肝細胞分泌神経再生促進因子の同定と老化神経活性化の機構

肝细胞分泌的神经再生促进因子的鉴定及衰老神经激活机制

• 批准号: 06833011
• 负责人: 堀江 秀典
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: Yokohama City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06833011/
• 关键词: 肝細胞; 老化; 神経再生促進因子; コラーゲンゲル; 器官培養; 成熟・老化ラット・マウス; 末梢神経; 網膜

肝細胞から分泌される因子が老化した末梢神経の神経再生を促進するだけでなく、成熟動物の中枢の神経組織からの神経再生をも促進することを明らかにしてきた。本研究は:(1)肝細胞分泌神経再生促進因子の分離・精製を更に進め、この因子を単離しそのアミノ酸シークエンスを決定すること、(2)この因子の作用機序を明らかにすること。を目的として行ってきた。その結果:1.神経再生アッセイ系による肝細胞分泌神経再生・生存維持因子の精製法の確立(1)末梢神経系:成熟・老化マウス及びラットから神経線維を伴った脊髄後根神経節を摘出しコラーゲンゲル内で培養し肝細胞の培養上精の分離分画をアッセイして活性因子の分離精製を進めた。限外濾過膜、ゲル濾過法、各種クロマトグラフィーを用い活性画分の分離精製法を確立し、活性画分の単離に成功した。(2)中枢神経系:成熟ラットの網膜を培養してアッセイ系として用い、(1)での活性画分の活性を確認した。末梢神経での活性画分に活性を示した。同一の肝細胞分泌神経再生・生存維持因子が末梢神経のみならず中枢神経系に対しても活性を示すことが明らかとなった。2.肝細胞培養上精の分離精製培養上精500L集め分離精製を行いアミノ酸シークエンスの部分的決定に成功し、この因子が新規である可能性が極めて高くなった。(特許の関係で詳細報告は割愛)3.肝細胞分泌因子による神経再生促進・生存維持機構の解明活性因子によるアッセイ系の神経組織中での神経栄養因子のmRNAの発現レベルの変化を測定中であり近々その作用機序が明らかになると思われる。

Liver cells secrete factors that promote peripheral neurogenesis, and mature animals 'central neurogenesis. The purpose of this study is to:(1) improve the isolation and purification of the factor for promoting regeneration secreted by hepatocytes;(2) clarify the mechanism of action of this factor. The goal is to create a better environment. The results are as follows:1. Establishment of purification method for hepatocyte secretion of regeneration and survival maintenance factors (1) Isolation and purification of active factors from cultured hepatocytes of peripheral nervous system: maturation, aging and aging. The separation and purification method of active fraction was established by filtration membrane, filtration method and various methods. The separation and purification of active fraction were successfully established. (2)Central nervous system: mature retina culture system,(1) active components activity confirmation The activity of the peripheral nerve is shown by the activity of the component. The same hepatocyte secretes neurogenesis and survival maintenance factors that are associated with the central nervous system. 2. The separation and purification of hepatocyte culture supernatant 500L collection, separation and purification, determination of the part of the acid, the possibility of the new regulation of the factor, is extremely high. 3. Hepatocyte Secretion Factors, Neuroregeneration Promotion and Survival Maintenance Mechanisms, and Activation Factors.

项目成果

高野雅彦: "成熟網膜神経節細胞の培養と軸索再生" 神経眼科. 11. 278-285 (1994)

Masahiko Takano：“成熟视网膜神经节细胞的培养和轴突再生”神经眼科。 11. 278-285 (1994)

Horie,H.: "Three-demensional cell aggregation enhnces growth-promoting activity of NGF in adult DRG." NeuroReport. 6. 37-41 (1994)

Horie,H.：“三维细胞聚集增强了成人 DRG 中 NGF 的生长促进活性。”

Sango,K.: "Nerve growth factor (NGF) restores depletions of calcitonin gene-related peptide and substance P in sensory neurons from diabetic mice in vitro." J.Neurol.Sci.126. 1-5 (1994)

Sango,K.：“神经生长因子 (NGF) 可在体外恢复糖尿病小鼠感觉神经元中降钙素基因相关肽和 P 物质的消耗。”

Horie,H.: "Tissue culture method for neural regeneration of postnatal and mature mammalian retina." Tiss.Cul.Res.Commun.13. 171-178 (1994)

Horie,H.：“产后和成熟哺乳动物视网膜神经再生的组织培养方法。”

Horie,H.: "Regional differences in neurite regeneration of postnatal retinal explants." Brain Res.Bull.34. 381-384 (1994)

Horie,H.：“出生后视网膜外植体神经突再生的区域差异。”