矯正的歯の移動における骨基質蛋白遺伝子のin situハイブリダイゼーション

正畸牙移动过程中骨基质蛋白基因的原位杂交

• 批准号: 04671263
• 负责人: 山本 照子
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-04671263/
• 关键词: in situハイブリダイゼーション; osteopontin; osteonectin; osteocalcin; 矯正的歯の移動

矯正的歯の移動時の歯周組織の骨基質蛋白遺伝子の発現をin situハイブリダイゼーション免疫組織科学的手法により検討するために7週齢Wistar系ラットの上顎第一臼歯と第二臼歯の歯間部に矯正用ゴムを挿入し,実験的歯の移動をおこなった.反対側は対照とした.歯の移動0,1,3,5,7日目にラットを屠殺し上顎骨を切り出し,4%パラホルムアルデヒド-PBSで固定し,10%EDTA-PBSで脱灰後,脱水し,パラフィンに包埋すした。ユング社製スーパーカットで5μmに薄切し,パラフィン除去後,前処置を施し,脱水後ハイブリダイゼイションを行った.骨基質蛋白遺伝子としてOsteocalcin,osteonectin,osteopontin(2ar)のcDNAを用いてこれらのDIG RNAプローブを作製した.ハイブリダイゼイション後,抗体反応,発色反応をモイスチャーチャンバーの中で行いその後,封入しニコン社製組織顕微鏡により,歯の移動に伴う圧迫側と牽引側の皮質骨,歯槽中隔の海綿骨,象牙質およびセメント質の歯根吸収像を観察し,骨基質蛋白遺伝子発現の細胞局在を明らかにした.特にosteonectin遺伝子の発現については歯根膜の非特異的なシグナル発現を生じないハイブリダイゼイション条件を見いだすことに努力した。この結果、osteonectinの遺伝子は歯根膜全域に発現した。また、osteopontin遺伝子は歯槽骨の吸収面、歯の移動の圧迫側に強いシグナルが局在し、osteocalcin,osteopontin遺伝子は歯槽骨の形成面、歯の移動の牽引側に強いシグナルが局在した。このような新知見は現在論文の投稿準備中であり、日本矯正歯科学会、骨代謝学会、基礎歯科医学会に発表予定している。

Corrective 歯 の moves の 歯 tissues の bone matrix protein heritage 伝 son の 発 を now in situ ハ イ ブ リ ダ イ ゼ ー シ ョ ン immunohistochemical scientific technique に よ り beg す 検 る た め に 7 weeks 齢 Wistar department ラ ッ ト の palate first mortar 歯 と second mortar 歯 の 歯 に correction between department with ゴ ム を scions into し, be the 験 歯 の mobile を お こ な っ た. Reverse side は seaborne seaborne as と し た. 歯 の mobile 0,1,3,5,7 day eye に ラ ッ ト を slaughter し cut mandible bone を り し, 4% パ ラ ホ ル ム ア ル デ ヒ ド - PBS で fixed し, 10% EDTA - PBS で after deashing, dehydration し, パ ラ フ ィ ン に embedding す し た. ユ ン グ club system ス ー パ ー カ ッ ト で 5 microns に thin slice し パ ラ フ ィ ン removed after the former 処 buy を し, dehydration after ハ イ ブ リ ダ イ ゼ イ シ ョ ン を line っ た. Traces of bone matrix protein 伝 son と し て Osteocalcin and osteonectin, osteopontin ar (2) の cDNA を with い て こ れ ら の DIG RNA プ ロ ー ブ を cropping し た. ハ イ ブ リ ダ イ ゼ イ シ ョ ン, antibodies against 応, 発 color against 応 を モ イ ス チ ャ ー チ ャ ン バ ー の い で line of そ の, seal in し ニ コ ン system of social organization 顕 micromirror に よ り, 歯 の mobile に with う 圧 forced side と traction side の cortical bone, 歯 slot septal の sponge bone, dentin お よ び セ メ ン ト qualitative の 歯 root absorption 収 like を 観 The bone matrix protein remains 伝, and the local cells are を, ら, に, た. Son, に osteonectin heritage 伝 の 発 now に つ い て は 歯 root membrane の nonspecific な シ グ ナ ル 発 now born を じ な い ハ イ ブ リ ダ イ ゼ イ シ ョ ン conditions を see い だ す こ と に efforts し た. The <s:1> results, osteonectin remains 伝 offspring 歯 歯, and the entire root membrane に shows <s:1> た. ま た, osteopontin but 伝 は 歯 の 収 surface absorption, osseous 歯 の mobile の 圧 force strong side に い シ グ ナ ル が bureau in し, osteocalcin, osteopontin posthumous son 伝 は 歯 の forming surface, osseous 歯 の mobile の strong lateral traction に い シ グ ナ ル が bureau in し た. <s:1> ような ような New insights ような are currently in the process of preparing for submission of paper <e:1> であ であ, the Japanese Society of Orthodontics 歯, the Society of Bone Metabolism, and the Society of Basic Sciences 歯 に have issued a statement of approval, and て る る る る る.

项目成果

Hee-Moon Kyung.T.Takano-Yamamoto.S.Soma,.M.Sakuda: "Stimulation of alkaline phosphatase activity by ascorbic acid and supression by 1,25-dihydroxycholecalciferol in rabbit craniofacial chondrocytes in culture" J.Osaka Univ Dent Sch. 32. 60-67 (1992)

Hee-Moon Kyung.T.Takano-Yamamoto.S.Soma,.M.Sakuda：“抗坏血酸刺激碱性磷酸酶活性并通过 1,25-二羟基胆钙化醇抑制培养的兔颅面软骨细胞” J.Osaka Univ Dent Sch

T.Takano-Yamamoto,M.Kawakami,M.Sakuda: "Effect of pulsing electromagnetic field on demineralized bon e-matrix-induced bone formation in a bony defect in the premaxilla of rats" J.Dent.Res.71. 1920-1924 (1992)

T.Takano-Yamamoto、M.Kawakami、M.Sakuda：“脉冲电磁场​​对大鼠前上颌骨骨缺损中脱矿骨 e 基质诱导的骨形成的影响”J.Dent.Res.71。

T.Takano-Yamamoto,M.Kawakani,M.Sakuda: "Defect of the rat premaxilla as a model of alveolar clefts or testing bone-inductive agents" J.Oral Maxillofacial Surg. (1993)

T.Takano-Yamamoto、M.Kawakani、M.Sakuda：“作为牙槽裂模型或测试骨诱导剂的大鼠前上颌骨缺陷”J.Oral Maxillofacial Surg。

S.Nomura,K.Hirakawa,J.Nagoshi et al.: "Method for detecting the expression of bone matrix protein by in situ hybridization using decalcified mineralized tissue" Acta Cytochem Histochem.

S.Nomura，K.Hirakawa，J.Nagoshi等人：“使用脱钙矿化组织通过原位杂交检测骨基质蛋白表达的方法”Acta Cytochem Histochem。

T.Takano-Yamamoto,M.Kawakami,M.Sakuda: "Effect of age on the rate of tooth mpvement in combination with local use of 1,25(OH)2D3 and mechanical force in the rat" J.Dent.Res.71. 1487-1492 (1992)

T.Takano-Yamamoto、M.Kawakami、M.Sakuda：“年龄与大鼠局部使用 1,25(OH)2D3 和机械力相结合对牙齿发育速率的影响”J.Dent.Res。