腫瘍性タンパク質Skp2の量的制御を司る幹細胞腫瘍化抑制機構の包括的解析

全面解析癌蛋白Skp2定量调控的干细胞肿瘤发生抑制机制

• 批准号: 17H06531
• 负责人: 清水 康平
• 金额: $ 1.75万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2017
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2017-08-25 至 2019-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17H06531/
• 关键词: 再生医療; 腫瘍化; 幹細胞; タンパク質分解; Skp2

様々ながん組織において過剰発現を認め、幹細胞腫瘍化への寄与が示唆される腫瘍性タンパク質Skp2に関して、そのユビキチン-プロテアソーム系による量的制御を担うと考えられる上流のRING型E3ユビキチンリガーゼ(RING#BI)を同定し、RING#BI によるSkp2分解の腫瘍化抑制における役割について解析してきた。まず、RING#BIによるSkp2のユビキチン化に関する分子制御機構を明らかにするため、Skp2に対するRING#BIの結合領域の同定を試みた。欠失変異体を用いた解析より、RING#BIはSkp2のN末端領域で結合し、Skp2のユビキチン化・分解に必須の領域であることが明らかとなった。また、Skp2の既知上流E3として知られるCdh1はSkp2のD-boxを介してユビキチン化することが報告されているが、本課題においてRING#BIによるSkp2のユビキチン化にD-boxは不要であることが明らかとなった。この知見をもとに、RING#BIに特異的なSkp2の時間・空間的制御について検討を進めている。さらに、Skp2がRING#BIの生理的な基質であることを証明するにあたり、CRISPR-Cas9システムを用いてRING#BIのノックアウト細胞株を樹立し、Skp2及びSkp2の基質の発現量を検証した。その結果、RING#BIノックアウト細胞においてSkp2の発現量は上昇し、それに伴いSkp2基質の発現量が低下することを確認した。また、RING#BIノックアウト細胞は、DNAダメージによるアポトーシス誘導に抵抗性を示し、さらに、細胞増殖の促進が認められることから、細胞レベルにおいてRING#BIの腫瘍化抑制因子としての機能を見出すことができた。

Others 々 な が ん organization に お い て before turning 発 を now recognize め, stem cells swollen sores へ の send が in stopping さ れ る swollen sores sex タ ン パ ク qualitative Skp2 に masato し て, そ の ユ ビ キ チ ン - プ ロ テ ア ソ ー ム department に よ る amount of suppression を bear う と exam え ら れ る upper の RING type E3 ユ ビ キ チ ン リ ガ ー ゼ RING# (BI) を し, RIN G#BI によるSkp2 decomposition <s:1> abscification inhibition における corotomy に て て analysis て て た た. ま ず, RING# BI に よ る Skp2 の ユ ビ キ チ ン change に masato す る molecular system of the royal institution を Ming ら か に す る た め, Skp2 に す seaborne る RING# BI の の combining field with constant を try み た. Owe loss - variant を with い た parsing よ り, RING# BI は Skp2 の N terminal area で し, Skp2 の ユ ビ キ チ ン must change, decomposition に の field で あ る こ と が Ming ら か と な っ た. ま た, Skp2 の know both upper E3 と し て know ら れ る Cdh1 は Skp2 の D - box を interface し て ユ ビ キ チ ン change す る こ と が report さ れ て い る が, this topic に お い て RING# BI に よ る Skp2 の ユ ビ キ チ ン change に D - box は don't で あ る こ と が Ming ら か と な っ た. こ の knowledge を も と に, RING# BI に specific な Skp2 の the suppression of space, time に つ い て beg を 検 into め て い る. さ ら に, Skp2 が RING# BI の physiological な matrix で あ る こ と を prove す る に あ た り, the CRISPR - Cas9 シ ス テ ム を with い て RING# BI の ノ ッ ク ア ウ ト cell lines を し, Skp2 and び Skp2 の matrix の 発 now quantity を 検 card し た. そ の results, RING# BI ノ ッ ク ア ウ ト cells に お い て Skp2 の 発 now rising は し, そ れ に with い Skp2 matrix の 発 now low quantity が す る こ と を confirm し た. ま た, RING# BI ノ ッ ク ア ウ は ト cells, DNA ダ メ ー ジ に よ る ア ポ ト ー シ ス induced に resistance を し, さ ら に, cells raised colonization の promote が め ら れ る こ と か ら, cell レ ベ ル に お い て RING# BI の swollen sores the inhibiting factor と し て を の functions show the す こ と が で き た.

项目成果

抗アポトーシスタンパク質MCL1の安定性制御におけるアセチル化の役割

乙酰化在调节抗凋亡蛋白 MCL1 稳定性中的作用

• 发表时间: 2017
• 作者: 清水 康平;犬塚 博之;福島 秀文;福本 敏
• 通讯作者: 福本 敏

Beth Israel Deaconess Medical Center（米国）

贝斯以色列女执事医疗中心（美国）

Hajdu-Cheney症候群におけるNotch2変異を介した骨粗鬆症病態の分子機構解明

阐明 Hajdu-Cheney 综合征 Notch2 突变介导的骨质疏松病理学分子机制

• 发表时间: 2018
• 作者: 清水 康平;福島 秀文
• 通讯作者: 福島 秀文