大麦分級粉中の蛋白質性生理活性物質の検索とその精製

分类大麦粉中蛋白质生理活性物质的寻找及其纯化

• 批准号: 03808010
• 负责人: 土井 裕司
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: Mukogawa Women's University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1991
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1991 至 1992
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-03808010/
• 关键词: 大麦; アミノペプチターゼ; 分級粉; アミノペプチダ-ゼ; プロテア-ゼ

本研究は、大麦の有効利用の可能性に注目し、大麦中に存在する生理活性物質を検索し、その精製を行うことを目的としている。昨年度の研究により、大麦穀粒の外側の分級粉に多くのタンパク質が存在し、水抽出でプロテアーゼ活性がえられることが明らかとなった。そのプロテアーゼは、トリプシンやキモトリプシンタイプというよりはアミノペプチターゼタイプであった。また、各種のクロマトグラフィーにより若干の精製を試みた。そこで、本年度の研究としては、昨年の実績を元に精製をより進めたことである。オーストラリア産WEEAH種二条大麦の90-80%分級粉より酢酸緩衝液にてアミノペプチターゼを抽出し、40-60%飽和硫安分画を得た。次いで、疎水性クロマトグラフィー、ゲルろ過クロマトグラフィー、ヒドロキシルアパタイトクロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィーを用いて少なくとも4種のアミノペプチターゼが存在することを明らかにした。それぞれをA-1-I、A-1-II、A-1-III、A-2とした。A-1-Iについては更にゲルろ過クロマトグラフィーを行い、活性ピークとタンパク質ピークが一致した。それを最終標品(A-1-I-G)とした。粗抽出液に対する比活性は、それぞれ64倍(A-1-I-G)、82倍(A-1-II)、70倍(A-1-III)、154倍(A-2)であった。A-1-I-GのSDSおよびDisc電気泳動では均一のバンドであった。A-1-IおよびA-2のKm値は0.138mM、0.060mMであった。いずれもpH6-8で活性を有していた。

This study は, barley の services using の possibility に attention し, barley there are に す る physiological active substances を 検 し and そ の refined を line う こ と を purpose と し て い る. Yesterday's annual の research に よ り powder, barley grain の lateral の grading に more く の タ ン パ ク が し, water quality spare で プ ロ テ ア ー ゼ active が え ら れ る こ と が Ming ら か と な っ た. そ の プ ロ テ ア ー ゼ は, ト リ プ シ ン や キ モ ト リ プ シ ン タ イ プ と い う よ り は ア ミ ノ ペ プ チ タ ー ゼ タ イ プ で あ っ た. Youdaoplaceholder0, all kinds of <s:1> ロ ロ トグラフィ トグラフィ によ によ によ によ ロ また several batches of refined を test みた. そ こ で, this year's の と し て は, yesterday の be performance を yuan に refined を よ り into め た こ と で あ る. オ ー ス ト ラ リ ア WEEAH kind of two barley production の 90-80% grade powder よ り boggy acid buffer に て ア ミ ノ ペ プ チ タ ー ゼ を spare し, 40-60% saturation sulfur content を た. Time い で, water-based 疎 ク ロ マ ト グ ラ フ ィ ー, ゲ ル ろ too ク ロ マ ト グ ラ フ ィ ー, ヒ ド ロ キ シ ル ア パ タ イ ト ク ロ マ ト グ ラ フ ィ ー, イ オ ン exchange ク ロ マ ト グ ラ フ ィ ー を with い て less な く と も four の ア ミ ノ ペ プ チ タ ー ゼ が exist す る こ と を Ming ら か に し た. Youdaoplaceholder0 A-1-I, A-1-II, A-1-III, A-2と た. A - 1 - I に つ い て は more に ゲ ル ろ too ク ロ マ ト グ ラ フ ィ ー を い, active ピ ー ク と タ ン パ ク qualitative ピ ー ク が consistent し た. Youdaoplaceholder0 final reference material (A-1-I-G)と た た. Crude extract に す seaborne る than active は, そ れ ぞ れ 64 times (A - 1 - I - G), and 82 times 70 times (A - 1-2), (A - 1-3), 154 times (A - 2) で あ っ た. A-1-I-G <s:1> SDSおよびDisc electric movement で で uniform <s:1> バ ドであった ドであった. A-1-IおよびA-2 <s:1> Km value および 0.138mM, 0.060mMであった. Youdaoplaceholder0 ずれ ずれ pH6-8で activity を has <s:1> て た た.

项目成果

川上 美佐子: "大麦分級粉からのアミノペプチダーゼの精製" 日本農芸化学会誌. 67. 253- (1993)

川上美佐子：“从分级大麦粉中纯化氨肽酶”日本农业化学学会杂志 67. 253- (1993)。

土井 裕司: "大麦分級粉中のタンパク質性生理活性物質の検索" 日本農芸化学会誌. 66. 163- (1992)

Yuji Doi：“搜索分类大麦粉中的蛋白质生理活性物质”日本农业化学学会杂志 66. 163- (1992)。

土井 裕司: "大麦分級粉中のアミノペプチダーゼの部分精製" 日本栄養・食糧学会総会講演要旨. 120- (1992)

Yuji Doi：“分级大麦粉中氨肽酶的部分纯化”日本营养与食品科学学会大会摘要 120-（1992）。

川上 美佐子: "大麦分級粉中のアミノペプチダーゼの精製と諸性質" 日本栄養・食糧学会 近畿支部大会講演抄録集. 14- (1992)

川上美佐子：“分类大麦粉中氨肽酶的纯化和性质”日本营养食品学会近畿分会会议摘要14-（1992）。

土井 裕司: "大麦分級粉中のアミノペプチダ-ゼの部分精製" 日本栄養・食糧学会総会講演要旨. (1992)

Yuji Doi：“分类大麦粉中氨肽酶的部分纯化”日本营养与食品科学学会大会摘要（1992）。