S.mutans,S.sobrinusを選択的に溶解する溶菌酵素の研究
选择性裂解S.mutans和S.sobrinus的裂解酶的研究
基本信息
- 批准号:14657467
- 负责人:
- 金额:$ 1.79万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Exploratory Research
- 财政年份:2002
- 资助国家:日本
- 起止时间:2002 至 2003
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
昨年度の研究により、Streptococcus mutantsの産生する分子量107kDaの溶菌酵素をコードする遺伝子のクローニングおよび遺伝子欠損株の作製を行った。今年度では、His-tag融合したリコンビナントタンパクを大腸菌の系を用いて大量発現させ、目的の酵素の大量精製を試みた。その結果、大腸菌の菌体破砕画分からNi-NTAレジン精製後、疎水(Phenyl)クロマトグラフィーを行うことによりクマシーブルー染色で単一のタンパクバンドを得ることができた。収量も1リットルの培養液からおよそ10mgの標品が得られ、大量に精製を行う系が確立できた。また、得られた精製酵素を用いてS.mutansの精製ペプチドグリカンを消化し、消化産物についてアミン末端の増加および還元糖の増加を検討したところ、還元糖の増加が認められた。また、ペプチドグリカンの糖の構成成分であるN-acetylglucosamineとN-acetylmuramic acidの還元糖の増加を検討した結果、N-acetyl-muramic acidの増加が認められたことから、この溶菌酵素はmuraminidaseであることが明らかになった。この酵素の溶菌活性の至適条件を検討した結果、リン酸緩衝液中でpHが6前後でかつ100mM NaClおよび75mM CaCl_2存在下で最大の活性を持つことが明らかになった。得られた精製酵素を用いて種々の口腔レンサ球菌に対する溶菌活性を比較検討した結果、S.mutansおよびS.sobrinusに対しては強い活性を示したが、その他のレンサ球菌(S.sanguis, S.salivarius, s.mitis)にはほとんど活性が認められなかった。
In the past year, the production of Streptococcus mutants with a molecular weight of 107kDa was studied. This year, His-tag fusion was used to produce large quantities of E. coli and to purify large quantities of target enzymes. As a result, Escherichia coli cells were separated from Ni-NTA and purified. Phenyl was used to stain the cells. The amount of culture medium from 1 mg to 10mg was obtained, and the amount of purification was established. The purification of S.mutans and the increase of reducing sugar in the digestive products are discussed. The increase of N-acetylglucosamine and N-acetylmuramic acid in the sugar composition of the protein was investigated. The increase of N-acetylmuramic acid in the protein was identified. The optimum conditions for the lytic activity of the enzyme were investigated. The results showed that the maximum activity of the enzyme was maintained in the presence of 100mM NaCl and 75mM CaCl_2 at pH 6 in hydrochloric acid buffer. The results of comparative study on lytic activity of purified enzymes against S. sanguis, S. salivarius, S. mitis showed strong activity against S.sanguis, S. salivarius, S.mitis.
项目成果
期刊论文数量(0)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
数据更新时间:{{ journalArticles.updateTime }}
{{
item.title }}
{{ item.translation_title }}
- DOI:
{{ item.doi }} - 发表时间:
{{ item.publish_year }} - 期刊:
- 影响因子:{{ item.factor }}
- 作者:
{{ item.authors }} - 通讯作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ journalArticles.updateTime }}
{{ item.title }}
- 作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ monograph.updateTime }}
{{ item.title }}
- 作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ sciAawards.updateTime }}
{{ item.title }}
- 作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ conferencePapers.updateTime }}
{{ item.title }}
- 作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ patent.updateTime }}
菅井 基行其他文献
アトピー性皮膚炎患者由来の黄色ブドウ球菌と表皮角化細胞の形態学的解析
特应性皮炎患者金黄色葡萄球菌和表皮角质形成细胞的形态学分析
- DOI:
- 发表时间:
2018 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
松島 彩子;森脇 昌哉;岩本 和真;新津 佳恵;久恒 順三;菅井 基行;秀 道広 - 通讯作者:
秀 道広
黄色ブドウ球菌の系統解析
金黄色葡萄球菌的系统发育分析
- DOI:
- 发表时间:
2008 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
Yue;L.;Daikoku;T.;Hou;X.;Li;M.;Wang;H.;Nojima;H.;Dey;A.K.;Das;S.K;菅井 基行 - 通讯作者:
菅井 基行
水疱性膿痂疹とブドウ球菌熱症様皮膚症候群
大疱性脓疱疮和葡萄球菌热样皮肤综合征
- DOI:
- 发表时间:
2005 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
菅井 基行;小松澤 均;Osamu Yamasaki;菅井 基行;菅井 基行 - 通讯作者:
菅井 基行
ミエリン形成におけるヘッジホッグシグナルの機能とシグナル活性調節機構の解明
阐明hedgehog信号在髓磷脂形成中的功能及信号活性的调控机制
- DOI:
- 发表时间:
2016 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
鈴木 仁人;松井 真理;鈴木 里和;瀬川 孝耶;矢原 耕史;鹿山 鎭男;菅井 基行;柴山 恵吾;吉村 健太郎 - 通讯作者:
吉村 健太郎
Development of real-time metabolomic analysis system and database construction/statistical analysis software
实时代谢组分析系统及数据库建设/统计分析软件开发
- DOI:
- 发表时间:
2015 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
鈴木 仁人;松井 真理;鈴木 里和;瀬川 孝耶;矢原 耕史;鹿山 鎭男;菅井 基行;柴山 恵吾;吉村 健太郎 - 通讯作者:
吉村 健太郎
菅井 基行的其他文献
{{
item.title }}
{{ item.translation_title }}
- DOI:
{{ item.doi }} - 发表时间:
{{ item.publish_year }} - 期刊:
- 影响因子:{{ item.factor }}
- 作者:
{{ item.authors }} - 通讯作者:
{{ item.author }}
{{ truncateString('菅井 基行', 18)}}的其他基金
表皮剥脱毒素スーパーファミリーの作用機構に関する研究
表皮剥脱毒素超家族作用机制研究
- 批准号:
16017268 - 财政年份:2005
- 资助金额:
$ 1.79万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
表皮剥脱毒素スーパーファミリーの作用機構に関する研究
表皮剥脱毒素超家族作用机制研究
- 批准号:
15019068 - 财政年份:2003
- 资助金额:
$ 1.79万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
表皮剥脱毒素遺伝子スーパーファミリーの作用機構に関する研究
表皮剥脱毒素基因超家族作用机制研究
- 批准号:
14021075 - 财政年份:2002
- 资助金额:
$ 1.79万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
致死活性を有する新奇表皮剥脱毒素の作用機構に関する研究
一种新型致死性表皮剥脱毒素的作用机制研究
- 批准号:
13226080 - 财政年份:2001
- 资助金额:
$ 1.79万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
病原大腸菌が産生する毒素CNFの基質特異性についての研究
致病性大肠杆菌产生毒素CNF的底物特异性研究
- 批准号:
11877049 - 财政年份:1999
- 资助金额:
$ 1.79万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Exploratory Research
黄色ブドウ球菌が産生するADPリボシルトランスフェラーゼEDINの作用機序
金黄色葡萄球菌产生的ADP核糖基转移酶EDIN的作用机制
- 批准号:
07670313 - 财政年份:1995
- 资助金额:
$ 1.79万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
黄色ブドウ球菌が産生するADPリボシルトランスフェラーゼEDINの作用機序
金黄色葡萄球菌产生的ADP核糖基转移酶EDIN的作用机制
- 批准号:
06670294 - 财政年份:1994
- 资助金额:
$ 1.79万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
黄色ブドウ球菌の産生する表皮細胞分化抑制因子の構造活性相関について
金黄色葡萄球菌产生的表皮细胞分化抑制剂的构效关系
- 批准号:
63770267 - 财政年份:1988
- 资助金额:
$ 1.79万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
相似海外基金
ファージ由来溶菌酵素を応用した急性移植片対宿主病に対する新規制御薬剤の開発
使用噬菌体来源的裂解酶开发急性移植物抗宿主病的新型控制剂
- 批准号:
23K15332 - 财政年份:2023
- 资助金额:
$ 1.79万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
Comparative structural and functional analysis of Pseudomonas aeruginosa inhibitor of vertebrate lysozyme paralogs
脊椎动物溶菌酶旁系同源物铜绿假单胞菌抑制剂的比较结构和功能分析
- 批准号:
10410804 - 财政年份:2022
- 资助金额:
$ 1.79万 - 项目类别:
ディフィシル菌溶菌酵素の菌種特異性に関する分子メカニズムの解明
阐明艰难梭菌裂解酶细菌物种特异性相关的分子机制
- 批准号:
22K07061 - 财政年份:2022
- 资助金额:
$ 1.79万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
E. faecium特異的ファージ由来溶菌酵素を用いた新規急性GVHD制御法の開発
使用屎肠球菌特异性噬菌体来源的裂解酶开发一种新型急性 GVHD 控制方法
- 批准号:
22K20931 - 财政年份:2022
- 资助金额:
$ 1.79万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
Lactoferrin and lysozyme to promote nutritional, clinical, and enteric recovery: A factorial placebo-controlled randomized trial among children with diarrhea and malnutrition
乳铁蛋白和溶菌酶促进营养、临床和肠道恢复:针对腹泻和营养不良儿童的阶乘安慰剂对照随机试验
- 批准号:
10533817 - 财政年份:2021
- 资助金额:
$ 1.79万 - 项目类别:
Lactoferrin and lysozyme to promote nutritional, clinical, and enteric recovery: A factorial placebo-controlled randomized trial among children with diarrhea and malnutrition
乳铁蛋白和溶菌酶促进营养、临床和肠道恢复:针对腹泻和营养不良儿童的阶乘安慰剂对照随机试验
- 批准号:
10095310 - 财政年份:2021
- 资助金额:
$ 1.79万 - 项目类别:
Lactoferrin and lysozyme to promote nutritional, clinical, and enteric recovery: A factorial placebo-controlled randomized trial among children with diarrhea and malnutrition
乳铁蛋白和溶菌酶促进营养、临床和肠道恢复:针对腹泻和营养不良儿童的阶乘安慰剂对照随机试验
- 批准号:
10322136 - 财政年份:2021
- 资助金额:
$ 1.79万 - 项目类别:
Intestinal lysozyme controls mucosal immune response to microbiota
肠道溶菌酶控制对微生物群的粘膜免疫反应
- 批准号:
10640221 - 财政年份:2019
- 资助金额:
$ 1.79万 - 项目类别:
Intestinal lysozyme controls mucosal immune response to microbiota
肠道溶菌酶控制对微生物群的粘膜免疫反应
- 批准号:
10206126 - 财政年份:2019
- 资助金额:
$ 1.79万 - 项目类别:
Intestinal lysozyme controls mucosal immune response to microbiota
肠道溶菌酶控制对微生物群的粘膜免疫反应
- 批准号:
10427239 - 财政年份:2019
- 资助金额:
$ 1.79万 - 项目类别: