C-Kitおよびそのリガンドによる卵成熟・子宮内膜・胎盤の分化調節機構の解析

C-Kit及其配体对卵母细胞成熟、子宫内膜和胎盘分化的调控机制分析

• 批准号: 04671000
• 负责人: 高倉 賢二
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-04671000/
• 关键词: c-Kit; proto-oncogene; 卵; 初期胚; 子宮内膜; 胎盤

1.マウス卵・初期胚におけるc-kitの発現:c-kit蛋白に対するモノクローナル抗体を用いた免疫組織化学染色により以下の知見を得た。(1)卵巣においては顆粒膜細胞や莢膜細胞においてc-kitの発現は認めず、卵の膜表面にのみその発現を認めた。(2)卵における発現をさらに詳細に検討すると、胎仔期卵巣では認めず、出生後の卵巣においてのみその発現は認めた。また、排卵刺激による発現の推移をみると、排卵後に急激に発現が減弱した。(3)初期胚における検討では、受精直後の1細胞期に最も発現が強く、細胞数の増加とともに減弱し、4細胞期以後には消失した。2.マウス子宮内膜・胎盤におけるc-kitの発現:(1)c-kit蛋白に対するモノクローナル抗体を用いたwestern blottingにより、妊娠子宮および胎盤にc-kit蛋白の発現を認めた。(2)免疫組織化学染色によりc-kitの発現の局在を検討すると、子宮内膜においては妊娠以後に初めたc-kitの発現を認め、妊娠初期においては子宮内膜腺管上皮表面に限局していた。ただし、luminal epithrliumには発現を認めなかった。妊娠中期以降になると腺管上皮における発現は徐々に減弱し、uterine crypt周囲の間質や胎仔から離れた場所の脱落膜に発現が認められた。妊娠後期の成熟胎盤においてはlabyrinthine layerおよびdecidual layerに強い発現を認めるが、giant trophoblastic layerおよびspongiotrophoblastic layerには認めなかった。また、labyrinthine layerにおいては、母体血に接するtrophoblast cell表面にその発現が限局していた。(3)northern blotting,reverse transciptase polymerase chain reactionによりc-kit mRNAの発現を検討したが、上記結果と整合する結果が得られた。以上の知見から、c-kitは卵・初期胚の成熟およびそれらをとりまく環境である子宮内膜・胎盤の分化と密接に関連した蛋白であることが推察された。

1. マ ウ ス eggs, in the early embryo に お け る c - kit の 発 now: c - kit protein に す seaborne る モ ノ ク ロ ー ナ を ル antibody with い た immunohistochemical staining に よ り の know of these を た. (1) egg 巣 に お い て は particles や capsule membrane cells に お い て c - kit の 発 は now recognize め ず, egg の membrane surface に の み そ の 発 を now recognize め た. (2) the egg に お け る 発 now を さ ら に detailed に beg す 検 る と, tire seed stage eggs 巣 で は recognize め ず, after the birth of の eggs 巣 に お い て の み そ の 発 は now recognize め た. Youdaoplaceholder0, ovulation stimulation による occurs with <s:1> shift をみると, after ovulation に rapid stimulation に occurs with が weakening た. (3) in the early embryo に お け る beg で 検 は, 1 cell period after fertilization straight の に most も 発 now が く, cell number の raised と と も に し, 4 cells after に は disappear し た. 2. マ ウ ス endometrium, placenta に お け る c - kit の 発 now: (1) c - kit protein に す seaborne る モ ノ ク ロ ー ナ を ル antibody with い た western blotting に よ り, gravid uterus お よ び placenta に c - kit protein の 発 を now recognize め た. (2) immunohistochemical staining に よ り c - kit の 発 の bureau in を now beg す 検 る と, endometrial に お い て は early pregnancy after に め た c - kit の 発 を now recognize め, early pregnancy に お い て は endometrial glandular epithelial surface に limit bureau し て い た. Youdaoplaceholder0 ただ and luminal epithrliumに に are currently を recognized めな った った. From the middle of a pregnancy に な る と ductal epithelial に お け る 発 now は xu 々 に abate し, uterine crypt weeks 囲 の interstitial や tire tsai か ら from れ た places の peeling membrane に 発 が now recognize め ら れ た. In the later stage of pregnancy, the <s:1> mature placenta にお て labyrinthine labyrinthine labyrinthine layerおよびdecidual layerに strongly <s:1> shows を recognized めるが and giant trophoblastic layerおよびspongiotrophoblastic layerに recognize めな った. ま た, labyrinthine layer に お い て は, maternal blood に す る trophoblast cell surface に そ の 発 が limit board now し て い た. (3)northern blotting,reverse transciptase polymerase chain reactionによ によ c-kit mRNA によ occurrence を検 discuss たが, record the results と integrate the する results が obtain られた. Above の knowledge か ら, c - kit は eggs, early mature embryo の お よ び そ れ ら を と り ま く environment で あ る endometrial, placenta の differentiation と contact に masato even し た protein で あ る こ と が push examine さ れ た.

项目成果

Kiyoshige Horie: "The expression of c-Kit protein during oogenesis and early embryogenic development" Biology of Reproduction. 45. 547-552 (1991)

Kiyoshige Horie：“卵子发生和早期胚胎发育过程中 c-Kit 蛋白的表达”《生殖生物学》。

Kimitoshi Imai: "Human endometrial stromal cells and decidual cells express cluster of differentiation (CD)13 antigen/aminopeptidase N and CD10 antigen/neutral endopeptidase." Bilogy of Reproduction. 46. 328-334 (1992)

Kimitoshi Imai：“人子宫内膜基质细胞和蜕膜细胞表达分化簇 (CD)13 抗原/氨肽酶 N 和 CD10 抗原/中性内肽酶。”

Kiyoshige Horie: "Expression of c-Kit protein during placental development" Biology of Reproduction. 47. 614-620 (1992)

Kiyoshige Horie：“胎盘发育过程中 c-Kit 蛋白的表达”《生殖生物学》。

Kiyoshige Horie: "Immuohistochemical localization of androgen receptor in the humun endometrium,decidna,placenta and pathological conditions of the endometrium" Human Reproduction. 7. 1461-1466 (1992)

Kiyoshige Horie：“雄激素受体在人体子宫内膜、蜕膜、胎盘中的免疫组织化学定位和子宫内膜的病理状况”人类生殖。

Takahide Mori: "Granulosa cell immunotropism" Raven Press.NY,

Takahide Mori：“颗粒细胞免疫向性”Raven Press.NY，