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骨芽細胞におけるPIアンカリングタンパクの生理的役割

PI锚定蛋白在成骨细胞中的生理作用

基本信息

批准号：
07672032
负责人：
戸苅彰史
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Aichi Gakuin University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

外因性に与えたphosphatidylinositol specific phospholipase C(PIPLC)により引き起こされるような骨芽細胞からのPI-アンカリングタンパクの遊離が生理的機構により作動しているか否か、細胞内情報伝達系との関連性について薬理学的に検討した。コンフルエントになったMC3T3-E1細胞を用い、その細胞内情報伝達として重要な働きをしているcAMPおよびカルシウムイオンの影響を調べるためジブチル-cAMP(0.1-3mM)およびカルシウムイオノファーのA23187(0.1-10μM)のPI-アンカリングタンパクであるアルカリホスファターゼ(ALP)の培養溶液中への遊離量を測定した。その際、A23187に強力なALP遊離作用を見い出した。この遊離促進作用はMC3T3-E1, ROS17/2.8およびSaOS-2等の骨芽細胞様細胞において共通の現象であった。A23187はALPの培養液中への遊離を用量依存的に増加させ、MC3T3-E1細胞におけるA23187の効果は処理時間に依存して増加した。しかし、用いた培養液中の血清濃度には依存せず、血清由来の成分を介した作用でないことを確認した。また、プロテインキナーゼA、プロテインキナーゼC、カルモジュリンおよびプロスタグランジン介在の機構であるかを検討するため、staurosporin, TPA, W-7, W-5およびdexamesadone等を添加した際の遊離量を測定した結果、A23187によるALP遊離の増加はML-7処理により有意に抑制され、TPA,スタウロスポリン処理により影響を受けなかった。これらの結果より、A23187によるALP遊離の増加がミオシン軽鎖キナーゼを介した生理的機構に関連していることを示唆し、さらにphosphatidylinositolをアンカーとしたALPの遊離が細胞内情報伝達系により調節されている可能性を示した。

Exogenous and phosphotidylinositol specific phospholipase C(PIPLC) are involved in the initiation and development of PI-A-C in bone bud cells, the activation of dissociative physiological mechanisms, intracellular information transmission systems, and the correlation between them. The intracellular information of MC3T3-E1 cells was measured in the medium and in the medium. The free amount of cAMP in the culture solution was determined by cAMP(0.1-3mM) and PI (0.1-10μM). At the same time, A23187 has strong ALP dissociation effect. This dissociation promotion is a common phenomenon in osteoblast cells such as MC3 T3-E1, ROS17/2.8 and SaOS-2. A23187 cells were isolated from ALP and MC3T3-E1 cells. The serum concentration in culture medium depends on the role of serum origin components. A, C, D, A, B, C, A, B, A, C, A, B, A, B, A, C, A, B, A, C, A, A, B, A, C, A, B, C, A, B, C, A, A, D, A, B, C, A, B, C, A, B, A, A, A, The results showed that the increase of ALP in A23187 was related to the physiological mechanism, and the possibility of regulation of ALP in intracellular information system was also shown.