1分子蛍光観察用の究極感度カメラ開発による細胞膜ナノドメインの機能の解明

通过开发用于单分子荧光观察的终极灵敏相机来阐明细胞膜纳米域的功能

基本信息

  • 批准号:
    16201025
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 32.36万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
  • 财政年份:
    2004
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2004 至 2006
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

本研究の目的は、(1)まず、生細胞中で、1蛍光分子追跡をするための、高感度のカメラシステムを開発すること、(2)次に、このカメラシステムを用いて、ナノラフトの生成機構、及び、構造-機能相関の解明を進めることであった。(1)の高感度のカメラシステムの開発については、本研究期間中に、高感度の3段MCP型イメージインテンシファイアー(像倍率 最大〜107倍)を高速CMOSセンサーに光ファイバーカップルしたカメラを作製した(この部分は、株式会社フォトロンのご協力による)。(2)については、本研究期間中に、下記のことが明らかになった。1)ナノラフトの可塑性についての検討を進めた結果、細胞外からのシグナルによって、より大きく安定なラフトが誘起されることが分かった。2)ラフトの脂質鎖による、表側ラフトと裏側ラフトのカップリングを検討した結果、細胞膜外層に安定化ラフトができること、内層にも安定化ラフトが誘導される可能性が示唆された。3)細胞外からシグナルが来る前の細胞膜では、ラフトはあったとしても非常に小さく、不安定であることが示された。4)グリコシルホスファチジルイノシトールアンカー型受容体(GPI-ARs)へのシグナル入力とそれがどのように細胞内に伝達されるがを調べた結果、リガンド結合によって、GPI-ARsは会合し、それが、会合部分へのコレステロールと糖脂質の濃縮とを誘起して、その部分に、会合体と同じ程度の大きさのやや安定なナノラフトが形成されること、さらに、このGPI-ARクラスターナノラフトに細胞内のラフト関連シグナル分子、GαiやSrc-family-kinase分子がリクルートされ、そこでこれらの分子が結合することによって、Src-family-kinaseが活性化されることが示された。
The purpose of this study is as follows: (1) the purpose of this study is: (1) the purpose of this study is as follows: (1) the purpose of this study is: (1) the purpose of this study is: (1) The main results are as follows: (1) during the period of this study, high-speed CMOS high-speed optical transmission equipment was used to conduct high-speed MCP high-speed MCP optical transmission. (1) during the period of this study, high-speed MCP high-speed MCP-type optical transmission equipment (image magnification ~ 107x), high-speed MCP-type optical transmission, high-speed MCP, high-speed MCP, MCP, MCP, (2) during the period of this study, the middle and lower levels of the study will make sure that they will have a clear understanding of the situation. 1) to improve the results of the plasticity test, to improve the results, to improve the results of the plasticity test, to improve the results, to improve the plasticity, to improve the results, to improve the plasticity, to improve the results, to improve the plasticity, to improve the results, to improve the plasticity, to improve the results, to improve the plasticity, to improve the results, to improve the results. 2) the results of the test, the extracellular stabilization, the stabilization of the extracellular membrane, and the possibility of the stabilization of the extracellular membrane were studied in this paper. 3) the extracellular membrane, the membrane, the 4) in the middle of the day, there was no significant difference between the two groups (GPI-ARs). The results showed that there was no significant difference between the two groups. (4) the results showed that there was a significant increase in the number of intracellular capacitors (GPI-ARs). The results showed that there was no significant difference between the two groups (P > 0.05). The results showed that there was a significant increase in the number of cells in the cell. The confluence is similar to that of diazepam and diazepam. The confluence is similar to that of GPI-AR, GPI-AR, Src-family-kinase, Gα iCoSrc-DNA, Gα iCoSc-DNA.

项目成果

期刊论文数量(40)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Rapid hop diffusion of a G-protein-coupled receptor in the plasma membrane as revealed by single-molecule techniques
  • DOI:
    10.1529/biophysj.104.048538
  • 发表时间:
    2005-05-01
  • 期刊:
  • 影响因子:
    3.4
  • 作者:
    Suzuki, K;Ritchie, K;Kusumi, A
  • 通讯作者:
    Kusumi, A
Three-dimensional dynamic structure of the liquid-ordered domain in lipid membranes as examined by pulse-EPR oxygen probing.
通过脉冲 EPR 氧探测检查脂质膜中液体有序结构域的三维动态结构。
  • DOI:
    10.1529/biophysj.106.097568
  • 发表时间:
    2007
  • 期刊:
  • 影响因子:
    3.4
  • 作者:
    Subczynski,WitoldK;Wisniewska,Anna;Hyde,JamesS;Kusumi,Akihiro
  • 通讯作者:
    Kusumi,Akihiro
Detection of non-Brownian diffusion in the cell membrane in single molecule tracking
  • DOI:
    10.1529/biophysj.104.054106
  • 发表时间:
    2005-03-01
  • 期刊:
  • 影响因子:
    3.4
  • 作者:
    Ritchie, K;Shan, XY;Kusumi, A
  • 通讯作者:
    Kusumi, A
Three-dimensional reconstruction of the membrane skeleton at the plasma membrane interface by electron tomography.
  • DOI:
    10.1083/jcb.200606007
  • 发表时间:
    2006-09-11
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Morone N;Fujiwara T;Murase K;Kasai RS;Ike H;Yuasa S;Usukura J;Kusumi A
  • 通讯作者:
    Kusumi A
Single-molecule imaging analysis of Ras activation in living cells
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  • 发表时间:
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楠見 明弘其他文献

Dynamic organizing principles of the plasma membrane that regulate signal transduction: single-molecule tracking studies
调节信号转导的质膜动态组织原理:单分子追踪研究
  • DOI:
  • 发表时间:
    2012
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    A.Kusumi;K.G.N.Suzuki;R.S.Kasai;K.Ritchie;T.K.Fujiwara;楠見 明弘;Akihiro Kusumi;A. Kusumi
  • 通讯作者:
    A. Kusumi
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含有信号支架蛋白LAT的细胞内囊泡在免疫细胞中充当独立的信号转导场:使用单分子观察方法的研究
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    0
  • 作者:
    廣澤 幸一朗;平本-山木 菜央;吉田 謙太;野崎 梢平;角山 貴昭;唐 博;鈴木 健一;中山 和久;藤原 敬宏;楠見 明弘
  • 通讯作者:
    楠見 明弘
Signal transduction of GPI-anchored receptors based on dimerizatlon and raft-Iipid interaction
基于二聚化和筏-脂质相互作用的 GPI 锚定受体的信号转导
  • DOI:
  • 发表时间:
    2012
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    A.Kusumi;K.G.N.Suzuki;R.S.Kasai;K.Ritchie;T.K.Fujiwara;楠見 明弘;Akihiro Kusumi;A. Kusumi;楠見明弘;楠見明弘;楠見明弘;楠見明弘;楠見明弘
  • 通讯作者:
    楠見明弘
Neuroprotection of metallothionein in ALS-SOD1 is mediated via an endocytic receptor Megalin
ALS-SOD1 中金属硫蛋白的神经保护作用是通过内吞受体 Megalin 介导的
  • DOI:
  • 发表时间:
    2019
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    森瀬 譲二;鈴木 健一;北川 英佳;山本 采季;竹内 祐介;楠見 明弘;竹松 弘;岡 昌吾;山下俊一;Tokuda Eiichi
  • 通讯作者:
    Tokuda Eiichi
細胞膜の階層メソドメイン構造とシグナル変換制御機構:1分子イメージングによる研究
细胞膜的分层中域结构与信号转导控制机制:单分子成像研究
  • DOI:
  • 发表时间:
    2012
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    A.Kusumi;K.G.N.Suzuki;R.S.Kasai;K.Ritchie;T.K.Fujiwara;楠見 明弘;Akihiro Kusumi;A. Kusumi;楠見明弘
  • 通讯作者:
    楠見明弘

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超快去极化检测显微镜的开发以及肌动蛋白膜骨架动力学和神经元扩散障碍的揭示
  • 批准号:
    22K19334
  • 财政年份:
    2022
  • 资助金额:
    $ 32.36万
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    Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
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通过开发超快单分子超分辨率方法揭示纳米液体信号平台
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    2021
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    $ 32.36万
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アクチンと膜ナノドメインの協働による炭疽菌毒素の細胞侵入:1分子観察による解明
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    2013
  • 资助金额:
    $ 32.36万
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神経細胞におけるTrkB受容体の拡散運動制御と機能の1分子解析
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    2011
  • 资助金额:
    $ 32.36万
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    2009
  • 资助金额:
    $ 32.36万
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    12202020
  • 财政年份:
    2000
  • 资助金额:
    $ 32.36万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
細胞膜における情報伝達分子筏の形成と機能:一分子観察・操作法の開発と応用
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    11160207
  • 财政年份:
    1999
  • 资助金额:
    $ 32.36万
  • 项目类别:
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光ピンセットと近接場/原子間力顕微鏡による-分子レベルでの生体分子機構の解明
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  • 批准号:
    11132224
  • 财政年份:
    1999
  • 资助金额:
    $ 32.36万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
細胞膜における情報伝達分子筏の形成と機能:一分子観察・操作法の開発と応用
细胞膜中信息传输分子筏的形成和功能:单分子观察和操作方法的发展和应用
  • 批准号:
    10179207
  • 财政年份:
    1998
  • 资助金额:
    $ 32.36万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
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