黄色ブドウ球菌が産生するADPリボシルトランスフェラーゼEDINの作用機序

研究代表者はEDINのVero細胞に及ぼす影響について検討し、EDINがVero細胞のゴルジ体を解離させることを見出している。この作用はbrefeldinAとよばれる細胞内膜系に影響を与える抗生物質の作用と酷似しているが、rho p21がどのような形でこの作用に関係しているのかは明らかにされていない。研究代表はVero細胞を用いてEDINの基質について検討し、Vero細胞が等電点の異なる複数の基質を有することを明らかにした。またこの基質は、細胞膜、細胞質の両方に存在することが明らかになった。またbrefeldinA処理あるいはEDIN処理によって細胞膜画分のEDIN基質は蔗糖密度勾配遠心分画法によって比重の大きなゴルジ体領域から比重の軽い方へ移動することが明らかとなった。大腸菌で発現させたrhoAを部分精製した後、Vero細胞にマイクロインジェクトして、細胞の形態変化について検討した。その結果マイクロインジェクションによって細胞形態の変化が認められた。また本実験を遂行中に、Rhoのシグナル伝達における下流にフォスファチジルイノシトール3キナーゼが存在することが報告され、血小板膜を用いた再構成実験系でEDINがフォスファチジルイノシトール3キナーゼ活性を抑制することを明らかにした。またEDINはカルバコールによって引き起こされる回腸平滑筋収縮を阻害することを見出した。

研究代表者はEDINのVero細胞に及ぼす影響について検討し、EDINがVero細胞のゴルジ体を解離させることを見出している。この作用はbrefeldinAとよばれる細胞内膜系に影響を与える抗生物質の作用と酷似しているが、rho p21がどのような形でこの作用に関係しているのかは明らかにされていない。研究代表はVero細胞を用いてEDINの基質について検討し、Vero細胞が等電点の異なる複数の基質を有することを明らかにした。またこの基質は、細胞膜、細胞質の両方に存在することが明らかになった。またbrefeldinA処理あるいはEDIN処理によって細胞膜画分のEDIN基質は蔗糖密度勾配遠心分画法によって比重の大きなゴルジ体領域から比重の軽い方へ移動することが明らかとなった。大腸菌で発現させたrhoAを部分精製した後、Vero細胞にマイクロインジェクトして、細胞の形態変化について検討した。その結果マイクロインジェクションによって細胞形態の変化が認められた。また本実験を遂行中に、Rhoのシグナル伝達における下流にフォスファチジルイノシトール3キナーゼが存在することが報告され、血小板膜を用いた再構成実験系でEDINがフォスファチジルイノシトール3キナーゼ活性を抑制することを明らかにした。またEDINはカルバコールによって引き起こされる回腸平滑筋収縮を阻害することを見出した。