ヒト線維芽細胞の肝細胞増殖因子産生能に及ぼす組織提供者の年齢

供体年龄对人成纤维细胞生成肝细胞生长因子能力的影响

• 批准号: 06670227
• 负责人: 宮崎 正博
• 金额: $ 0.83万
• 依托单位: Okayama University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 1995
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06670227/
• 关键词: ヒト胎児肺由来線維芽細胞; 培養内加齢; ヒト肝細胞増殖因子産生; ヒト肝細胞増殖因子遺伝子発現; ヒト肝細胞増殖因子の産生促進因子; ヒト肝細胞増殖因子の産生抑制因子; インターロイキン-1β; インターロイキン-1β遺伝子発現

肝細胞増殖因子(HGF)は肝再生促進因子の本体であると考えられている.既に,ヒト胎児肺由来線維芽細胞系(IMR-90およびMRC-5)を用いたヒトHGF(hHGF)産生調節機構の研究の過程で,これら両細胞系におけるhHGF産生が培養内加齢とともに顕著に増加することを見出している.つまり,約70PDLのほぼ老化した細胞は,約40PDLの比較的若い細胞に比べて単位細胞数当り約3倍量のhHGFを産生することを明らかにした.そこで本年度は,(1)ヒト胎児肺由来線維芽細胞によるhHGF産生が培養内加齢に伴なって連続的に徐々に増加するのか,(2)あるいはある特定のPDLから急速に増加し始めるのか,(3)hHGF産生制御因子(IL-1,PMA,cAMP,TNF-α,DEX,TGF-β)に対する応答性は培養内加齢に伴なって変化するか,(4)培養内加齢に伴なうhHGFの産生増加はどの様な機構によるのかについて検討した.まず,IMR-90やMRC-5以外のヒト胎児肺由来線維芽細胞系(TIG-7: 14.6,26.1,37.4,47.0,56.4,64.8,75.6PDL; WI-38:24.4,36.1,43.6PDL)におけるhHGF産生を調べたところ,TIG-7細胞のhHGF産生はPDL56.4から急激に増加した.PDL56.4はこの細胞の培養内寿命の約65%に当たる.一方,WI-38細胞のhHGF産生はPDL24.4(培養内寿命の約45%に相当)からに増加した.このように,培養内加齢に伴なうhHGF産生の増加は,IMR-90やMRC-5細胞系だけではなく,その他のヒト胎児肺由来線維芽細胞系(TIG-7およびWI-38)にも認められることがわかった.また,ヒト胎児肺由来線維芽細胞によるhHGF産生は培養内加齢に伴なって連続的に徐々に増加するのではなく,培養内寿命の約45〜65%の時点から急激に増加することも明かとなった.さらに,これらの細胞系におけるhHGF産生増加がhHGF遺伝子の転写レベルの上昇に基づくことも明らかにした.これらの細胞系について,hHGF産生制御因子(促進因子:PMA,IL-1,TNF-α;抑制因子:DEX,TGF-β1)に対する応答性を調べた結果,いずれの細胞系においてもPMA,DEXならびにTGF-βに対する応答性は培養内加齢とは無関係に変化しなかった.しかし,IL-1やTNF-αなどの促進因子に対する応答性は培養内加齢に伴って減弱する傾向が認められた.一方,ノーザン・ブロット分析により老化細胞においてのみIL-1β遺伝子の発現が認められた.また,IL-1αによるIL-1β遺伝子の発現誘導も培養内加齢に伴って増強した.これらの結果より,培養内加齢に伴うhHGF産生増加がIL-1β遺伝子の発現増加に一部起因している可能性が考えられた.

Hepatocyte proliferative factor (HGF) えられて liver regeneration promoting factor <s:1> ontology であると study えられて る る る. Is に ヒ ト fetal lung origin where line d bud cell line (IMR - 90 お よ び MRC - 5) を with い た ヒ ト HGF (hHGF) regulating mechanism producing の で の, こ れ ら struck cell line に お け る hHGF produce が culture add 齢 と と も に 顕 with に raised す る こ と を shows し て い る. つ ま り, about 70 PDL の ほ ぼ aging し は た cells, about 40 PDL の comparison if に い cells than べ て 単 bit cell number when り about three times the amount of の hHGF を produce す る こ と を Ming ら か に し た. そ こ で は this year, (1) ヒ ト fetal lung origin where line d bud cells に よ る hHGF produce が culture add 齢 に with な っ て even 続 に xu 々 に raised plus す る の か, (2) あ る い は あ る specific の PDL か ら に raised rapidly add し beginning め る の か, (3) hHGF produce suppression factor (IL - 1, PMA, cAMP, TNF alpha, DEX, TGF - beta) に す seaborne る 応 answer は sex education add 齢 に with な っ て variations change す る か, (4) develop add 齢 に with な う hHGF の produce raised plus は ど の others な institutions に よ る Beg し の か に つ い て 検 た. ま ず, IMR - 90 や MRC - 5 outside の ヒ ト fetal lung origin where line d bud cell line (TIG - 7:14.6, 26.1, 37.4, 47.0, 56.4, 64.8, 75.6 PDL; ,36.1 WI - pass. 4, 43.6 PDL) に お け る hHGF produce を adjustable べ た と こ ろ, TIG - 7 cells の hHGF produce は PDL56.4 か ら nasty shock に raised plus し た. PDL56.4 は こ の cell の culture life の within about 65% に when た る. Side, WI - 38 cells の hHGF produce は PDL24.4 (culture life about 45% に の quite) か ら に raised plus し た. こ の よ う に, cultivate add 齢 に with な う hHGF produce の raised は, IMR - 90 や MRC - 5 cell line だ け で は な く, そ の he の ヒ ト fetal lung origin where line d bud cell line (TIG - 7 お よ び WI - 38) に も recognize め ら れ る こ と が わ か っ た. ま た, ヒ ト fetal lung origin where line d bud cells に よ る hHGF produce は culture add 齢 に with な っ て even 続 に xu 々 に raised plus す る の で は な く, cultivating life の within about 45 ~ 65% の point か ら nasty shock に raised plus す る こ と も Ming か と な っ た. さ ら に, こ れ ら の cells Department に お け る hHGF produce raised plus が hHGF posthumous son 伝 の planning write レ ベ ル の increase に base づ く こ と も Ming ら か に し た. こ れ ら の cell line に つ い て, hHGF produce suppression factor (promoting factor: PMA, IL - 1, TNF alpha; Inhibitory factor: DEX, TGF - beta 1) に す seaborne る 応 a sexual を adjustable べ た results, い ず れ の cell line に お い て も PMA, DEX な ら び に TGF - beta に す seaborne る 応 answer は sex education add 齢 と は no masato is に variations change し な か っ た. し か し, IL - 1 や TNF alpha な ど の promoting factor に す seaborne る 応 answer は sex education add 齢 に Accompanied by って, する tends to が recognize められた. Side, ノ ー ザ ン · ブ ロ ッ ト analysis に よ り senescent cells に お い て の み IL - 1 beta heritage 伝 son の 発 が now recognize め ら れ た. ま た, IL - 1 alpha に よ る IL - 1 beta heritage 伝 son の 発 now induced も training within 齢 に with っ て raised strong し た. こ れ ら の results よ り, cultivate add 齢 に with う hHGF produce raised plus が IL - 1 beta heritage 伝 son の 発 Now an additional に is added: the cause of て る る possibility of が examination えられた.

项目成果

宮崎正博 他6名: "Increase in production of hepatocyte growth factor by human embryonic lung fibroblasts in the process of aging in culture" Expevimental Cell Research. 212. 22-29 (1994)

Masahiro Miyazaki 等 6 人：“人胚胎肺成纤维细胞在培养老化过程中增加肝细胞生长因子的产生”实验细胞研究 212. 22-29 (1994)。