細胞内シグナル応答型遺伝子スイッチの創製と心臓疾患新規遺伝子治療法の開発

创建细胞内信号响应基因开关并开发心脏病的新型基因治疗方法

• 批准号: 14658291
• 负责人: 片山 佳樹
• 金额: $ 2.43万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14658291/
• 关键词: 遺伝子送達; 遺伝子治療; 細胞内情報伝達系; 循環器系疾患; 細胞情報伝達; 薬物送達; ペプチド; 翻訳後修飾

ミオシンホスファターゼのRhoキナーゼによるリン酸化部位のアミノ酸配列を元にRhoキナーゼに対する基質ペプチドを設計、合成した。また、CaMKIIに対する基質ペプチドも同様に設計合成した。また、これらに応答する遺伝子キャリヤーの開発のため、Tatやオリゴアルギニンなどを利用して細胞透過型を有すると期待できる種々のペプチドグラフト高分子型キャリヤーを合成して、その細胞透過能を評価した。しかしながら、何れも期待したほどの高効率な細胞透過能は示さなかった。そこで、カプシド法の適用を検討した。すなわち、センダイウイルス由来のカプシドを用い、この中にキャリヤーと遺伝子の複合体を封入して評価したところ、これが良い細胞用可能を有していることが分かった。また、細胞内に導入されたキャリヤーが、標的キナーゼシグナルによる遺伝子調節能を有していることを見出した。ただし、開発したキャリヤーと遺伝子の複合体は、静電相互作用によってのみナノ粒子を形成しているため、サイズの制御が困難であり、また、サイズ分布の時間依存性が見られた。そこで、PEGユニットを導入し、ナノ粒子のサイズ制御が可能なタイプのキャリヤーを設計、合成した。今後、この複合体のカプシドへの封入効率を検討する必要がある。さらに、循環器系疾患における遺伝子投与部位を的確に検出するため、新しい造影剤を開発した。これを単離血管および生きたラットに適用したところ、内皮が傷害を受けた箇所のみを選択的に検出することが可能であった。

The design and synthesis of the acid sequence of the Rho system CaMKII is designed for use in a variety of applications. In addition, the development and utilization of cell permeability can be evaluated by the evaluation of cell permeability. How to expect high efficiency cells to transmit energy? The application of the law is discussed. The complex of the cell is sealed and evaluated. In addition, the gene regulatory function can be found in the cell. The time dependence of particle formation and particle distribution in electrostatic interaction can be seen. PEGs are designed and synthesized for particle size control. In the future, it is necessary to discuss the sealing efficiency of the complex. In addition, the circulation system diseases, such as transmission and location, are detected and new imaging agents are developed. The blood vessels were damaged, and the blood vessels were damaged.

项目成果

Masaharu Murata et al.: "Novel DNA/polymer conjugate for intelligent antisense reagent with improved nuclease resistance"Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters. 13. 9697-9670 (2003)

Masaharu Murata 等人：“用于智能反义试剂的新型 DNA/聚合物缀合物，具有改进的核酸酶抗性”Bioorganic

Y.KATAYAMA et al.: "Intracellular signal-responsive artificial gene regulation for novel gene delivery"Biomacromolecules. Vol.3・No.5. 905-909 (2002)

Y.KATAYAMA 等人：“用于新型基因传递的细胞内信号响应人工基因调节”Biomacromolecules Vol.3·No.5（2002）。

Tatsuhiro Yamamoto et al.: "First Functionalized MRI Contrast Agent Recognaizing Vascular Lesions"Analytical Sciences. 20・6. 5-7 (2004)

Tatsuhiro Yamamoto 等：“第一个识别血管病变的功能化 MRI 造影剂”分析科学 20・6 (2004)。

片山佳樹: "導入した遺伝子が患部細胞内だけで機能する新しい遺伝子治療法"遺伝子医学. Vol.6・No.1. 120-123 (2002)

Yoshiki Katayama：“一种新的基因治疗方法，其中引入的基因仅在受影响的细胞内发挥作用”Genetic Medicine Vol.6·No.1（2002）。

Masaharu Murata et al.: "Thermo Responsive DNA/Polymer Conjugate for Intelligent Antisense Strategy"Chemistry letters. 23・3. 266-267 (2003)

Masaharu Murata 等：“用于智能反义策略的热响应 DNA/聚合物缀合物”化学快报 23・3 (2003)。