII型レセプフタ-蛋白質(Santa Cruz製)を認識したが,我々の確認し得たTGF-βレセプター高発現細胞株を用いた免疫組織染色法による検討では抗TGF-βII型レセプターポリクローナル抗体が有用であった.しかしながら,作成した種々の抗体を用いてTGF-βの生理活性が阻止できるか否かについて検討したところ,いずれの抗体ともTGF-β中和活性は認められなかった.2.慢性肝炎および肝硬変患者での組織内TGF-βレセプター発現について検討した結果,肝実質細胞では弱い発現が見られたのに対して,活性化伊東細胞および繊維芽細胞においてより強い発現がみられた.ヒト伊東細胞を用いてその活性化阻害効果についても検討したが,本抗体による阻害効果は認められなかった.3.ヒト由来の伊東細胞の培養上清中の各種サイトカインを測定した結果,TGF-βとIL-6およびCSF-1の産生がみられ,TGF-βレセプターもI型およびII型とも発現が確認された.さらに,伊東細胞にTGF-βを添加すると,ラミニンやヒアルロン酸およびIV型コラーゲンの産生は増加し,形態変換の指標であるα型アクチンの発現も亢進していた.しかし,TGF-βと同時にTGF-βレセプター抗体を添加しても上述した伊東細胞の活性化の抑制は認められなかった.

1. TGF-βII type レセプターのN-terminal 150 にequivalent する塩婩array をholding った伝子を用いてmade したリコンビしたblotting method, いずれのantibody もリコンビナントantigen および purified TGF-βII type レセプフタ-protein (Santa Cruz (manufactured by Cruz), I have confirmed that I have obtained the TGF-β レセプター高発existing cell line and used the いたimmunohistostaining method and では anti-TGF-β type II レセプターポリクローナルantibodies are usefulであった.しかしながら,madeした species Antibodies are used to prevent the physiological activity of TGF-β and prevent the physiological activity of TGF-β.ところ,いずれのantibody ともTGF-β neutralizing activity はcognition められなかった.2. The presence of TGF-β in the tissues of patients with chronic hepatitis and cirrhosis has been confirmed. As a result, the hepatic cytoplasmic cells were weakened and the symptoms appeared, and they were activated. East Cells The blocking effect of this antibody is achieved by activating the blocking effect of いてその, and the blocking effect of this antibody isはcognizeめられなかった.3. Various サイト origins from the culture supernatant of Ito cells The result of カインを measurement, TGF-β and IL-6 and CSF-1 productionみられ,TGF-βレセプターもI type およびII type とも発appears and confirms された.さらに, Ito cell TGF-βを added すると, ラミニンやヒアルロン acid およびIV type コラーゲンのgenesis はincreaseし, form change のindex であるα type アクチンの発成していた.しかし,TGF-βと simultaneously にTGF-βレセプターAntibodies can be added to suppress the activation of Ito cells.

项目成果

土田哲雄: "Transforming growth factor" Surgery Frontier. 2. 449-455 (1995)

Tetsuo Tsuchida：“转化生长因子”《外科前沿》2. 449-455 (1995)。

Noboru Ueki: "control of MMP-2 expression by TGF-β1 is independent of growth inhibitory effects in hyman hepatoma cells in culture." J. Cell. Biochem.(in press). (1996)

Noboru Ueki：“TGF-β1 对 MMP-2 表达的控制与培养的海曼肝癌细胞的生长抑制作用无关。”《J. Cell》（出版中）。