权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

膜性腎炎の抗原解析

膜性肾炎抗原分析

基本信息

批准号：
07671263
负责人：
松井克之
金额：
$ 1.09万
依托单位：
Teikyo University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至 1996
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07671263/
关键词：
膜性腎症蛋白尿実験腎炎ラット EHS腫瘍

项目摘要

EHS腫瘍をMeshを用いて細胞成分に分離しし200mMNa_2CO_3緩衝液に浮遊しホモジェナイザーを用いて細胞を懸濁した。懸濁液を10,000rpmで遠心後上清をさら33,000rpmで超遠心し沈渣を得た。この沈渣より細胞外基質を除去する目的で0.5MNaCl注に浮遊させ同様に超遠心し再び沈渣を得た(EHC-UCP)、この沈渣は電子顕微鏡的検索によりほぼ細胞膜成分であることを確認した。EHS-UVPを計160mgアジュバントとともにラットに免疫したところ、免役6週より蛋白尿が出現し15週の観察期間中蛋白量は増加し屠殺時には約500mg/dayに達した。形態学的観察では光顕上免役後8週より糸球体基底膜の肥厚を認め15週ではこの変化はさらに顕著となりSpike形成も認められた。蛍光抗体法による検索においては糸球体係蹄壁に沿っ顆粒状にIgGとC3の沈着を認め顆粒の大きさは経時的に増大した。電顕的観察では上皮下にelectron dense depositを認めその大きさは経時的に増大した。これらの形態学変化はヒト膜性腎症に極めて類似していた。さらにEHS-UCP中の腎炎発症責任抗原を検索する目的で本腎症モデルにおいて糸球体に沈着した免疫グロブリン(EHS-IgG)を抽出精製して免疫ブロティング法を行った。EHS-UCPをPVDF膜に転写しEHS-IgGと反応させたところ63Kdに反応を認めた。以上の結果よりEHS腫瘍により惹起されたEHS腎症の責任抗原はEHS腫瘍の細胞膜中に存在する63Kdの蛋白質であることが強く示唆された。また、ヒト膜性腎症において併発することのある、大腸癌、胃癌と本抗原との関連について検索したところこれらの腫瘍組織にも分子量63Kdの本抗原が存在することが免疫ブロティング法により明らかになり、免疫組織化学的検索によりその抗原は腫瘍細胞の細胞膜に存在することが示された。

EHS cell Mesh uses cell composition to separate the liquid from the 200mMNa_2CO_3 cell. 10000rpm fluid, supernatant after heart, supernatant of heart, 33000rpm, heart sediment. The purpose of this study is to remove the extracellular base of sediment. The purpose of 0.5MNaCl is to identify the components of the cell membrane of EHC-UCP and the components of the cell membrane of the microphone. EHS-UVP calculated that the amount of medium protein in 15-year-old albuminuria was measured during the 15-year-old observation period and the amount of 500mg/day was measured during the 15-year-old observation period. The shape of the film was observed and the spherical basement membrane was thickened after 8 days of duty-free treatment. The formation of the spherical basement membrane was affected by the formation of the Spike. The light antibody method is used to determine the size of the ball and the hoof wall of the ball along the surface of the granular IgG C3. The electric power station inspects the high temperature in the upper and lower parts of the electron dense deposit and during the rush hour. The symptoms of membranous disease are similar to those of membranous disease. There are no antigens in EHS-UCP. Objective to extract semen from the spheroid, immune system, immune system (EHS-IgG), immune system, immune system, immune system, EHS-UCP PVDF diaphragm write "EHS-IgG" reverse "63Kd" anti-confirmation. The above results showed that the presence of 63Kd protein in the cell membrane of EHS syndrome was strongly expressed in the membrane of any antigen of EHS syndrome caused by EHS syndrome. The molecular weight of 63Kd antigen was detected by immuno-immunoassay and immuno-histochemical method.