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アフリカツメガエルの性決定遺伝子のクロ-ニング

非洲爪蟾性别决定基因的克隆

基本信息

批准号：
03804051
负责人：
近藤壽彦
金额：
$ 1.15万
依托单位：
Gunma University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1991
资助国家：
日本
起止时间：
1991 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1.既に我々が開発した核酸固相化アンカ-(公開特許公報A平3ー147800、平成4年3月より市販化された)を用い、欠失遺伝子あるいは欠損領域を有する遺伝子を単離するための新規な分離法、固相ハイブリッド分離法を開発した。この方法は、これまでの遺伝子サブトラクション法では問題のあった反復配列を持った遺伝子の混入を避けることができるため、本研究の目的である雌にのみ存在する遺伝子のクロ-ニングのみならず、病因遺伝子の同定・分離などにも幅広く応用可能なことが分かった。2.この固相ハイブリッド分離法を用いて、アフリカツメガエルの雌にのみ存在するDNA断片(MboI切断)4種を同定し、そのうち3種のDNA断片をクロ-ニングした。3.構造解析の結果、いずれのDNA断片もAT含量が高く、ショウジョウバエの性決定遺伝子のスプライシング・アクセプタ-として知られているオクタマ-配列と相同性の高い配列のあることが確認された。また、そのうちの一断片(XWー3)には、CAAT配列やTATAボックスが存在し、ショウジョウバエのホメオボックスのシス調節領域の配列と極めてホモロジ-の高い配列が見出され、性決定遺伝子の調節領域をクロ-ニングした可能性が高いと考えられる。4.現在、固相ジ-ン・ウォ-ク法を新たに開発し、XWー3と隣接する遺伝子構造を探索している。今後、構造遺伝子を含めた全遺伝子構造を明らかにするとともに、本遺伝子が、まさしく性決定遺伝子であるかを証明するために、遺伝子もしくは、その転写産物導入による性転換実験を行ない、更には性染色体の同定などの研究を行なう予定である。

1. Not only do we have access to the nucleic acid solid phase assay (3: 147800, Pingcheng, March 4, 2004). In the field, there are many new regulations for the separation of nucleic acid, the new regulation method and the solid phase separation method. The method, the method, the method and the method. two。 There are DNA fragments (MboI cut-off), DNA fragments (DNA fragments) and so on. 3. The results of the analysis, the DNA fragments, the high AT content, the high temperature, the same height, the same height. One fragment (XW 3), one fragment (TATA), one fragment, one piece, one piece, one piece. 4. At present, the solid phase method is used for new development, and the XW system is used to explore the development of the system. From now on, you will need to know that your sex chromosome is the same as that of your research, and that you will know that you will write something in the future, and that you will be able to write something in the future.