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細胞内寄生菌弱毒株を抗原定示細胞への運搬ベクターとする経口DNAワクチンの開発:健康豚下顎リンパ節から分離されるロドコッカス・エクイ中等度毒力株の応用

使用细胞内寄生细菌减毒株作为抗原特异性细胞的递送载体开发口服 DNA 疫苗：应用从健康猪下颌淋巴结分离的中等毒力的马红球菌菌株

基本信息

批准号：
14656124
负责人：
高井伸二
金额：
$ 1.6万
依托单位：
Kitasato University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

細胞内寄生菌弱毒株を用いたDNAワクチン運搬システムは高い安定性、安い生産コスト、投与技術の簡便さの点から、家畜の次世代ワクチンとして極めて有望である。本研究の目的は、免疫応答の場であるリンパ節に寄生するロドコッカス・エクイ中等度毒力株をDNAワクチンの免疫系(樹状細胞)への効率的な運搬ベクターとして利用可能であるか否かを検討し、経口ワクチンとして家畜の次世代ワクチンの可能性を探ることである。DNAワクチンを考える上でその候補遺伝子抗原についてペプチドワクチンを用いて、以下の検討を行った。R.equi病原性プラスミド上にコードされたVapAのB細胞エピトープを含むペプチド(N15Y),T細胞エピトープを含むペプチド(V20S)及びそのハイブリッドペプチド(NV)の3種の合成ペプチド並びに組み換えVapD(rVapD)蛋白を用いて免疫し、マウスと馬における抗体応答、並びにマウスにおける感染防御能も検討した。その結果、N15Y及びNV免疫マウスでは、ペプチド単独免疫群に比べ不完全又は完全アジュバントを用いた免疫群で抗体価が著しく上昇し、サブクラス別抗体応答ではIgG1とIgMの抗体価の上昇が認められた。しかし、抗体価の上昇に拘わらず何れのペプチドも感染防御能を賦与することは出来なかった。馬における抗体応答としては、NV抗原免疫馬ではIgGbの抗体価が上昇し、続いてIgGaが上昇した。rVapD免疫馬ではIgGaとIgGbが同時期に上昇したが、IgGaの抗体価の上昇が顕著だった。IgMとIgAは観察期間を通しほぼ一定の低値を示していた。

The use of attenuated strains of intracellular parasites is highly stable, safe, easy to produce, and promising for the next generation of livestock. The purpose of this study was to explore the possibility of using the immune response field to detect the rate of DNA transfer from moderately virulent strains to immune lines (dendritic cells) in the next generation of livestock. The following questions are discussed: R.equi Pathogenic VapA B cell profile includes a selection (N15Y),T cell profile includes a selection (V20S) and a selection (NV) of three synthetic VapD(rVapD) proteins used for immune, antibody, and infection defense. The results showed that N15Y and NV immune system had a higher antibody level than IgG1 IgM immune system. The rise of antibodies in the immune system is a major cause of infection. The antibody level of the horse immunized with NV antigen increased, and the antibody level of the horse immunized with NV antigen increased. rVapD immune horse IgGa and IgGb increased at the same time, IgGa and antibody increased at the same time. IgM detection period is low.