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光ピンセットと近接場/原子間力顕微鏡による-分子レベルでの生体分子機構の解明

使用光镊和近场/原子力显微镜在分子水平上阐明生物分子机制

基本信息

批准号：
11132224
负责人：
楠見明弘
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11132224/
关键词：
一分子膜骨格 CD44 光トラップトランスフェリン受容体多価結合

项目摘要

生体分子認識の理解、特に、多価結合や多重結合の関与する認識/接着の理解のためには、受容体とリガンドなどの直接的な相互作用ばかりでなく、認識に関与する分子の集合状態とそれをサポートする膜骨格などの基質との相互作用が不可欠である。細胞膜の細胞質側表面には、膜骨格のネットワークが張りめぐらされている。細胞表面上の受容体は、このネットワークによって、運動、分布、局在を制御されている。受容体の働きの制御や、相手の細胞に対する接着力の発生のためには、受容体と膜骨格ネットワークとの相互作用が必須である。本年度は、1分子レベルでの研究をさらに推進し、1分子レベルで直接に力をかけて、その応答を1分子レベルで調べる方法を応用し、また、膜上での拡散運動を1分子レベルで追跡する方法を応用して、細胞膜上の膜分子の運動、分布、局在の制御機構を調べた。そのために、リガンド、または、抗体を結合させた金コロイド粒子を作製し、これを、細胞外から膜タンパク質や脂質に結合させ、運動をしらべるとともに、光ピンセット(光トラップ)で牽引した。光ピンセットで牽引した結果、85%のトランスフェリン受容体、60%のCD44は膜骨格には結合していないことがわかった。これらの分子は、膜骨格のフェンスを乗り越えながら牽引された。残りの分子(15%のトランスフェリン受容体、40%のCD44)は、膜骨格や他の膜裏打ち構造に結合していた。これらの分子を光ピンセットで牽引すると、すぐに細胞(膜骨格)からの力が働き始めた。さらに引っ張ると、これらの分子は光ピンセットからはずれ、もと居た場所まで、膜骨格によって引き戻された。

The understanding of molecular recognition, specificity, multi-binding, and multi-binding relationships between recognition and subsequent understanding of receptors, receptors, and direct interactions between molecules, and the interaction between molecules and substrates, are indispensable. Cell membrane cytoplasmic side surface, membrane bone cell growth and development of the two sides of the wall The receptor on the cell surface is in the process of transformation, movement, distribution and control. The interaction between receptor and membrane is necessary for the development of adhesion between receptor and membrane. This year, the research on 1-molecule molecules was promoted, and the direct reaction force and reaction mechanism of 1-molecule molecules were adjusted. The dispersion movement on the membrane and 1-molecule tracking method were applied. The movement, distribution and control mechanism of membrane molecules on the cell membrane were adjusted. In addition, the antibody binds to the gold particle, and the extracellular membrane binds to the lipid particle. In addition, the antibody binds to the light particle. 85% of CD44 receptors and 60% of CD44 receptors are bound to the membrane. The molecular structure of the membrane is not stable. The residual molecules (15% of the total receptor, 40% of CD44) are bound to the membrane structure of the membrane. The molecules in the cell are pulled together by light, and the cells are pulled together by force. In the past few years, the Chinese government has made great efforts to promote the development of science and technology, and has made great efforts to promote the development of science and technology.