X染色体遺伝子多型性を用いた皮膚腫瘍性疾患のクローナリティー判定法の確立

X染色体基因多态性皮肤肿瘤疾病克隆性判定方法的建立

• 批准号: 14657204
• 负责人: 西川 武二
• 金额: $ 1.66万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14657204/
• 关键词: X染色体; 遺伝子多型性; クローナリティー; マイクロダイセクション; HUMARA法; HUMURA法

1.様々な皮膚疾患における皮疹部の細胞集団についてのクローナリティーの検索を進めている。当初は凍結およびパラフィン包埋した組織の両者を用いていたが、遺伝子を解析する上で比較的不利と予想された後者においても、HUMARA法による解析が十分可能であることが判明し、現在は主としてホルマリン固定パラフィン包埋組織標本を用いている。なお、遺伝子解析を行うことに関する十分な同意が得られた患者のみを対象としている。2.HUMARA法とは女性が持つ2本のX染色体上のHUMARA遺伝子における遺伝子多型を解析するものであるが、三塩基のSTR (short tandem repeats)であるために、PCR法によって増幅されたDNAの大きさの差は最小で3bpになると考えられる。したがって、従来のゲル型電気泳動では分離困難であったが、ABI PRISM 310 Genetic Analyzerに付属するGeneScanと呼ばれるキャピラリー電気泳動法を用いることで、3bpのPCR産物を再現性よく分離することが可能となった。3.マイクロダイセクションに関しては、Arcturus社の顕微鏡および関連キットを使用しており、数十個の細胞集団からでもDNA抽出および解析が可能であることがすでに確認できているが、顕微鏡の視野内で目的とする細胞のみを採取したい場合でも、周辺にある細胞まで一緒に採取されてしまうことがあり、正確性にかけてしまい、後の解析に影響を及ぼすことになる。しかし、試行錯誤の結果、細胞採取の正確性はかなり高めることができた。4.パラフィン包埋組織標本からのマイクロダイセクションによる細胞採取、DNA抽出、およびHUMARA法によるDNA解析に至る流れの中で、それぞれの最適条件を決定することに関しては終了した。

1. The skin disease, the skin rash, the skin rash and the skin rash. In the first place, it is very possible to use the HUMARA method to determine the accuracy of the information system, and now it is necessary to use the information system to analyze the disadvantages of the system. In the line of parsing, there is a lot of agreement that the patient has the impression that he is suffering from a bad situation. The 2.HUMARA method "female" is based on the analysis of two copies of the HUMARA gene on the X chromosome, the analysis of the genetic polymorphism, the three-base STR (short tandem repeats) gene, the PCR method, the DNA, the minimum difference, the 3bp, the test. It is possible that ABI PRISM 310 Genetic Analyzer devices can be separated from each other by the use of mobile phone devices and 3bp PCR devices, which may be difficult to do. 3. The use of microphones, dozens of cell sets of microphones, the extraction of DNA, the use of microphones, the use of Every week, please check the information, make sure that the information is correct, and then analyze the shadow and the information. The results of the error and error results, and the cell selection is correct. 4. In this document, the tissue header is embedded, the data is extracted, the DNA is extracted, the HUMARA method is used, the DNA is parsed to the data stream, and the most important condition determines that the data is not valid.