嫌気条件における遺伝情報の転写制御機構

厌氧条件下遗传信息转录控制机制

• 批准号: 04680193
• 负责人: 山本 勇
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-04680193/
• 关键词: 嫌気条件; 遺伝子発現; 転写制御; torR; 大腸菌

大腸菌の染色体DNAを制限酵素で切断後、プラスミッドpUC118に組み込んでtorR遺伝子をクローン化した(pKS7)が、3.4キロ塩基対(kbp)の染色体DNA断片が組み込まれている。torR突然変異を持つHM177株をpUC118およびpKS7で形質転換した後、SDS‐ポリアクリルアミドゲル電気泳動で分析した結果、2種類のタンパク質がコードされていた。即ち、TMAO呼吸培養で最も強く、次いで硝酸呼吸培養、発酵培養でも合成されるが酸素呼吸では合成されない52kDaタンパク質と、上記4つの培養条件で等しく合成される27kDaタンパク質である。エクソヌクレアーゼIIIを用いたデレッションで何れかのタンパク質を合成できないプラスミッドを作成した結果、52kDaタンパク質を発現するプラスミッドpKS7D3のみがHM177株のtorR変異を回復した。硝酸還元酵素の遺伝子オペロンnarGHJIなどの2成分系転写調節因子をコードするnarXとnarLのlacZ融合遺伝子をHM177株に形質導入し、さらにpKS7で形質転換して作成した株は、narX‐lacZ、narL‐lacZともに硝酸呼吸条件でのみX‐galを分解した。即ち、TorRタンパク質はnarXLオペロンの転写制御に働くことを示している。52kDaのTorRタンパク質は対数増殖の後期に入ると合成量が少なくなり、torR遺伝子の転写を自己制御している可能性が高い。従って、上記のpKS7DはTorRタンパク質の大量生産に使えなかった。今後の研究方向として、3.4kbpのDNA上に適当な制限酵素切断部位が見つからないため、部位特異的変異を導入して自己制御領域を破壊することにより蛋白の大量生産を可能にし、精製タンパク質の性質を当初の計画通りに解明したい。

After the restriction enzyme was cut off from the DNA of Rhizoctonia macrocephalus, the torR fragments were cut, the torR fragments were cut, and the DNA fragments of the chromosomes were sequenced. TorR abruptly maintained the results of the HM177 pUC118-based pKS7 test, and the SDS--based dynamic electrophoresis analysis showed that the results were different. That is, TMAO breath culture, nitric acid breath culture, fermentation culture, acid respiration, 52kDa synthesis, 4-cell culture conditions, etc., 27kDa synthesis, nitric acid respiration, nitric acid respiration, nitric acid breathing, nitric acid breathing, This is the first time that III has been used in this paper. In this case, the results have been made in the first place, and the results have been made. The results show that the results have been improved, and the results have been shown in 52kDa. The results show that the results have been improved, and the results have been improved. The results show that the results have been improved, and the results have been detected in the HM177 plant. The results show that the results have been improved, and the results have been shown in the 52kDa database. The results show that the results have not been detected in the HM177 plant. Reductase nitrate (no _ 3), narGHJI, lacZ, narX-lacZ, narL-lacZ, nitric acid respiration conditions, nitric acid respiration conditions and X-gal decomposition conditions. That is, TorR, narXL, write, write, read, write, write In the later period of 52kDa TorR production, the number of synthetic products was low, while that of torR was higher than that of others. PKS7D, TorR, make sure that a large number of babies are born. In the future, in the field of research, 3.4kbp DNA, when the enzyme was cut off, the enzyme was cut off, and the special parts of the enzyme were cut into the field of self-control.