異種初期胚・子宮内膜脱落膜細胞共培養系を用いた胚受容機構の研究

利用异源早期胚胎/子宫内膜蜕膜细胞共培养系统研究胚胎接受机制

• 批准号: 08877253
• 负责人: 高倉 賢二
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Shiga University of Medical Science
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 1997
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08877253/
• 关键词: 子宮内膜間質細胞; 脱落膜化; 胚; 着床

I.子宮内膜間質細胞(ESC)in vitro脱落膜化系の確立未熟マウスよりESCを回収・培養し、培養液中にestradio(E、0.1nM)、progesterone〔P、100nM)を加え脱落膜化を誘起した。E/Pの添加によりESCは、紡錘形から円形の大型細胞へと変化すると同時に、脱落膜蛋白の一つであるデスミンの産生能を有するにり、超微形態学的にも細胞質内には粗面小胞体の発達を認めるなど、脱落膜細胞に特徴的な所見を有し、マウスにおけるin vitro脱落膜化モデルの作成に成功したと考えられた。II.in vitro着床モデルの確立in vitroマウス脱落膜化モデルを用いて着床過程における胚とESCとの相互作用を検討した。培養9日目にこのESC上にマウス胞胚を静置し共培養を行、さらにE/P添加または非添加の条件下で胞胚の単独培養も行い、経時的に培養胚の発育およびESCとの相互作用を比較検討した。性ステロイドの添加の有無にかかわらず単独培養胚は培養12日目には剥離、脱落するのに対し、共培養胚は増殖を続け、ESCは絨毛細胞のoutgrowthおよび胚の生存の維持を促進することが示された。また共培養においてE/P添加群は無添加群(対照群)に比して胚の面積が有意に増大し、E/P添加による脱落膜化誘起は胚のoutgrowthも促進することが示唆された。超微形態学的に対照群では絨毛細胞がESCの間に浸潤している像を認めるのに対し、E/P添加群ではin vivoと同様に両細胞の境界が明瞭であり、絨毛細胞のESCへの浸潤像は認めなかった。脱落膜は胚の増殖を促進する一方、絨毛細胞の浸潤を制御することが示された。さらに対照群のESCにおいても共培養によりE/P添加群で認められた脱落膜変化が観察され、胚から脱落膜化促進因子が放出されている可能性も示された。

I. Endometrial stromal cells (ESCs)in vitro shedding membranalization system <s:1> establishment immature ウスよ ESCを redevelopment · culture, にestradio(E, 0.1nM) in culture medium, progesterone [P, 100nM)を + え shedding membranalization を inducing た. E/P の add に よ り ESC は, spindle か ら の has drifted back towards &yen; form large cell へ と variations change す る と に at the same time, fall off a membrane protein の つ で あ る デ ス ミ ン の can produce を have す る に り, utrasmall morphology に も cytoplasm に は coarse surface vesicular body の 発 da を recognize め る な ど, peeling membrane cells に 徴 を な see し, マ ウ ス に お け る in vitro shedding and membrane-ization モデ えられた <s:1> made に successful たと えられた examination えられた. II. The in vitro implantation モ デ ル の establish the in vitro マ ウ ス peeling membrane is モ デ ル を with い て implantation process に お け る embryo と ESC と の interaction を beg し 検 た. Develop 9 orders に こ の ESC on に マ ウ ス cell embryo を let stand し trained を line, さ ら に E/P add ま た は under the condition of not adding の で cell embryo の 単 alone the cultivation of the line も い, 経 に embryo の 発 yukon お よ び ESC と の interaction を beg し compare 検 た. Sexual ス テ ロ イ ド の add の presence of に か か わ ら ず 単 cultivation embryo は 12 mesh alone に は stripping, fall off す る の に し seaborne, co-culture は raised colonization を 続 け, ESC は villi cells の outgrowth お よ の び embryo survival の maintain を promote す る こ と が shown さ れ た. ま た trained に お い て adding E/P group は without adding group (as group) seaborne に than し て embryo の し が intentionally に raised large area, E/P add に よ る peeling membrane is induced は embryo の outgrowth も promote す る こ と が in stopping さ れ た. Amd morphology に according to group of seaborne で は hair cells が に infiltration between ESC の し て い る like を recognize め る の に し seaborne, E/P add group で は in vivo と with others に struck cells の realm が clear で あ り, hair cells の ESC へ の infiltrating like は recognize め な か っ た. Exfoliated membrane <s:1> embryonic <s:1> proliferation を promotes する on one side, villous cell <s:1> infiltration を control する とが とが shows された. さ ら に according to group of seaborne の ESC に お い て も trained に よ り E/P group add で recognize め ら れ た - turn off membrane が 観 examine さ れ, embryo か ら peeling membrane is promoting factor が release さ れ て い も る possibility in さ れ た.

项目成果

和久田晃司: "マウス卵管内胚の存在が子宮内膜増殖能に及ぼす影響" 産婦人科の進歩. 48・3. 254-257 (1996)

Koji Wakuda：“小鼠输卵管中胚胎的存在对子宫内膜增殖能力的影响”妇产科进展 254-257（1996）。

後藤 栄: "in vitro発生停止胚におけるミトコンドリアの挙動・構造とATP量" 産婦人科の進歩. (in press). (1997)

Sakae Goto：“体外发育停滞胚胎中的线粒体行为、结构和 ATP 含量”妇产科进展（1997 年）。