Construction of mammalian cell-based cell and bioprocess engineering

基于哺乳动物细胞的细胞和生物过程工程的构建

基本信息

批准号：
22H00276
负责人：
大政健史
金额：
$ 26.79万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2027-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

チャイニーズハムスター卵巣 (CHO)細胞は、構築されてから50年以上、生体外にて増殖しており、科学的研究のみならず、産業においても多用されている工業用動物細胞である。特に、バイオ医薬品生産においては実際に上市されている抗体医薬の6割以上のみならず、近年ではバイオ医薬品全体の5割近くの生産宿主として、生産基盤を支えている。現在、CHO細胞は10g/Lを超える生産も可能であり、培養コストもg数ドルが達成可能である。ところがCHO細胞自身の科学的解明については、まだまだ十分とは言えない。そこで、本研究では、これまでの成果を踏まえ、工業動物細胞を対象として、CHO細胞を用いた新モダリティ生産等を対象とし、①細胞内トラフィックの解明とボトルネックプロセスの同定(2022-2024年度)、さらには、CHO細胞の新しい展開をはかる②上記に基づくセルエンジニアリング手法の構築(2023-2025年度)、そして、これらを組み合わせた③工業用動物細胞を用いた高度生産プロセスの基盤(2024-2026年度)を構築することを目的とした。2022年度は、研究計画に沿って、IgNARならびに手足口病のVLP,さらにはCovid-19VLPの発現系を構築している。さらには、細胞内トラフィックに関連する因子の高発現の生産性に及ぼす影響の解析をおこなった。その結果、VLPについては、CHO細胞による生産系の確立ならびに、その確認を手足口病VLPならびにCovid-19-VLPについて発現ベクターの組み込みならびに電子顕微鏡での発現確認も行えた。IgNARについては、細胞内の応答因子について確認を行った。これらの成果については、国内外の学会において発表を行った。

自建造以来，中国仓鼠卵巢（CHO）细胞已经在体外长达50年，并且是工业动物细胞，不仅在科学研究中而且在工业中广泛使用。特别是，在生物制药生产中，不仅实际销售的抗体药物中的60％，但近年来，它支持了生产基地作为生产宿主，占所有生物药物的近50％。当前，CHO细胞可以生产超过10g/L，并且在几种g的培养成本中可以实现培养成本。但是，仍然不足以解释CHO细胞本身的科学阐明。因此，基于到目前为止的结果，这项研究旨在制造动物细胞使用CHO细胞产生新的模式，而1）阐明细胞内交通并确定瓶颈过程（2022-2024）（2022-2024），并进一步开发新的CHO细胞（2023-2025）（2023-2025）（2023-2025）（2023-2025），并基于上述动物（2023-2025）构建了一种细胞工程，并构建了一个组合，并组合这些组合，并组合这些组合，并组合了组合组合的组合。（2024-2026）。在2022年，根据研究计划，我们正在为IGNAR，手，脚和口腔疾病以及COVID-19VLP构建一个表达系统。此外，分析了与细胞内流量相关的高表达对生产力的影响。结果，可以通过CHO细胞建立生产系统，并通过手，脚和口腔疾病VLP和COVID-19-VLPS确认VLP的生产，并结合表达向量并通过电子显微镜确认表达。对于IGNAR，证实了细胞内反应因子。这些结果在日本和国外的学术会议上提出。

项目成果

期刊论文数量（29）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

動物細胞を利用したタンデム型二重特異性 scFv 抗体の製造適合性評価

使用动物细胞制造串联双特异性 scFv 抗体的适用性评估

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
森田　俊哉;吉本　則子;西岡美玖，西岡美穂，小川紗也香，金山直樹，波多野直哉，徳光浩，曲正樹;福間奈々子，天羽宏枝，伊藤洋一郎，石井純，近藤昭彦，梅津光央，鬼塚正義
通讯作者：
福間奈々子，天羽宏枝，伊藤洋一郎，石井純，近藤昭彦，梅津光央，鬼塚正義

CHO-K1 細胞"株を用いたSARS-CoV-2 ウイルス様粒子の生産

使用 CHO-K1 细胞系生产 SARS-CoV-2 病毒样颗粒