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アフリカツメガエルの性決定遺伝子の構造解析と性決定機構の解析

爪蟾性别决定基因结构分析及性别决定机制分析

基本信息

批准号：
04640591
负责人：
近藤壽彦
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Gunma University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1992
资助国家：
日本
起止时间：
1992 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1.既にクローニングされた雌特異的DNA断片のうち、XW-3を固相プローブとするジーン・ウォーク法を行った。その結果、XW-3a〜3eの5種のクローンが得られたので、現在これらのDNAの構造解析を行なっている。また、構造遺伝子の一部をプローグとする種々の発生段階における遺伝子発現の解析、調節遺伝子領域をプローブとする転写制御因子の解析などを準備している。2.SfiI,BglI,BstXIなどの制限酵素を用いてゲノムDNAを切断すると、左右の末端配列が多様になることに着目し、ゲノムDNA断片を効率良く分類・マッピングする新方法を開発した。この方法は、我々が既に開発した核酸固相化アンカーを利用してゲノムDNA断片を系統的に分離する技術で、今後、シークェンス解析と一体化した自動化装置の開発を行なう予定でいる。性決定遺伝子近接領域、W-染色体、Z-染色体の解析はもとより、将来、ゲノムプロジェクトの強力な武器になるものと期待している。3.アフリカツメガエルにおいて遺伝子組換え活性の高い卵原細胞や卵母細胞に遺伝子導入することによってジーン・ターゲッティング効率を高め、更には、卵母細胞の成熟分裂(第二極体放出)を阻止すること (雌性発生操作)によって導入遺伝子(通常、劣性遺伝子)をホモザイガスとする新しいトランスジェニック技術の開発を行なっている。この方法が完成すれば、遺伝子導入個体において直接トランスジーン機能を判定することが可能となる。今後、性決定遺伝子の全構造とその転写産物を解明するとともに、アフリカツメガエルの性決定機構の詳細な解析や、性決定遺伝子を導入した性転換ガエルの作出を試みたいと考えている。

1. Both the DNA fragments and the XW-3 solid phase fragments of the female were detected. The results of the tests, the results of the five XW-3a~3e tests, and the current analysis of the DNA database. In order to improve the performance of the system, we need to make a real-time analysis and analysis of the control factors in the field of production and management. 2. SfiIgrad BglI BstXI fragments were used to control enzyme restriction enzymes. The restriction enzymes were cut off with DNA chips, the left and right ends were arranged with multiple rings to look at each other, and the DNA fragments were divided into different categories. In this method, we do not only use the separation and isolation technology of the DNA fragment system, but also start the operation of the integrated automation device. Sex determination: proximity field, W-chromosome, Z-chromosome analysis, future, future, power weapons, expectations. 3. The activity of the sub-tissues of the oocytes is higher than that of the oocytes. the rate of oocyte maturation and division (the release of the second body) is higher than that of the oocytes (usually, in general, the oocyte maturation division (second body release). If you have a bad situation, please do not know how to do something new. After the completion of the method, the child will be able to determine whether it is possible to do so directly. From now on, the whole system will be used to understand the information, to determine the mechanism of sex determination, to analyze the behavior, and to make an attempt to make a test.