黄色ブドウ球菌が産生するADPリボシルトランスフェラーゼEDINの作用機序

金黄色葡萄球菌产生的ADP核糖基转移酶EDIN的作用机制

• 批准号: 06670294
• 负责人: 菅井 基行
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06670294/
• 关键词: S.aureus; EDIN; rho p21; ゴルジ体; CNF2

研究代表者はEDINのVero細胞に及ぼす影響について検討し、EDINがVero細胞のゴルジ体を解離させることを見出している。この作用はbrefeldinAとよばれる細胞内膜系に影響を与える抗生物質の作用と酷似しているが、rho p21がどのような形でのこ作用に関係しているのかは明らかにされていない。研究代表者はVero細胞を用いてEDINの基質について検討し、Vero細胞が等電点の異なる複数の基質を有することを明らかにした。またこの基質は、細胞膜、細胞質の両方に存在することが明らかになった。またbrefeldinA処理あるいはEDIN処理によって細胞膜画分のEDIN基質は蔗糖密度勾配遠心分画法によって比重の大きなゴルジ体領域から比重の軽い方へ移動することが明らかとなった。また、この研究を行っている過程で病原性大腸菌が産出するCytotoxic Necrotizing Factor 2(CNF2)がEDINの標的であるrho p21を修飾することを見出した。このCNF2によるrho p21の修飾によってrho p21の見かけ上の分子量が大きくなる。この修飾の本体は不明であるが、CNF2の作用によって細胞は見かけ上、rho p21の機能を活性化された性状をとる。CNF2の遺伝子cnf2とrhoAを共発現させた大腸菌内で、発現したrhoA p21が修飾されたことからCNF2が酵素作用有している可能性について現在検討中である。

The study representatives discussed the effects of EDIN on Vero cells and the dissociation of EDIN from Vero cells. The effects of these drugs on the inner membrane system are similar to those of antibiotics, rho p21, etc. The study representatives discussed the use of EDIN in Vero cells and the existence of multiple substrates with different isoelectric points in Vero cells. The matrix, cell membrane, and cytoplasm of the cells are present. In addition to the EDIN treatment, the cell membrane was separated from the EDIN matrix by sucrose density matching telecentric analysis, and the specific gravity of the cell was shifted from the EDIN matrix to the EDIN matrix. Cytotoxic Necrotizing Factor 2(CNF2) and rho p21 modification of EDIN targets have been identified during this study. The molecular weight of rho p21 is higher than that of CNF2. The modification of rho p21 is unknown, CNF2 is active, and rho p21 is active. CNF2 gene promoter cnf2 and rhoA are co-detected in E. coli, and rhoA p21 is modified by CNF2 enzyme.

项目成果

Hitoshi Komatsuzawa: "Effect of combination of oxacillin and non-β-lactam antibiotics on methicillin-resistant Staphylococcus aureus" The Journal of Antimicrobial Chemotherapy. 33. 1155-1163 (1994)

Hitoshi Komatsuzawa：“苯唑西林和非β-内酰胺抗生素联合使用对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的影响”《抗菌化疗杂志》33. 1155-1163 (1994)。

Eric Osald: "Cytotoxic necrotizing factor type2 produced by birulent Escherichia coli modifies the small GTP-binding proteins Rho inbolbved in assembly of actin stress fibers" Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 91. 3814-3818 (1994)

Eric Osald：“由强毒大肠杆菌产生的 2 型细胞毒性坏死因子可修饰参与肌动蛋白应力纤维组装的小型 GTP 结合蛋白 Rho”，Proc.Natl.Acad.Sci.USA。

Tadahiro Oshida: "A Staphylococcus aureus autolysin that has an N-acetulmuramoyl-L-alanine amidase domain and an endo-β-Nacetylglucosaminidase domain:cloning, sequence analysis and characterization" Proc. Natl. Acad. Sci.USA. 92. 285-289 (1995)

Tadahiro Oshida：“具有 N-乙酰胞壁酰基-L-丙氨酸酰胺酶结构域和内切-β-N乙酰氨基葡萄糖苷酶结构域的金黄色葡萄球菌自溶素：克隆、序列分析和表征”Proc.Sci.USA。 289 (1995)

Hitoshi Komatsuzawa: "The effect of Triton X-100 on the in-vitro susceptibility of methicillin-resistant Staphylococcus aureus to oxacillin" The Journal of Antimicrobial Chemotherapy. 34. 885-897 (1994)

Hitoshi Komatsuzawa：“Triton X-100 对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌对苯唑西林的体外敏感性的影响”《抗菌化疗杂志》。

Motoyuki Sugai: "Staphylococci and Staphylococcal Infections" Gustay Fischer Verlag, 8 (1994)

Motoyuki Sugai：“葡萄球菌和葡萄球菌感染”Gustay Fischer Verlag，8 (1994)