权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

ヒト尿中落下細胞培養系を用いた尿細管機能の解析

利用人尿滴细胞培养系统分析肾小管功能

基本信息

批准号：
05807063
负责人：
五十嵐裕
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05807063/
关键词：
尿細管尿沈渣組織培養 γ-GTP Tamm-Horsfall蛋白

项目摘要

今回の研究は、尿中落下尿細管細胞をいかにviabilityを保った形で培養系に移し、多種類の尿細管細胞を別々に培養し、性格付けるかという点を中心にしておこなわれた。尿の無菌的採取については、男児・女児をとわず、細菌の混入を防止する上でフォーレカテーテルによる採尿が必要であるとの結論に達し、1回に200mlの尿が必要量であることがわかった。培養は、ガラス上では難しく、polystylene上にコラーゲンType Iをコートした上にDMEM/F12混合培地をのせ、この中に細胞をattachさせて行うのが、もっとも効率的だった。このため実験はもっぱらマイクロプレートを用いて行なわれた。24穴よりもwellの大きいプレートでは多種の細胞が培養され、形態的には約5種類に分類され、各種染色法を用いた場合にはγ-GTP陽性の近位尿細管細胞、THP陽性EMA陰性のヘンレの太い上行脚細胞、THP陰性EMA陽性の集合管由来細胞が確認された。これらをcloneとして培養するため、初代培養の時点から、細胞と96穴マイクロプレートに散布して培養したところ、上記の3種の細胞が別々に培養し得ることが明らかとなった。又、近位由来集合管由来の細胞はドーム形成を示し、水・電解質の再吸収能を保持していることがわかった。各培養細胞群は初代培養のみではなく、継代培養も可能だった。いずれの細胞群もconfluentになった時点では電子顕微鏡所見上(TEM)、tight junctionをはっきりと認め、多層にもならず、尿細管本来の機能を保持していることが明らかとなった。

In this paper, the study of urine tubule cells dropped from urine was carried out in different culture systems, with different characteristics. The results of sterile urine collection are as follows: 1 round of 200ml of urine is necessary to prevent the mixing of bacteria. Culture, culture, culture, culture This is the first time I've seen you. 24. The cells were cultured and classified into 5 types by morphology. γ-GTP positive proximal urinary tubule cells, THP positive EMA negative ascending peduncle cells and THP negative EMA positive collecting tube-derived cells were confirmed by various staining methods. The time point of culture of the first generation of cells is 96. The time point of culture of the first generation of cells is 96. In addition, near the origin of the manifold origin of the cell formation, water and electrolyte reabsorption energy to maintain the process. Each culture cell group is divided into primary culture and secondary culture. The cell population in the middle of the tube is confluent, and the electron microscope (TEM), the tight junction, and the original function of the urine tubule are maintained.