通过开发用于单分子荧光观察的终极灵敏相机来阐明细胞膜纳米域的功能-猫眼课题宝

通过开发用于单分子荧光观察的终极灵敏相机来阐明细胞膜纳米域的功能

批准号：

16201025

负责人：

楠見明弘

金额：

$32.36万

依托单位：

Kyoto University

依托单位国家：

日本

项目类别：

Grant-in-Aid for Scientific Research (A)

财政年份：

2004

资助国家：

日本

项目状态：

已结题

起止时间：

2004 至 2006

来源：

https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16201025/

关键词：

1分子観察 1分子ナノバイオロジーナノドメイン細胞膜蛍光顕微鏡高感度カメラシステムラフトドメインシグナル変換冷却インテンシファイヤー 3段MCP シグナルの量子化ナノラフト 1分子蛍光追跡生細胞時間分解能

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英文摘要

本研究の目的は、(1)まず、生細胞中で、1蛍光分子追跡をするための、高感度のカメラシステムを開発すること、(2)次に、このカメラシステムを用いて、ナノラフトの生成機構、及び、構造-機能相関の解明を進めることであった。(1)の高感度のカメラシステムの開発については、本研究期間中に、高感度の3段MCP型イメージインテンシファイアー(像倍率最大〜107倍)を高速CMOSセンサーに光ファイバーカップルしたカメラを作製した(この部分は、株式会社フォトロンのご協力による)。(2)については、本研究期間中に、下記のことが明らかになった。1)ナノラフトの可塑性についての検討を進めた結果、細胞外からのシグナルによって、より大きく安定なラフトが誘起されることが分かった。2)ラフトの脂質鎖による、表側ラフトと裏側ラフトのカップリングを検討した結果、細胞膜外層に安定化ラフトができること、内層にも安定化ラフトが誘導される可能性が示唆された。3)細胞外からシグナルが来る前の細胞膜では、ラフトはあったとしても非常に小さく、不安定であることが示された。4)グリコシルホスファチジルイノシトールアンカー型受容体(GPI-ARs)へのシグナル入力とそれがどのように細胞内に伝達されるがを調べた結果、リガンド結合によって、GPI-ARsは会合し、それが、会合部分へのコレステロールと糖脂質の濃縮とを誘起して、その部分に、会合体と同じ程度の大きさのやや安定なナノラフトが形成されること、さらに、このGPI-ARクラスターナノラフトに細胞内のラフト関連シグナル分子、GαiやSrc-family-kinase分子がリクルートされ、そこでこれらの分子が結合することによって、Src-family-kinaseが活性化されることが示された。

期刊论文(40)

专著(0)

科研奖励(0)

会议论文

Rapid hop diffusion of a G-protein-coupled receptor in the plasma membrane as revealed by single-molecule techniques

DOI： 10.1529/biophysj.104.048538

发表时间： 2005-05-01

期刊：

BIOPHYSICAL JOURNAL

影响因子： 3.4

作者：

[Suzuki, K, Ritchie, K, Kusumi, A]

通讯作者： Kusumi, A

Three-dimensional dynamic structure of the liquid-ordered domain in lipid membranes as examined by pulse-EPR oxygen probing.

通过脉冲 EPR 氧探测检查脂质膜中液体有序结构域的三维动态结构。

DOI： 10.1529/biophysj.106.097568

发表时间： 2007

期刊：

Biophysical journal

影响因子： 3.4

作者：

[Subczynski,WitoldK, Wisniewska,Anna, Hyde,JamesS, Kusumi,Akihiro]

通讯作者： Kusumi,Akihiro

Detection of non-Brownian diffusion in the cell membrane in single molecule tracking

DOI： 10.1529/biophysj.104.054106

发表时间： 2005-03-01

期刊：

BIOPHYSICAL JOURNAL

影响因子： 3.4

作者：

[Ritchie, K, Shan, XY, Kusumi, A]

通讯作者： Kusumi, A

Three-dimensional reconstruction of the membrane skeleton at the plasma membrane interface by electron tomography.

DOI： 10.1083/jcb.200606007

发表时间： 2006-09-11

期刊：

The Journal of cell biology

影响因子： --

作者：

[Morone N, Fujiwara T, Murase K, Kasai RS, Ike H, Yuasa S, Usukura J, Kusumi A]

通讯作者： Kusumi A

Single-molecule imaging analysis of Ras activation in living cells

DOI： 10.1073/pnas.0401354101

发表时间： 2004-05-11

期刊：

PROCEEDINGS OF THE NATIONAL ACADEMY OF SCIENCES OF THE UNITED STATES OF AMERICA

影响因子： 11.1

作者：

[Murakoshi, H, Iino, R, Kusumi, A]

通讯作者： Kusumi, A

共 9 条

Development of the ultrafast depolarization detection microscope and unravelling of actin membrane skeleton dynamics and neuronal diffusion barriers

批准号：

22K19334
项目类别：

Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
资助金额：

$4.08万
财政年份：

2022
负责人：

楠見明弘
依托单位：

Okinawa Institute of Science and Technology Graduate University

Revealing the nano-liquid signaling platform by developing the ultrafast single-molecule super-resolution method

批准号：

21H04772
项目类别：

Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
资助金额：

$27.54万
财政年份：

2021
负责人：

楠見明弘
依托单位：

Okinawa Institute of Science and Technology Graduate University

アクチンと膜ナノドメインの協働による炭疽菌毒素の細胞侵入：１分子観察による解明

批准号：

16F16414
项目类别：

Grant-in-Aid for JSPS Fellows
资助金额：

$1.47万
财政年份：

2016
负责人：

楠見明弘
依托单位：

Okinawa Institute of Science and Technology Graduate University (2017-2018)Kyoto University (2016)