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クエン酸発酵性Lactococcus lactisにおける代謝機能の遺伝学的解析

柠檬酸发酵乳酸乳球菌代谢功能的遗传分析

基本信息

批准号：
06660355
负责人：
宮本拓
金额：
$ 0.32万
依托单位：
Okayama University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

クエン酸発酵性Lactococcus lactis はラクトース代謝能,タンパク質分解能およびクエン酸代謝能を持ち,乳業分野において応用範囲の広い乳酸菌である。しかし,それらの代謝機能が核外遺伝子に支配されており,遺伝的に不安定で失われやすいことが知られている。本研究では,わが国の乳業界で広く使用されている Lactococcus lactis subsp.lactis biovar diacetylactis NIAI N-7(以下 Lactococcus diacetylactisと記す)を供試菌株とした。筆者らのこれまでの研究成果より,Lactococcus diacetylactisでは,分子量の異なる3種類のプラスミドDNAはいずれも重要な発酵的性質の発現に関与しており,特に,タンパク質分解酵素の生産には34Mdalと23Mdalプラスミドが関与していた。そこで,それらの欠損株と親株の酵素学的性状を詳細に比較検討することによって,タンパク質分解機能の遺伝学的解析を行った。まず,乳中の主たるタンパク質であるカゼインに対する作用をSDS-PAGEによって調べたところ,両プラスミドに支配されているタンパク質分解酵素系は,いずれもβ-カゼインを基質として作用していることが明らかとなった。次に,各菌株の培養液より菌体外,表層結合および細胞内プロテアーゼを調製し,タンパク質分解酵素の活性を調べた。その結果,23Mdalプラスミドは細胞内プロテアーゼの生産に関与しており,この欠損株ではペプチダーゼ活性の有意な減少が認められた。特にLys-P-NAを基質とした時のアミノペプチターゼ活性は親株の1/5であった。しかし,34Mdalプラスミドの機能とプロテアーゼの関係は特定できなかった。今後,23Mdalプラスミドに支配されているペプチダーゼの基質特異性をさらに明らかにすることは,プラスミド欠損株を発酵乳製品製造に応用する上で有益と思われる。

Lactococcus lactis is an acid-producing bacterium with metabolic energy, metabolic energy and metabolic energy. The metabolic function of the gene is controlled by the extracellular gene, and the instability of the gene is lost. In this study, Lactococcus lactis subsp.lactis biovar diacetylactis NIAI N-7(hereinafter referred to as Lactococcus diacetylactis) is widely used in the dairy industry in this country. In this paper, the author's research results show that Lactococcus diacetylactis is related to the development of important fermentation properties in three kinds of DNA with different molecular weights, especially in the production of 34Mdal 23Mdal enzymes. A detailed comparative study of the enzymatic properties of the defective strains and their parents was carried out. The main body of milk is composed of two parts: one part is composed of three parts: one part is composed of two parts: one part is composed of three parts In addition, the culture medium of each strain regulates the activity of metabolic enzymes in vitro, surface binding and intracellular processes. As a result,23Mdal plants were found to be involved in intracellular production and production, and their activity was intentionally reduced. Special Lys-P-NA matrix 34Mdal has a special relationship with the function of the 34Mdal. In the future,23Mdal will dominate the substrate specificity of dairy products, and it will be beneficial to consider the use of defective strains in the production of fermented dairy products.